Эта страница была переведена автоматически, точность перевода не гарантируется. Пожалуйста, обратитесь к английской версии для исходного текста.

Новый хирургический метод лечения нестабильного витилиго

5 января 2017 г. обновлено: Davinder Parsad, Postgraduate Institute of Medical Education and Research

Сравнительное исследование между аутологичной некультивируемой суспензией эпидермальных клеток и комбинацией аутологичной некультивируемой суспензии эпидермальных клеток и некультивируемой суспензии кожных клеток при стабильном витилиго

Витилиго представляет собой сложное заболевание, вызывающее избирательную, часто прогрессирующую потерю функционирующих меланоцитов из базального слоя эпидермиса, что приводит к появлению белых пятен на коже и иногда на слизистых оболочках. Распространенность витилиго во всем мире составляет около 1%, тогда как в Индии она составляет около 3-4% в диапазоне от 0,46% до 8,8%.

Этиопатогенез витилиго многофакторный и состоит из генетических, иммунологических факторов и факторов окружающей среды. Факторы окружающей среды и генетические факторы действуют согласованно, разрушая меланоциты. Активные формы кислорода (АФК) играют важную роль в патологии витилиго, но аутоиммунный патогенез был предложен в качестве одной из основных причин витилиго.

Хирургические методы, в основном трансплантация суспензии некультивируемых эпидермальных клеток, являются эффективным методом лечения стабильного витилиго. Трансплантация аутологичной некультивируемой суспензии эпидермальных клеток и суспензии некультивируемых дермальных клеток в сочетании (вид техники клеточной трансплантации) является новым хирургическим методом лечения витилиго. Цитотоксические CD8+ (кластер дифференцировки 8+) клетки в очагах витилиго могут определять судьбу трансплантации, а стратегии против активации CD8+ Т-клеток могут быть полезны для пациентов, перенесших трансплантацию меланоцитов. Мезенхимальные клетки могут подавлять пролиферацию Т-клеток и индуцировать апоптоз Т-клеток. Bartsch впервые идентифицировал и охарактеризовал дермальные мезенхимальные клетки (DMC). Они обладают потенциалом многолинейной дифференцировки в адипоциты, остеоциты и хондроциты. Эффективность трансплантации аутологичных меланоцитов у пациентов с витилиго можно предсказать по активности CD8+ Т-клеток, направленных на самонаведение кожи вокруг очага поражения, а иммунорегуляторные DMC можно использовать в качестве вспомогательного агента для повышения эффективности.

В этом пилотном исследовании планируется сравнить трансплантацию аутологичной суспензии некультивируемых эпидермальных клеток с ее комбинацией с суспензией некультивируемых дермальных клеток в качестве нового метода в хирургии витилиго в отношении стабильности витилиго в отношении степени репигментации, соответствия цвета репигментированной области, удовлетворенность пациентов и нежелательные явления, если таковые имеются. Это первое исследование, использующее трансплантацию аутологичной некультивируемой суспензии эпидермальных клеток и суспензии некультивируемых дермальных клеток в сочетании в качестве нового метода хирургии витилиго.

Обзор исследования

Подробное описание

Витилиго, наиболее распространенное нарушение пигментации, представляет собой «идиопатическое» приобретенное нарушение пигментации, вызванное потерей функциональных меланоцитов из эпидермиса. Течение заболевания непредсказуемо, но часто прогрессирует с фазами стабилизировавшейся депигментации. Обычно это начинается в детстве или в юношеском возрасте. Примерно от одной трети до половины больных заболевают в возрасте до 20 лет. Наличие витилиго на открытых участках тела приводит к социальному смущению, психологическим потрясениям и косметическим увечьям у пострадавших.

Его распространенность составляет 1%, колеблясь от 0,1 до >8,8% в разных странах земного шара. Оба пола страдают в равной степени, хотя большее количество сообщений среди женщин, вероятно, связано с более серьезными социальными последствиями для женщин и девочек, затронутых этим заболеванием.

Варианты лечения Существует ряд терапевтических вариантов лечения витилиго, но по-прежнему существует потребность в быстродействующем эффективном лечении. Лечебного лечения этого состояния не существует. Лечение витилиго является настоящей проблемой для дерматолога.

Медицинские методы лечения:

Наиболее широко используются кортикостероиды (местные, внутриочаговые и системные), пероральный мини-пульс, ПУВА (местная и системная), НБУВБ, кальципотриол и такролимус. Некоторые из менее часто используемых медицинских средств включают фенилаланин, келлин, местный миноксидил, левамизол и мелагенин. Недавно было показано, что пероральный миноциклин эффективен при лечении витилиго.

Большинство этих методов лечения направлены на восстановление функции меланоцитов за счет их противовоспалительного или иммуномодулирующего действия и предотвращения саморазрушения меланоцитов, чтобы восстановить нормальный внешний вид и функцию кожи.

Хирургические методы лечения:

Все больные витилиго должны изначально лечиться медикаментозными методами. Хирургические методы являются важным решением для стабильного витилиго, рефрактерного к медикаментозному лечению. Высокие показатели репигментации достигаются с помощью всех процедур, описанных до сих пор, в большинстве анатомических областей, но они малоэффективны для акральных областей и костных выступов. Одностороннее витилиго является клинической формой с лучшим ответом на методы пересадки и трансплантации, и значительная часть пациентов со стабильным двусторонним заболеванием также отвечает адекватно. Тем не менее, правильный отбор пациентов важен для достижения максимальных результатов. Однако ни один из хирургических методов, разработанных до сих пор, не является одинаково эффективным для всех пациентов и участков тела, и существует потребность в постоянных исследованиях и инновациях для улучшения вариантов хирургического лечения витилиго.

Цели различных оперативных вмешательств:

A) Камуфляжная татуировка: введение искусственных пигментов в очаги поражения для постоянного камуфляжа.

Б) Иссечение: удаление депигментированных участков, например иссечение с первичным закрытием и укрытием тонким трансплантатом Тирша.

C) Трансплантация меланоцитов: обычно используются методы аутологичной трансплантации меланоцитов.

Тканевые трансплантаты:

  1. Тонкие и ультратонкие расщепленные графты (STSG)
  2. Аспирационные блистерные эпидермальные трансплантаты (SBEG)
  3. Мини-пробивные трансплантаты (MPG)
  4. Фолликулярные трансплантаты волос (HFG)

    Клеточные трансплантаты:

  5. Суспензия некультивируемых эпидермальных клеток (NCES)
  6. Культивируемые «чистые» меланоциты (CM)
  7. Культивированные эпителиальные трансплантаты (КЭ)
  8. Аутологичная некультивированная суспензия клеток наружной корневой оболочки волосяного фолликула, также называемая суспензией фолликулярных клеток (FCS) терапевтическая дермабразия, лазерная абляция, криохирургия (распыление жидкого азота), иглы и местное применение фенола или трихлоруксусной кислоты.

Каждый метод имеет свои преимущества и недостатки. Поскольку конкретных данных проспективных исследований в этой области нет, рекомендовать, какой хирургический подход к лечению витилиго дает наилучший результат, непросто.

«Консенсусная конференция по глобальным проблемам витилиго, 2011 г.», созванная Европейской целевой группой по витилиго (VETF), пришла к выводу, что оценка «общей» стабильности является неточной и ненадежной, тогда как индивидуальная стабильность поражения более надежна, особенно при использовании в контексте хирургического вмешательства.

Методы и размер поражений:

В зависимости от размера обрабатываемой области метод может варьироваться. Простые методы, такие как мини-пересадка эпидермиса и аспирация эпидермиса, полезны при поражениях небольшого или среднего размера. Наоборот, при обширных депигментированных дефектах может потребоваться клеточная трансплантация.

Возраст:

Из-за инвазивного характера хирургических процедур они не рекомендуются детям; тем не менее, высоко мотивированных подростков можно лечить под седацией или общей анестезией. Кроме того, неудивительно, что пациенты старше 50 лет могут быть заинтересованы в хирургической репигментации.

Психологические аспекты:

Некоторые пациенты с сильной эмоциональной травмой из-за депигментации могут обратиться за консультацией по поводу инвазивных процедур. Однако может потребоваться психологическая оценка, чтобы установить реальную потребность в хирургическом лечении.

Фотозапись:

Иллюстрации рекомендуются для помощи в определении процента улучшения, качества репигментации и возможных побочных эффектов.

Ожидания пациента:

Репигментация не всегда сравнима с кожей с нормальной пигментацией, и окончательные результаты значительно различаются от пациента к пациенту. Однако большинство людей довольны достигнутыми результатами; мелкие дефекты имеют гораздо меньшее значение, чем заметная репигментация витилигинозной кожи, в основном у этнических пациентов с темным цветом лица; иногда хирургическая репигментация может выглядеть даже лучше, чем то, что наблюдается у многих пациентов после медикаментозной терапии.

Метод и донорский сайт:

Соответствующее обучение работе с определенным методом является важной предпосылкой хирургического лечения. Донорский участок должен быть максимально скрыт, и у большинства пациентов для этой цели может подходить ягодичная область.

Показатели успеха различных хирургических вариантов:

Среди всех процедур аспирационные блистерные эпидермальные трансплантаты, а также тонкие и ультратонкие расщепленные трансплантаты кажутся наиболее эффективными процедурами с общим уровнем успеха 80,3% (ДИ 76,4–84,2%). и 77,9% (ДИ 72,2-83,6%) соответственно. Но недавнее рандомизированное исследование, непосредственно сравнивающее NCES и SBEG, показало, что NCES значительно лучше, чем SBEG. Среди клеточных трансплантатов все методы кажутся одинаково эффективными с показателем успеха 61,1% (ДИ 56,1-66,1%). 63,6% (ДИ 57,2–70%) и 63,6% (ДИ 55,8–70,6%) для суспензии некультивируемых эпидермальных клеток, культивируемых меланоцитов и культивируемого эпидермиса соответственно. Средняя репигментация с некультивируемой экстрагированной суспензией клеток наружного корневого влагалища составляет около 65,7%.

СУСПЕНЗИЯ НЕКУЛЬТИВИРОВАННЫХ ЭПИДЕРМАЛЬНЫХ КЛЕТОК Техника получения суспензии некультивируемых эпидермальных клеток впервые была предложена Gauthier et al. Суспензию готовили путем инкубации донорской кожи, полученной с волосистой части головы, в 0,25% трипсине в течение 18 часов. Суспензию вводили в пузыри, образовавшиеся при криотерапии. У восьми из 12 пролеченных пациентов наблюдалась > 70% репигментация в месте витилиго. Было высказано предположение, что присутствие кератиноцитов в суспензии обеспечивает необходимые факторы роста для роста меланоцитов. Они заявили, что этот метод может стать простой и эффективной альтернативой дорогостоящему методу трансплантации культивированных меланоцитов.

НЕКУЛЬТИВИРОВАННАЯ СУСПЕНЗИЯ КОЖНЫХ КЛЕТОК

Дермальные мезенхимальные клетки были первоначально выделены из дермы молодых и взрослых мышей Toma et al., Впоследствии та же группа идентифицировала такую ​​​​популяцию клеток в коже человека. Георг Барч впервые идентифицировал и охарактеризовал кожные мезенхимальные клетки (DMC). DMC обладали потенциалом дифференцировки по нескольким линиям в адипоциты, остеоциты и хондроциты. Поверхностный антигенный профиль DMC был положительным в отношении CD90, но отличался отрицательностью в отношении CD34.

Чжоу и соавт. исследовали факторы, определяющие эффективность трансплантации аутологичных меланоцитов у пациентов с витилиго, сосредоточив внимание на коже вокруг очага поражения CD8+ T-лимфоцитов, и изучили потенциальное влияние дермальных мезенхимальных клеток (DMC) на активность CD8+ T-клеток in vitro. Пациенты с большим количеством CD8+ T-клеток вокруг поражения были связаны с плохой скоростью репигментации, и значительно меньшее количество CD8+ T-клеток инфильтрировалось у пациентов с отличным или хорошим ответом на репигментацию. Кроме того, при совместном культивировании с DMC в соотношении 1:1 пролиферация CD8+ Т-клеток, возвращающихся к коже, значительно ингибировалась, поскольку процент пролиферативных CD8+ T-клеток снизился с 94,72% до 39,50% (p < 0,05) после совместного культивирования DMC. В системе совместного культивирования DMC значительно ингибировали пролиферацию клеток CD8+ T и индуцировали апоптоз этих клеток. Эти данные подтверждают, что DMC индуцируют значительные иммуносупрессивные способности в отношении CD8+ Т-лимфоцитов, возвращающихся в кожу, и могут способствовать повышению эффективности трансплантации меланоцитов. Суспензия некультивируемых клеток дермы (NDCS) — это новый метод повышения эффективности суспензии некультивируемых эпидермальных клеток (NCES).

Тип исследования

Интервенционный

Регистрация (Ожидаемый)

40

Фаза

  • Непригодный

Контакты и местонахождение

В этом разделе приведены контактные данные лиц, проводящих исследование, и информация о том, где проводится это исследование.

Места учебы

      • Chandigarh, Индия, 160012
        • Рекрутинг
        • PGIMER

Критерии участия

Исследователи ищут людей, которые соответствуют определенному описанию, называемому критериям приемлемости. Некоторыми примерами этих критериев являются общее состояние здоровья человека или предшествующее лечение.

Критерии приемлемости

Возраст, подходящий для обучения

18 лет и старше (Взрослый, Пожилой взрослый)

Принимает здоровых добровольцев

Нет

Полы, имеющие право на обучение

Все

Описание

Критерии включения:

  • Субъекты с клиническим диагнозом фокального, сегментарного или генерализованного витилиго, который был стабилен более 3 месяцев.

Критерий исключения:

  1. Возраст менее 18 лет
  2. Беременность
  3. Пациент с активно распространяющимся витилиго
  4. Появление новых высыпаний
  5. История кёбнеризации
  6. Гипертрофические рубцы или келоидная тенденция в анамнезе
  7. Нарушения свертываемости крови
  8. Пациенты с нереалистичными ожиданиями

Учебный план

В этом разделе представлена ​​подробная информация о плане исследования, в том числе о том, как планируется исследование и что оно измеряет.

Как устроено исследование?

Детали дизайна

  • Основная цель: Уход
  • Распределение: Рандомизированный
  • Интервенционная модель: Параллельное назначение
  • Маскировка: Нет (открытая этикетка)

Оружие и интервенции

Группа участников / Армия
Вмешательство/лечение
Активный компаратор: Суспензия некультивируемых эпидермальных клеток
У 20 пациентов со стабильным витилиго с длительностью стабильности более 3 месяцев будет проведена некультивируемая суспензия эпидермальных клеток. Пациенты будут разделены на 2 подгруппы по 10 пациентов в каждой со сроком стабильности 3-6 месяцев и более 1 года соответственно, и будет сделана суспензия некультивируемых эпидермальных клеток.
Суспензия некультивируемых эпидермальных клеток. Образец кожи с расщепленной толщиной будет перенесен в асептических условиях в контейнер с физиологическим раствором и передан в лабораторию. Там кожный трансплантат будет перенесен в раствор трипсина-ЭДТА (0,25% трипсина и 0,02% ЭДТА) в чашке Петри и инкубирован в течение ночи при 4 ° C в 5% CO2 для отделения эпидермиса от дермы. Раствор ЭДТА удаляют, добавляют PBS и хорошо пипетируют, чтобы отделить клетки от ткани. Суспензию центрифугируют при 1000 об/мин в течение 5 минут. Затем надосадочную жидкость удаляют и добавляют фосфатно-солевой буфер для получения суспензии некультивируемых эпидермальных клеток.
Экспериментальный: Суспензия некультивируемых кожных клеток
У 20 пациентов со стабильным витилиго с продолжительностью стабильности более 3 месяцев будет проведена комбинация суспензии некультивируемых эпидермальных клеток и суспензии некультивируемых дермальных клеток. Пациенты будут разделены на 2 подгруппы по 10 пациентов в каждой со сроком стабильности 3-6 месяцев и более 1 года соответственно, и будет применяться комбинация суспензии некультивируемых эпидермальных клеток и суспензии некультивируемых дермальных клеток.
Суспензия некультивируемых эпидермальных клеток. Образец кожи с расщепленной толщиной будет перенесен в асептических условиях в контейнер с физиологическим раствором и передан в лабораторию. Там кожный трансплантат будет перенесен в раствор трипсина-ЭДТА (0,25% трипсина и 0,02% ЭДТА) в чашке Петри и инкубирован в течение ночи при 4 ° C в 5% CO2 для отделения эпидермиса от дермы. Раствор ЭДТА удаляют, добавляют PBS и хорошо пипетируют, чтобы отделить клетки от ткани. Суспензию центрифугируют при 1000 об/мин в течение 5 минут. Затем надосадочную жидкость удаляют и добавляют фосфатно-солевой буфер для получения суспензии некультивируемых эпидермальных клеток.
Суспензия некультивируемых кожных клеток Кожный пункционер собирают в фосфатно-солевом буферном растворе (PBS) с антибиотиками (пенициллином и стрептомицином). Эпидермис будет осторожно отрезан от дермы с помощью хирургического лезвия (эпидермальная часть будет использоваться для суспензии эпидермальных клеток). Затем дерму разрезают на мелкие кусочки и инкубируют в коллагеназе (1 мг/мл) в течение ночи при комнатной температуре. На следующий день содержимое будет разбавлено PBS и центрифугировано при 1000 об/мин в течение 5 минут. Осадок трижды промывают PBS для удаления активности коллагеназы. Фосфатно-солевой буфер добавляют для приготовления суспензии некультивируемых клеток дермы и используют для аутологичной трансплантации.

Что измеряет исследование?

Первичные показатели результатов

Мера результата
Мера Описание
Временное ограничение
степень репигментации
Временное ограничение: 6 месяцев

Репигментация будет оцениваться следующим образом:

≤25% Минимальная репигментация 26-50% Легкая репигментация 51-75% Умеренная репигментация 76-90% Заметная репигментация >90% Отличная репигментация

6 месяцев

Вторичные показатели результатов

Мера результата
Мера Описание
Временное ограничение
картина репигментации
Временное ограничение: 6 месяцев
диффузный перифолликулярный, мигрирующий от границ
6 месяцев

Соавторы и исследователи

Здесь вы найдете людей и организации, участвующие в этом исследовании.

Публикации и полезные ссылки

Лицо, ответственное за внесение сведений об исследовании, добровольно предоставляет эти публикации. Это может быть что угодно, связанное с исследованием.

Даты записи исследования

Эти даты отслеживают ход отправки отчетов об исследованиях и сводных результатов на сайт ClinicalTrials.gov. Записи исследований и сообщаемые результаты проверяются Национальной медицинской библиотекой (NLM), чтобы убедиться, что они соответствуют определенным стандартам контроля качества, прежде чем публиковать их на общедоступном веб-сайте.

Изучение основных дат

Начало исследования

1 января 2016 г.

Первичное завершение (Ожидаемый)

1 июня 2017 г.

Завершение исследования (Ожидаемый)

1 июня 2017 г.

Даты регистрации исследования

Первый отправленный

27 декабря 2016 г.

Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества

5 января 2017 г.

Первый опубликованный (Оценивать)

6 января 2017 г.

Обновления учебных записей

Последнее опубликованное обновление (Оценивать)

6 января 2017 г.

Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества

5 января 2017 г.

Последняя проверка

1 января 2017 г.

Дополнительная информация

Термины, связанные с этим исследованием

Дополнительные соответствующие термины MeSH

Другие идентификационные номера исследования

  • INT/IEC/2016/2675

Планирование данных отдельных участников (IPD)

Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?

Нет

Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .

Подписаться