Электропорация в клинических условиях (EPIC)

Фон:

Основным препятствием для профилактического или терапевтического успеха ДНК-вакцин, несомненно, является их доставка. Если это нельзя сделать простым, дешевым и эффективным, они могут не стать жизнеспособным вариантом для использования человеком. Многочисленные клинические испытания подтвердили, что стандартной иглы и шприца для парентерального (в основном внутримышечного или внутрикожного) введения недостаточно. Важный принцип, подтвержденный различными исследованиями ДНК-иммунизации, заключается в том, что электропорация резко увеличивает экспрессию кодируемого антигена, а также активность и иммуногенность ДНК-вакцин. Электропорация (ЭП) создает временное увеличение проницаемости клеточной мембраны, тем самым увеличивая поглощение ДНК и приводя к более сильному иммунному ответу. ЭП включает применение коротких электрических импульсов к тканям для временного и обратимого проницаемости клеточных мембран. Временное образование пор облегчает успешный транспорт макромолекул, таких как ДНК, который происходит за микросекунды по сравнению с минутами в случае только пассивной диффузии. ЭП считается безопасной и хорошо проверенной процедурой, которую можно легко проводить амбулаторно. В связи с этим в клиническую практику были добавлены электрохимиотерапия и электрогенный перенос с помощью Cliniporator® (IGEA Srl, Carpi, Италия).

Таким образом, цель настоящего исследования состоит в том, чтобы официально подтвердить переносимость электропорации, проводимой с помощью пистолета EPSGT и устройства Cliniporator®, в клинических условиях здоровых добровольцев перед исследованием фазы I/II вакцины против COVID-19 в аналогичной популяции. .

Дизайн исследования:

Двадцать (20) субъектов будут рандомизированы 1:1 для одного из следующих состояний EP:

1. амплитуда напряжения 40 В (10 предметов)
2. амплитуда напряжения 60 В (10 испытуемых). В целях исследования 0,5 мл стерильного 0,9% физиологического раствора будет вводиться внутримышечно в дельтовидную мышцу правой руки с помощью обычного инсулинового шприца, вставленного в пистолет ЭПС; за инъекцией физиологического раствора сразу же следует электропорация с помощью пистолета, подключенного к генератору электрических импульсов Cliniporator®.

Технология электропорации была оптимизирована компанией IGEA, разработавшей специальный электродный пистолет EPS. Пистолет EPS представляет собой интуитивно понятную и удобную процедуру, которая сочетает в одном устройстве введение ДНК-вакцины (или стерильного 0,9% физиологического раствора, как в случае настоящего исследования) и подачу электрических импульсов; процедура завершается за несколько секунд. Иглы для ЭП 7 (диаметром 0,45 мм) спрятаны под скользящим колпачком, встроенным в пистолет ЭПС, для уменьшения воспринимаемой боли, потенциально связанной с беспокойством или страхом. Пистолет EPS позволяет вводить иглы электродов и иглы шприца в мышцу. При нажатии на поршень шприца содержимое шприца будет введено, при нажатии на спусковой крючок игла шприца будет втянута, и, наконец, электрические импульсы будут поданы нажатием на педаль, соединенную с генератором импульсов.

Оценка боли:

В день инъекции и ЭП субъекты будут проинструктированы измерять продолжительность боли с помощью секундомера. Кроме того, субъекты будут заполнять визуальную аналоговую шкалу (ВАШ), чтобы оценить уровень боли, испытываемой сразу (0 мин) и через 5 мин, 15 мин, 30 мин и 60 мин после ЭП. Кроме того, испытуемые будут оценивать уровень дискомфорта с использованием 11-балльной числовой шкалы оценки (NRS), оцениваемой через 60 минут (T4) после процедуры. На 2-й и 7-й день после EP субъекты снова заполнят VAS, как описано выше, и NRS. Кроме того, в День 1 (T2, +15'), День 2 и День 7 испытуемые заполнят анкету для самостоятельного заполнения, оценивающую принятие процедуры. Таким образом, чтобы лучше измерить приемлемость инъекции, связанной с использованием нового устройства, с точки зрения людей, все участники должны будут заполнить анкету «Восприятие инъекции» (PIN), адаптированную из анкеты «Восприятие инъекции» (VAPI).

Анализ безопасности:

Анализы безопасности будут включать резюме следующего:

• нежелательные явления, включая тяжесть и связь с процедурой (внутримышечной инъекцией, электропорацией или обеими процедурами)
• серьезные нежелательные явления, включая тяжесть и связь с процедурой (внутримышечная инъекция или электропорация, или и то и другое)
• патологические изменения КФК
• аномальные изменения показателей жизнедеятельности и ЭКГ

Размер выборки и статистический анализ:

В этом исследовании переносимости двух сил напряжения ВП расчет размера выборки не проводился.

Статистический анализ будет в основном описательным. Качественные переменные будут суммированы в виде количества и процентов, а количественные характеристики - в виде квартилей или среднего значения и стандартного отклонения, в зависимости от обстоятельств.

Данные, собранные в продольном направлении, также будут описаны соответствующим образом. Конкретные сводные индексы будут рассчитываться на продольных профилях ВАШ (например, SPID и пик PID), а также соответствие между VAS и NRS, собранными в каждый момент времени, также будут оцениваться.

Все нежелательные явления будут классифицироваться в соответствии со шкалой оценки токсичности FDA 2007 года для здоровых взрослых и подростков-добровольцев, участвующих в профилактических клинических испытаниях вакцины (1-я степень = легкая, 2-я = умеренная, 3-я = тяжелая, 4-я = опасная для жизни). и будет сообщаться в процентах, а также будут представлены описательные части.

Управление исследованием:

Данные, запрошенные в ходе исследования, будут представлены в электронной системе удаленного сбора данных (e-CRF). Данные субъекта, собранные в электронной ИРК во время исследования, будут документированы анонимно, и субъект может быть идентифицирован только по идентификационному коду.