Prova di coorte divisa che confronta i risultati della fecondazione in vitro dopo l'uso di sperma testicolare rispetto a sperma eiaculato per ICSI

Il disegno sperimentale di questo studio è il seguente:

1. Le coppie con partner maschi che saranno sottoposte a una procedura TESA secondaria a un'elevata frammentazione del DNA (> 25% DFI) come parte del loro trattamento di fecondazione in vitro di routine saranno contattate per una possibile partecipazione allo studio.
2. Si otterrà il consenso informato
3. L'investigatore primario sarà informato della partecipazione della coppia.
4. Il partner maschio criopreserverà un campione di sperma eiaculato se non ci sono campioni eiaculati criopreservati nell'inventario. Il partner maschio sarà sottoposto a un recupero chirurgico dello sperma (TESA) e il campione verrà congelato per routine.
5. Il siero verrà raccolto dal partner maschile e conservato per future analisi.
6. L'eiaculato pre-TESA criopreservato e il campione TESA verranno scongelati il ​​giorno del prelievo degli ovociti secondo il protocollo. Dopo il recupero degli ovociti, gli ovociti saranno analizzati per routine e valutati per la maturità. Gli ovociti saranno divisi in due gruppi a discrezione dell'embriologo. Un gruppo sarà etichettato 'A' e l'altro sarà etichettato B.' Un generatore di lettere casuali creerà un elenco di "A" e "B" che verranno inseriti in buste sigillate numerate in sequenza. Le buste verranno aperte in sequenza in base all'arruolamento del paziente. La prima busta aperta dall'embriologo rivelerà la lettera del gruppo di ovociti che sarà inseminato con lo sperma testicolare. L'altro gruppo sarà inseminato con lo sperma eiaculato congelato/scongelato. Pertanto, metà degli ovociti sarà inseminata mediante iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi (ICSI) con sperma testicolare e l'altra metà sarà inseminata tramite ICSI con sperma eiaculato. Se il numero di ovociti è dispari, l'ovocita in più apparterrà sempre al gruppo A per semplicità.
7. Se fecondato, il gruppo di zigoti creato utilizzando lo sperma testicolare prenderà la lettera del gruppo corrispondente allo sperma testicolare. Questo sarà vero anche per gli zigoti che usano lo sperma eiaculato. Entrambi i gruppi di zigoti saranno coltivati ​​allo stadio di blastocisti con condizioni di coltura secondo le procedure di laboratorio standard.
8. I tassi di fecondazione e blastulazione dei due gruppi saranno registrati per ciascun paziente.
9. Ogni blastocisti verrà sottoposta a biopsia per lo screening completo dei cromosomi (CCS) in modo routinario. Una volta disponibili i risultati completi dello screening cromosomico, se è disponibile almeno un embrione euploide, le pazienti saranno sottoposte a un singolo trasferimento embrionale in un successivo ciclo mestruale.
10. I cicli di trasferimento dell'embrione congelato verranno eseguiti utilizzando un ciclo programmato (estradiolo esogeno con successivo progesterone) o un ciclo naturale per preparare l'endometrio al trasferimento dell'embrione.
11. Se almeno un embrione euploide è disponibile da ciascun gruppo, si verificherà una seconda randomizzazione al momento della selezione dell'embrione. L'embriologo che seleziona l'embrione da trasferire aprirà una seconda busta sigillata, che contiene la lettera del gruppo da cui dovrebbe risiedere l'embrione da trasferire. L'embrione della migliore qualità (a discrezione dell'embriologo) dal gruppo corrispondente alla lettera in questa busta sarà selezionato per il trasferimento. L'embriologo che seleziona l'embrione sarà cieco su quale gruppo di embrioni è stato creato con sperma eiaculato rispetto a quello testicolare. Verrà registrato il gruppo da cui è derivato l'embrione selezionato per il trasferimento.
12. Sia il paziente che il medico che esegue il trasferimento dell'embrione saranno accecati rispetto al gruppo da cui deriva l'embrione selezionato per il trasferimento.
13. Il test di gravidanza e il follow-up procederanno come da routine.
14. Circa 8 settimane dopo il trasferimento, a ciascun partecipante verrà assegnato un esito del ciclo (ovvero nessuna gravidanza, aborto spontaneo, gravidanza in corso). In quel momento, i partecipanti allo studio possono essere informati se lo sperma utilizzato per l'ICSI è stato derivato da sperma testicolare o sperma eiaculato. Queste informazioni potrebbero essere condivise telefonicamente o di persona.