Jaettu kohorttikoe, jossa verrataan IVF-tuloksia kivesten ja siemensyöksyn käytön jälkeen ICSI:ssä

Tämän tutkimuksen kokeellinen suunnittelu on seuraava:

1. Pariskuntoihin, joilla on miespuolisia kumppaneita, joille tehdään kohonneen DNA-fragmentaation (> 25 % DFI) johdosta toissijainen TESA-menettely osana rutiininomaista IVF-hoitoaan, otetaan yhteyttä mahdollista tutkimukseen osallistumista varten.
2. Tietoinen suostumus saadaan
3. Ensitutkijalle ilmoitetaan pariskunnan osallistumisesta.
4. Miespuolinen kumppani kylmäsäilyttää ejakuloidun siemennestenäytteen, jos varastossa ei ole kylmäsäilytettyä siemensyöksynäytettä. Mieskumppanille tehdään kirurginen siittiöiden haku (TESA) ja näyte pakastetaan rutiinin mukaan.
5. Seerumi kerätään mieskumppanilta ja säilytetään tulevaa analyysiä varten.
6. Kryosäilötty esi-TESA-ejakulaatti ja TESA-näyte sulatetaan munasolujen talteenottopäivänä protokollan mukaisesti. Munasolujen talteenoton jälkeen munasolut analysoidaan rutiinin mukaan ja niiden kypsyys arvioidaan. Munasolut jaetaan kahteen ryhmään embryologin harkinnan mukaan. Toisen ryhmän nimi on "A" ja toinen B." Satunnainen kirjaingeneraattori luo luettelon A- ja B-kirjaimista, jotka sijoitetaan peräkkäin numeroituihin, suljetuihin kirjekuoreihin. Kirjekuoret avataan järjestyksessä potilaan ilmoittautumisen mukaan. Ensimmäinen embryologin avaama kirjekuori paljastaa munasoluryhmän kirjeen, joka siemennetään kivesten siittiöillä. Toinen ryhmä siemennetään jäädytetyllä/sulatetulla siemensyöksyllä. Tästä syystä puolet munasoluista siemennetään käyttämällä intrasytoplasmista siittiöinjektiota (ICSI) kivesten siittiöillä ja toinen puoli siemennetään ICSI:llä ejakuloiduilla siittiöillä. Jos munasoluja on pariton määrä, ylimääräinen munasolu kuuluu aina ryhmään A yksinkertaisuuden vuoksi.
7. Jos kivesten siittiöistä luotu tsygoottiryhmä hedelmöitetään, se ottaa ryhmäkirjaimen, joka vastasi kivesten siittiötä. Tämä koskee myös tsygootteja, jotka käyttävät siemensyöksyä siittiöitä. Molempia tsygoottiryhmiä viljellään blastokystivaiheeseen asti viljelyolosuhteissa tavanomaisten laboratoriomenetelmien mukaisesti.
8. Kahden ryhmän hedelmöitys- ja räjäytysluvut kirjataan jokaiselle potilaalle.
9. Jokaisesta blastokystistä otetaan biopsia kattavaa kromosomiseulontaa (CCS) varten rutiininomaisesti. Kun kattavat kromosomiseulontatulokset ovat saatavilla ja jos vähintään yksi euploidinen alkio on saatavilla, potilaille tehdään yksi alkionsiirto seuraavan kuukautiskierron aikana.
10. Pakastetut alkionsiirtosyklit suoritetaan käyttäen joko ohjelmoitua sykliä (eksogeeninen estradioli ja sitä seuraava progesteroni) tai luonnollista sykliä endometriumin valmistelemiseksi alkionsiirtoa varten.
11. Jos kustakin ryhmästä on saatavilla vähintään yksi euploidinen alkio, alkion valinnan yhteydessä tapahtuu toinen satunnaistaminen. Siirrettävän alkion valitseva embryologi avaa toisen suljetun kirjekuoren, joka sisältää sen ryhmän kirjeen, josta siirrettävän alkion tulee olla. Tämän kirjekuoren kirjettä vastaavasta ryhmästä valitaan siirtoa varten laadukkain alkio (alkiolääkärin harkinnan mukaan). Alkion valitseva embryologi sokeutuu sen suhteen, mikä alkioiden ryhmä luotiin siemensyöksyllä ja kivesten siittiöistä. Ryhmä, josta siirtoon valittu alkio on peräisin, kirjataan.
12. Sekä potilas että alkionsiirron suorittava lääkäri sokeutuvat sen ryhmän suhteen, josta siirrettävä alkio on peräisin.
13. Raskaustesti ja seuranta etenevät rutiinin mukaan.
14. Noin 8 viikkoa siirron jälkeen kullekin osallistujalle määrätään syklin tulos (eli ei raskautta, keskenmeno, jatkuva raskaus). Tuolloin tutkimukseen osallistuneille voidaan ilmoittaa, onko ICSI:ssä käytetty siittiö peräisin kivesten siittiöistä vai siemensyöksyistä. Näitä tietoja voidaan jakaa puhelimitse tai henkilökohtaisesti.