Гены Neuralized1 и RGS14

РАС представляет собой неврологическое заболевание, начинающееся на ранних этапах жизни и характеризующееся когнитивными и поведенческими расстройствами (Ansel et al., 2008; Alvares et al., 2020). Считается, что этиология РАС связана с генетическими, эпигенетическими факторами и факторами окружающей среды; однако окончательно это еще не выяснено (Ito et al., 2017).

мы стремились оценить различия между уровнями экспрессии этих генов между ASD, HFA и здоровым контролем, а также роль этих генов в патогенезе ASD.

Метод:

В это исследование были включены пациенты с РАС (n = 20) и HFA (n = 20), а также здоровые контроли (n = 20), соответствующие возрасту пациентов. Была проведена клиническая оценка пациентов и проведена классификация в соответствии с диагностическими критериями DSM-IV.

Для выделения РНК использовали набор High Pure RNA Isolation Kit (Roche Diagnostic, версия 12, Германия). Синтез кДНК осуществляли из этих РНК с помощью набора для синтеза кДНК High Fidelity для транскрипторов (Roche Diagnostics, GmbH, Mannheim).

qRT-PCR проводили с использованием набора LightCycler® 480 Real Time Ready Assay Master Probe Kit (Roche Diagnostics, GmbH, Мангейм). Инкубацию проводили с помощью программы для ПЦР в течение 10 минут при 95°C в течение 45 циклов, в течение 10 с при 95°C, и в течение 60 сек при 60°С. Значения Ct были получены из программного обеспечения Light Cycler 480, и оба гена были проанализированы отдельно. Сравнительный метод CT (2-ΔΔCT) использовали для определения относительного количества генов-мишеней, нормализованного по гену домашнего хозяйства (β-актин).

Статистически:

Результаты экспериментов оценивали с помощью R 3.1.1. (www.r-project.org). и критерий хи-квадрат, U-критерий Манна-Уитни, H-критерий Крускала-Уоллиса. Уровень P<0,05 был принят за значимый.