Osztott kohorszos vizsgálat az IVF-eredmények összehasonlítása a here- és az ejakulált spermiumok ICSI-re történő alkalmazása után

Ennek a tanulmánynak a kísérleti terve a következő:

1. Azokkal a férfi partnerekkel rendelkező párokkal, akiknél rutin IVF-kezelésük részeként emelkedett DNS-fragmentáció (>25% DFI) miatt másodlagos TESA-eljáráson esnek át, felveszik a kapcsolatot a vizsgálatban való esetleges részvétel érdekében.
2. Tájékozott hozzájárulást kell beszerezni
3. Az elsődleges nyomozót értesítik a pár részvételéről.
4. A férfi partner kriokonzerválja az ejakulált spermamintát, ha nincs a készletben mélyhűtött ejakulált minta. A férfi partner műtéti spermiumfelvételen (TESA) esik át, és a mintát rutinszerűen lefagyasztják.
5. A szérumot a férfi partnertől gyűjtik, és megőrzik későbbi elemzés céljából.
6. A mélyhűtött pre-TESA ejakulátumot és a TESA mintát protokoll szerint a petesejtek kinyerésének napján felengedik. A petesejtek kinyerése után a petesejteket rutinonként elemzik és érettségükre értékelik. Az oocitákat embriológus döntése szerint két csoportra osztják. Az egyik csoport „A”, a másik pedig „B” címkét kap. A véletlenszerű betűgenerátor létrehozza az „A” és „B” listát, amelyet sorszámozott, lezárt borítékokba helyez. A borítékok felbontása sorrendben történik, a betegfelvételnek megfelelően. Az embriológus által felbontott első borítékon a here spermával megtermékenyített petesejtek csoportjának betűje látható. A másik csoportot megtermékenyítjük a fagyasztott/felolvasztott ejakulált spermával. Ezért a petesejtek felét intracitoplazmatikus spermiuminjekcióval (ICSI) fogják megtermékenyíteni a here spermájával, a másik felét pedig ICSI-vel az ejakulált spermiumokkal. Ha páratlan számú petesejtek vannak, akkor az egyszerűség kedvéért a felesleges petesejtek mindig az A csoportba tartoznak.
7. Ha megtermékenyítik, a herék spermájával létrehozott zigóták csoportja a herék spermájának megfelelő csoportbetűt veszi fel. Ez igaz lesz az ejakulált spermiumot használó zigótákra is. Mindkét zigótacsoportot a blasztociszta stádiumig tenyésztjük, a tenyésztési feltételeket szabványos laboratóriumi eljárások szerint.
8. A két csoport megtermékenyítési és blastulációs arányát minden betegnél feljegyezzük.
9. Minden blasztocisztáról rutinszerűen biopsziát vesznek átfogó kromoszómaszűrés (CCS) céljából. Amint átfogó kromoszómaszűrési eredmények állnak rendelkezésre, és legalább egy euploid embrió áll rendelkezésre, a betegek egyetlen embriótranszferen esnek át a következő menstruációs ciklusban.
10. A fagyasztott embriótranszfer ciklusokat programozott ciklussal (exogén ösztradiol és azt követő progeszteron), vagy természetes ciklussal hajtják végre, hogy előkészítsék az endometriumot az embriótranszferhez.
11. Ha minden csoportból legalább egy euploid embrió áll rendelkezésre, az embriószelekció időpontjában egy második randomizálásra kerül sor. Az embrióátültetésre kijelölő embriológus egy második lezárt borítékot nyit ki, amely annak a csoportnak a betűjelét tartalmazza, amelyből az embrió átültetésre kerüljön. A borítékban szereplő levélnek megfelelő csoportból a legjobb minőségű embriót (embriológus belátása szerint) választjuk ki az átvitelre. Az embriót kiválasztó embriológus nem tudja megállapítani, hogy melyik embriócsoportot hozták létre ejakulált, illetve here spermával. Rögzítésre kerül az a csoport, amelyből az átvitelre kiválasztott embrió származott.
12. Mind a páciens, mind az embriótranszfert végző orvos vak lesz attól a csoporttól, amelyből az átültetésre kiválasztott embrió származott.
13. A terhességi tesztek és a nyomon követés a rutin szerint zajlik.
14. Körülbelül 8 héttel az átültetés után minden résztvevőhöz hozzárendelnek egy cikluseredményt (azaz nincs terhesség, vetélés, folyamatban lévő terhesség). Ekkor a vizsgálat résztvevői értesülhetnek arról, hogy az ICSI-hez felhasznált sperma herékből vagy ejakulált spermából származik. Ezt az információt telefonon vagy személyesen is meg lehet osztani.