Podzielona próba kohortowa porównująca wyniki IVF po użyciu nasienia z jąder i wytrysku do ICSI

Schemat eksperymentu dla tego badania jest następujący:

1. Pary z partnerami płci męskiej, którzy będą przechodzić procedurę TESA wtórną do podwyższonej fragmentacji DNA (>25% DFI) w ramach rutynowego leczenia IVF, zostaną skontaktowani w celu ewentualnego udziału w badaniu.
2. Uzyskana zostanie świadoma zgoda
3. Główny badacz zostanie powiadomiony o udziale pary.
4. Partner zamrozi próbkę nasienia z wytryskiem, jeśli w zapasie nie ma kriokonserwowanej próbki z wytryskiem. Partner zostanie poddany chirurgicznemu pobraniu nasienia (TESA), a próbka zostanie zamrożona zgodnie z procedurą.
5. Surowica zostanie pobrana od partnera płci męskiej i zachowana do przyszłej analizy.
6. Kriokonserwowany ejakulat pre-TESA i próbka TESA zostaną rozmrożone w dniu pobrania oocytów zgodnie z protokołem. Po pobraniu oocytów zostaną one poddane rutynowej analizie i ocenie pod kątem dojrzałości. Oocyty zostaną podzielone na dwie grupy według uznania embriologa. Jedna grupa będzie oznaczona jako „A”, a druga jako B”. Generator losowych listów utworzy listę „A” i „B”, które zostaną umieszczone w kolejno ponumerowanych, zapieczętowanych kopertach. Koperty będą otwierane w kolejności zgodnej z rejestracją pacjentów. Pierwsza koperta otwarta przez embriologa ujawni literę grupy oocytów, która zostanie zapłodniona nasieniem jądra. Druga grupa zostanie zapłodniona zamrożonym/rozmrożonym nasieniem wytrysku. Dlatego połowa oocytów zostanie zapłodniona za pomocą intracytoplazmatycznego wstrzyknięcia plemnika (ICSI) plemnikami jąder, a druga połowa zostanie zapłodniona za pomocą ICSI plemnikami z wytrysku. Jeśli istnieje nieparzysta liczba oocytów, dodatkowy oocyt zawsze będzie należeć do grupy A dla uproszczenia.
7. W przypadku zapłodnienia grupa zygot utworzonych przy użyciu plemników jąder przyjmie literę grupy odpowiadającą plemnikom jąder. Dotyczy to również zygot wykorzystujących plemniki z wytryskiem. Obie grupy zygot będą hodowane do stadium blastocysty w warunkach hodowli zgodnych ze standardowymi procedurami laboratoryjnymi.
8. Wskaźniki zapłodnienia i blastulacji obu grup będą rejestrowane dla każdego pacjenta.
9. Każda blastocysta zostanie poddana biopsji w celu kompleksowego badania przesiewowego chromosomów (CCS) w rutynowy sposób. Po udostępnieniu kompleksowych wyników badań przesiewowych chromosomów, jeśli dostępny jest co najmniej jeden zarodek euploidalny, pacjentki zostaną poddane transferowi pojedynczego zarodka w kolejnym cyklu miesiączkowym.
10. Cykle transferu zamrożonych zarodków będą wykonywane przy użyciu zaprogramowanego cyklu (egzogenny estradiol z następującym po nim progesteronem) lub naturalnego cyklu przygotowania endometrium do transferu zarodków.
11. Jeśli z każdej grupy dostępny jest co najmniej jeden euploidalny zarodek, druga randomizacja nastąpi w momencie selekcji zarodków. Embriolog wybierający zarodek do transferu otworzy drugą zapieczętowaną kopertę, która zawiera literę grupy, z której ma pochodzić zarodek do transferu. Do transferu wybrany zostanie zarodek najlepszej jakości (według uznania embriologa) z grupy odpowiadającej literze w tej kopercie. Embriolog wybierający zarodek nie będzie wiedział, która grupa zarodków została utworzona z plemników wytrysku, a która z jąder. Zostanie zarejestrowana grupa, z której pochodzi zarodek wybrany do transferu.
12. Zarówno pacjentka, jak i lekarz dokonujący transferu zarodka będą zaślepieni co do grupy, z której pochodzi wybrany do transferu zarodek.
13. Testy ciążowe i obserwacja będą przebiegać zgodnie z rutyną.
14. Około 8 tygodni po transferze, każdej uczestniczce zostanie przypisany wynik cyklu (tj. brak ciąży, poronienie, trwająca ciąża). W tym czasie uczestnicy badania mogą zostać poinformowani, czy plemniki wykorzystane do ICSI pochodzą z plemników jąder, czy z plemników wytrysku. Informacje te można przekazywać telefonicznie lub osobiście.