Гистологические изменения кожи под действием различных пилинговых агентов при хирургическом подкожном удалении кожи

Письменное информированное согласие должно быть получено от 9 случайно выбранных пациенток европеоидной расы в возрасте от 40 до 80 лет, которые будут проходить процедуру подтяжки лица с помощью пилинга (PAVE) в Ocean Clinic, Марбелья, Испания, для участия в гистологическом исследовании случай-контроль с внутрипредметный дизайн.

После завершения подтяжки лица подкожная подкожная избыточная предушная кожа с обеих сторон, которая должна быть резецирована в результате подтяжки в любом случае у каждого исследуемого пациента, не резецируется и полностью разделяется пополам, чтобы получить четыре образца одинакового размера, два на с каждой стороны, не соприкасаясь друг с другом, чтобы предотвратить любое взаимодействие между отшелушивающими агентами (n=9 образцов на обработку). Один образец служит контролем, в то время как остальные три образца обрабатываются одним и тем же хирургом различными пилинговыми агентами: пилинг трихлоруксусной кислотой (TCA) в концентрациях 20% и 40% и пилинг фенолом/кротоновым маслом. Образцы TCA немедленно очищают от кожуры в течение 2-4 минут до равномерного инея и нейтрализуют в точке равномерного инея. Образцы, очищенные от фенола/кротонового масла, закрываются силиконовой лентой на 24 часа и не нейтрализуются. Через 24 часа обычного пребывания пациента в стационаре образцы кожи резецируют, преаурикулярную рану ушивают и все образцы помещают в 10 % нейтральный забуференный формалин. Образцы немедленно обрабатываются, обрезаются, заливаются, делаются срезы и окрашиваются гематоксилином и эозином (H&E) одним и тем же исследователем. Гистологическая оценка, которая будет проводиться в Тюбингене, проводится с использованием микроскопа, а снимки делаются с 10-кратным, 25-кратным и 100-кратным увеличением с помощью цифровой камеры. Два обученных эксперта-гистолога, не осведомленные о дизайне исследования, независимо друг от друга проводят гистологическую оценку. Глубину некроза в мкм определяют путем анализа повреждения ткани по отношению к гистологическим слоям кожи. Все срезы оценивают с помощью световой микроскопии для оценки средней глубины некроза в трех образцах в трех разных местах для каждого образца. Измеряют вертикальную высоту в мкм между базальной мембраной кожи и самым глубоким проникновением повреждения ткани, а также общую толщину эпидермиса и дермы. На основании гистоморфологических изменений определяют фактическую глубину шелушения и классифицируют аналогично существующей классификации ожогов: поверхностные, поверхностно-частичные, глубоко-частичные и полнослойные.