Характеристика неканонического пути в воспалительных моноцитах пациентов с тяжелым сепсисом (CASPASEs)
Обзор исследования
Подробное описание
Липополисахарид (ЛПС) стенки грамотрицательных бактерий является одним из патоген-ассоциированных молекулярных паттернов (ПАМП), которые распознаются клетками врожденной иммунной системы через Toll-подобный рецептор 4 (TLR4). Взаимодействие LPS/TLR4 индуцирует секрецию различных провоспалительных цитокинов. Среди них интерлейкин-1β (IL-1β) является основным цитокином, и изменения его секреции связаны с различными заболеваниями, такими как периодический синдром, ассоциированный с криопирином (CAPS), подагра, ревматоидный артрит или рассеянный склероз.
Высвобождение IL-1β контролируется белком молекулярной платформы, известным как инфламмасома. Каноническим белком (то есть законсервированным в эволюции) инфламмасомы NLRP3 является NLRC4, который взаимодействует с адапторным белком ASC для активации каспазы-1, что способствует расщеплению интерлейкина IL-1β. Грамотрицательные бактерии, такие как Escherichia coli, вызывают неканоническую активацию каспазы-1, каспазы-11In с участием большего количества NLRP3 и AUC. У мышей каспаза-11 необходима для иммунного ответа на грамотрицательные бактерии, но бактериальные PAMP, ответственные за запуск неканонической инфламмасомы, еще предстоит идентифицировать. Недавно было показано, что каспаза-11 участвует в гибели мышей, подвергшихся септическому шоку. Модель на мышах требует каспазо-11-зависимого механизма, каспазо-независимого -1, поскольку мыши CASP1-/- также чувствительны к LPS, как и мыши дикого типа. Ключевой вопрос, на который необходимо ответить, заключается в том, вызывает ли LPS подобные события в клетках человека. Если это так, то эти знания могут быть полезны при разработке лекарств для лечения сепсиса.
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Контакты и местонахождение
Места учебы
-
-
Ile de France
-
Paris, Ile de France, Франция, 75014
- Groupe hospitalier Paris saint Joseph
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
- ВЗРОСЛЫЙ
- OLDER_ADULT
- РЕБЕНОК
Принимает здоровых добровольцев
Полы, имеющие право на обучение
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- пациенты с сепсисом тяжелой степени (бактериальная инфекция, связанная с нарушением хотя бы одной жизненно важной функции), определенным в соответствии с критериями консенсусной конференции
- пациенты, диагноз которых поставлен в течение 24 часов с момента открытия исследовательской лаборатории Пастера
- пациенты с артериальным катетером (чтобы не накладывать больному дополнительную пункцию) будут набираться в отделение интенсивной терапии Госпиталя Св. Иосифа. Артериальная кровь (20 мл) будет заряжена в течение 24 часов с момента появления критериев тяжелого сепсиса, в рабочее время лаборатории Института Пастера, с помощью вакуумных пробирок под гепарином (Vacutainer), отправлена курьером в течение 2 часов после изъятия (чтобы клетки были достаточно «свежими» при обработке в лаборатории)
Критерий исключения:
- никто
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
больные с тяжелым сепсисом
образцы крови от пациентов с тяжелым сепсисом
|
Выделение и стимуляция моноцитов, приготовление клеточных лизатов, измерение продукции цитокинов, вестерн-блоттинг
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Временное ограничение |
|---|---|
|
Охарактеризовать экспрессию каспазы-4 и -5 путем измерения продукции цитокинов: концентрации IL-1β и IL-1α будут определяться с помощью ELISA в клеточном супернатанте, который будет собираться из стимулированных или нет моноцитов.
Временное ограничение: Через два часа после забора крови: выделение и стимуляция моноцитов, а не приготовление клеточных лизатов
|
Через два часа после забора крови: выделение и стимуляция моноцитов, а не приготовление клеточных лизатов
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Временное ограничение |
|---|---|
|
Соотнесите активацию каспаз-4 и -5 с продукцией IL-1β с (канонической инфламмасомой) и IL-1α (неканонической инфламмасомой), измеренной вестерн-блоттингом
Временное ограничение: Через два часа после забора крови: выделение и стимуляция моноцитов, а не приготовление клеточных лизатов
|
Через два часа после забора крови: выделение и стимуляция моноцитов, а не приготовление клеточных лизатов
|
Соавторы и исследователи
Следователи
- Главный следователь: Benoit Misset, Professor, Groupe hospitalier Paris saint Joseph
- Главный следователь: Jean Marc Cavaillon, Professor, Unité Cytokines et Inflammation, Institut Pasteur, Paris
- Главный следователь: Alessandra Mortellaro, Singapore Immunology Network, Agency for Science, Technology and Research, 8A Biomedical Grove, #04-06 Immunos, Singapore
Публикации и полезные ссылки
Общие публикации
- Bone RC, Balk RA, Cerra FB, Dellinger RP, Fein AM, Knaus WA, Schein RM, Sibbald WJ. Definitions for sepsis and organ failure and guidelines for the use of innovative therapies in sepsis. The ACCP/SCCM Consensus Conference Committee. American College of Chest Physicians/Society of Critical Care Medicine. Chest. 1992 Jun;101(6):1644-55. doi: 10.1378/chest.101.6.1644.
- Conforti-Andreoni C, Ricciardi-Castagnoli P, Mortellaro A. The inflammasomes in health and disease: from genetics to molecular mechanisms of autoinflammation and beyond. Cell Mol Immunol. 2011 Mar;8(2):135-45. doi: 10.1038/cmi.2010.81. Epub 2011 Jan 24.
- Zambetti LP, Laudisi F, Licandro G, Ricciardi-Castagnoli P, Mortellaro A. The rhapsody of NLRPs: master players of inflammation...and a lot more. Immunol Res. 2012 Sep;53(1-3):78-90. doi: 10.1007/s12026-012-8272-z.
- Vigano E, Mortellaro A. Caspase-11: the driving factor for noncanonical inflammasomes. Eur J Immunol. 2013 Sep;43(9):2240-5. doi: 10.1002/eji.201343800.
- Kayagaki N, Warming S, Lamkanfi M, Vande Walle L, Louie S, Dong J, Newton K, Qu Y, Liu J, Heldens S, Zhang J, Lee WP, Roose-Girma M, Dixit VM. Non-canonical inflammasome activation targets caspase-11. Nature. 2011 Oct 16;479(7371):117-21. doi: 10.1038/nature10558.
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования
Первичное завершение (Действительный)
Завершение исследования (Действительный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Оценивать)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Действительный)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Дополнительные соответствующие термины MeSH
Другие идентификационные номера исследования
- 2013-A01617-38
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .