EletroPoração em um Ambiente Clínico (EPIC)

Fundo:

O maior obstáculo ao sucesso preventivo ou terapêutico das vacinas de DNA é, sem dúvida, a sua entrega. Se isso não puder ser feito de forma simples, barata e eficaz, eles podem não se tornar uma opção viável para uso humano. Numerosos ensaios clínicos confirmaram que uma administração parenteral padrão de agulha e seringa (principalmente intramuscular ou intradérmica) não é suficiente. Um princípio importante, confirmado por diferentes estudos de imunização de DNA, é que a eletroporação aumenta drasticamente a expressão do antígeno codificado, bem como a potência e a imunogenicidade das vacinas de DNA. A eletroporação (EP) cria aumentos transitórios na permeabilidade da membrana celular, aumentando assim a absorção de DNA e levando a uma resposta imune mais robusta. EP envolve a aplicação de breves pulsos elétricos ao tecido, a fim de permeabilizar as membranas celulares de forma transitória e reversível. A formação temporária de poros facilita o transporte bem-sucedido de macromoléculas, como o DNA, que ocorre na ordem de microssegundos versus minutos no caso de difusão passiva apenas. A EP é considerada um procedimento seguro e bem validado que pode ser facilmente tratado como um procedimento ambulatorial. Nesse sentido, a eletroquimioterapia e a eletrotransferência de genes com o Cliniporator® (IGEA Srl, Carpi, Itália) foram adicionadas à prática clínica.

O objetivo do presente estudo é, portanto, confirmar formalmente a tolerabilidade da eletroporação dada pela pistola EPSGT e o dispositivo Cliniporator® em um ambiente clínico de voluntários saudáveis, antes do estudo de fase I/II da vacina COVID-19 em uma população semelhante .

Design de estudo:

Vinte (20) indivíduos serão randomizados 1:1 para uma das seguintes condições de EP:

1. amplitude de tensão de 40 V (10 sujeitos)
2. amplitude de tensão de 60 V (10 sujeitos). Para efeito do estudo, 0,5 ml de solução salina 0,9% estéril será injetado por via intramuscular no músculo deltóide do braço direito por meio de uma seringa de insulina comum inserida na pistola de EPS; a injeção de solução salina será imediatamente seguida de eletroporação dada pela pistola conectada ao gerador de pulsos elétricos, Cliniporator®.

A tecnologia de eletroporação foi otimizada pela IGEA desenvolvendo uma pistola de eletrodo EPS dedicada. A pistola EPS é um procedimento intuitivo e prático que combina no mesmo dispositivo a injeção de uma vacina de DNA (ou solução salina 0,9% estéril como no caso do presente estudo) e a entrega dos pulsos elétricos; o procedimento é concluído em poucos segundos. As agulhas EP 7 (diâmetro 0,45 mm) estão escondidas sob uma tampa deslizante integrada na pistola EPS, para reduzir a dor percebida potencialmente associada à ansiedade ou medo. A pistola EPS permite a inserção das agulhas do eletrodo e da agulha da seringa no músculo. Ao pressionar o êmbolo da seringa, o conteúdo da seringa será injetado, ao puxar o gatilho a agulha da seringa será retraída e, finalmente, os pulsos elétricos serão entregues pressionando um pedal conectado ao gerador de pulsos.

Avaliação da dor:

No dia da injeção e EP, os indivíduos serão instruídos a medir a duração da dor por meio de um cronômetro. Além disso, os indivíduos completarão a Escala Visual Analógica (VAS) para classificar o nível de dor experimentado imediatamente (0 min) e após 5 min, 15 min, 30 min e 60 min pós-EP. Além disso, os sujeitos avaliarão o nível de desconforto usando uma escala numérica de 11 pontos (NRS), avaliada 60' (T4) após o procedimento. No dia 2 e no dia 7 pós-EP, os indivíduos completarão novamente o VAS conforme descrito acima e o NRS. Além disso, no Dia 1 (T2, +15'), Dia 2 e Dia 7, os participantes preencherão um questionário autoaplicável avaliando a aceitação do procedimento. Portanto, para melhor medir a aceitabilidade da injeção relacionada ao uso de um novo dispositivo a partir da perspectiva das próprias pessoas, todos os participantes preencherão o questionário Perception of Injection (PIN), adaptado do questionário Vaccines' Perception of Injection (VAPI).

Análise de segurança:

As análises de segurança incluirão resumos do seguinte:

• eventos adversos, incluindo gravidade e relação com o procedimento (à injeção intramuscular, à eletroporação ou a ambos os procedimentos)
• eventos adversos graves, incluindo gravidade e relação com o procedimento (à injeção intramuscular ou à eletroporação, ou a ambos)
• alterações anormais na CPK
• alterações anormais nos sinais vitais e no ECG

Tamanho da amostra e análise estatística:

Nenhum cálculo de tamanho de amostra foi realizado neste estudo sobre a tolerabilidade de duas intensidades de tensão EP.

As análises estatísticas serão essencialmente descritivas. As variáveis ​​qualitativas serão resumidas por contagens e porcentagens, enquanto as características quantitativas por quartis ou média e desvio padrão, conforme o caso.

Os dados coletados longitudinalmente também serão descritos adequadamente. Índices de resumo específicos serão calculados nos perfis VAS longitudinais (por exemplo, SPID e pico PID) e a concordância entre VAS e NRS coletados em cada ponto de tempo também serão avaliados.

Todos os eventos adversos serão classificados de acordo com a escala de classificação de toxicidade da FDA de 2007 para voluntários adultos e adolescentes saudáveis ​​inscritos em ensaios clínicos de vacinas preventivas (grau 1 = leve, grau 2 = moderado, grau 3 = grave, grau 4 = risco de vida) e serão relatados como porcentagens e narrativas também serão apresentadas.

Gerenciamento de estudos:

Os dados solicitados pelo estudo serão informados em um sistema eletrônico de captura remota de dados (e-CRF). Os dados do sujeito coletados no e-CRF durante o estudo serão documentados anonimamente e o sujeito só poderá ser identificado por um código de identificação.