Разделенное когортное исследование, сравнивающее результаты ЭКО после использования тестикулярной и эякулированной спермы для ИКСИ

План эксперимента для этого исследования выглядит следующим образом:

1. С парами с партнерами-мужчинами, которые будут проходить процедуру TESA, вторичную по отношению к повышенной фрагментации ДНК (> 25% DFI) в рамках их обычного лечения ЭКО, свяжутся для возможного участия в исследовании.
2. Информированное согласие будет получено
3. Главный исследователь будет уведомлен об участии пары.
4. Партнер-мужчина будет криоконсервировать образец эякулята, если в инвентаре нет криоконсервированного образца эякулята. Партнер-мужчина подвергнется хирургическому извлечению спермы (TESA), и образец будет заморожен согласно установленной процедуре.
5. Сыворотка будет взята у партнера-мужчины и сохранена для будущего анализа.
6. Криоконсервированный эякулят до TESA и образец TESA будут разморожены в день забора ооцитов в соответствии с протоколом. После извлечения ооцитов ооциты будут проанализированы в обычном порядке и оценены на предмет зрелости. Ооциты будут разделены на две группы по усмотрению эмбриолога. Одна группа будет помечена как «A», а другая будет помечена как B». Генератор случайных букв создаст список букв «А» и «Б», которые будут помещены в последовательно пронумерованные запечатанные конверты. Конверты будут открываться по очереди в соответствии с регистрацией пациента. Первый конверт, вскрытый эмбриологом, покажет букву группы ооцитов, которые будут осеменены тестикулярной спермой. Другая группа будет осеменена замороженной/размороженной эякулированной спермой. Следовательно, половина ооцитов будет осеменена с помощью интрацитоплазматической инъекции сперматозоидов (ИКСИ) тестикулярной спермой, а другая половина будет осеменена с помощью ИКСИ эякулированной спермой. Если имеется нечетное количество ооцитов, лишний ооцит для простоты всегда будет принадлежать к группе А.
7. В случае оплодотворения группа зигот, созданных с использованием тестикулярной спермы, получит групповую букву, соответствующую тестикулярной сперме. Это также относится к зиготам, использующим эякулированную сперму. Обе группы зигот будут культивироваться до стадии бластоцисты в условиях культивирования в соответствии со стандартными лабораторными процедурами.
8. Показатели оплодотворения и бластуляции двух групп будут записываться для каждого пациента.
9. Каждая бластоциста будет подвергнута биопсии для комплексного хромосомного скрининга (CCS) в обычном порядке. После получения результатов комплексного хромосомного скрининга, если доступен хотя бы один эуплоидный эмбрион, пациенткам будет проведен перенос одного эмбриона в последующем менструальном цикле.
10. Циклы переноса замороженных эмбрионов будут выполняться с использованием либо запрограммированного цикла (экзогенный эстрадиол с последующим прогестероном), либо естественного цикла для подготовки эндометрия к переносу эмбрионов.
11. Если из каждой группы доступен хотя бы один эуплоидный эмбрион, во время отбора эмбрионов будет проведена вторая рандомизация. Эмбриолог, выбирающий эмбрион для переноса, открывает второй запечатанный конверт, в котором содержится письмо группы, из которой должен находиться эмбрион для переноса. Эмбрион лучшего качества (на усмотрение эмбриолога) из группы, соответствующей букве в этом конверте, будет выбран для переноса. Эмбриолог, выбирающий эмбрион, будет ослеплен относительно того, какая группа эмбрионов была создана из эякулята, а какая из тестикулярных сперматозоидов. Будет зарегистрирована группа, из которой был получен эмбрион, выбранный для переноса.
12. И пациент, и врач, выполняющий перенос эмбриона, не будут знать, из какой группы произошел эмбрион, выбранный для переноса.
13. Тестирование на беременность и последующее наблюдение будут проходить в обычном режиме.
14. Примерно через 8 недель после переноса каждой участнице будет назначен результат цикла (т. е. отсутствие беременности, выкидыш, продолжающаяся беременность). В это время участники исследования могут быть уведомлены о том, была ли сперма, использованная для ИКСИ, получена из сперматозоидов яичек или из эякулята. Эта информация может быть передана по телефону или лично.