Метилирование генома хозяина: инструмент скрининга при обнаружении анального рака (AMethysT)

I. Современное состояние знаний о патологии

В 2020 году во всем мире зарегистрировано 30 000 случаев плоскоклеточного рака заднего прохода. Эти виды рака поражают женщин в 2/3 случаев. Они довольно редки среди населения в целом: стандартизированный по возрасту показатель заболеваемости составляет 0,35 на 100 000 человеко-лет (в год) у мужчин и 0,57 у женщин.

Популяция мужчин, практикующих секс с мужчинами (МСМ), живущих с ВИЧ, подвергается большему риску развития рака анального канала: исследования 2012 года сообщили о 80-кратном увеличении относительного риска по сравнению с мужским населением, не инфицированным ВИЧ. Эта популяция также более подвержена анальному заражению ВПЧ, что усугубляет дисиммунитет, связанный с ВИЧ-инфекцией. В результате к этой популяции уже были даны конкретные рекомендации по скринингу рака анального канала на основе цитологии. Недавний метаанализ стратифицировал риск рака анального канала в различных группах населения. Это подтверждает повышенный риск развития рака анального канала среди МСМ, живущих с ВИЧ (до 100 на 100 000 в год у МСМ, живущих с ВИЧ, в возрасте старше 45 лет).

Также были выявлены другие группы риска развития анального рака. Четко установлен более высокий уровень заболеваемости анальным раком у женщин, уже перенесших рак шейки матки или вульвовагинит. Но этот метаанализ Clifford et al. показывает различную стратификацию риска анального рака в зависимости от типа предшествующего рака, вызванного ВПЧ. Таким образом, уровень заболеваемости анальным раком наиболее высок в случае рака вульвы в анамнезе и равен 50 на 100 000 в год, тогда как в случае рака влагалища или шейки матки он близок к 10 на 100 000 в год. Другую группу риска анального рака составляют люди с ослабленным иммунитетом, не инфицированные ВИЧ, и, в частности, реципиенты солидных трансплантатов, с разной частотой заболеваемости анальным раком в зависимости от типа трансплантации и, прежде всего, времени, прошедшего после трансплантации.

В целом, уровень заболеваемости анальным раком, независимо от пола, выше в странах с высоким уровнем дохода. В 2018 году во Франции было зарегистрировано 1532 новых случая рака анального канала у женщин, что соответствует уровню заболеваемости 2,4 на 100 000 женщин-лет, и 479 новых случаев у мужчин, что соответствует уровню заболеваемости 0,8 на 100 000 человеко-лет. Как и во многих странах с высоким уровнем дохода, во Франции наблюдается общий рост заболеваемости этим раком как у женщин (+3,4% и +5,7% в период с 1990 по 2018 год и между 2010 и 2018 годами соответственно), так и среди мужчин (+ 1,5% и +3,3% в период с 1990 по 2018 год и с 2010 по 2018 год соответственно). Возрастные тенденции развития рака анального канала показывают рост числа случаев заболевания, главным образом у женщин в возрасте 50 и 60 лет.

Анализ метилирования генома человека в мазках из анального отверстия является многообещающим биомаркером риска анального рака. Метилирование — это эпигенетическое физиологическое явление, которое регулирует экспрессию определенных генов. Было показано, что вирусные онкопротеины E6 и E7 онкогенных ВПЧ высокого риска (особенно ВПЧ16) индуцируют активацию или повышенную экспрессию клеточных ферментов, ответственных за эти явления метилирования. Как правило, гиперметилирование промоторов генов приводит к их инактивации. Репрессия генов, участвующих в противовирусном или противоопухолевом ответе, может способствовать ускользанию от иммунитета, тогда как гиперметилирование, вызывающее репрессию генов-супрессоров опухоли, благоприятствует раковому процессу.

Что касается анального рака, два исследования показали, что маркеры метилирования, ранее разработанные для шейки матки, не являются дискриминационными для анального рака. Впоследствии поперечный анализ анальных биопсий на разных стадиях (нормальная цитология, поражения низкой или высокой степени злокачественности, рак) выявил маркеры метилирования, специфичные для анального канцерогенеза, в анальных биопсиях (инвазивный отбор проб тканей).

Эти маркеры чрезвычайно многообещающи, и поэтому метилирование может представлять собой надежный прогностический маркер прогрессирования инвазивного поражения и, следовательно, быть решающим фактором при выборе инвазивного лечения или наблюдения.

II. Состояние знаний о справочных процедурах

Эволюция предраковых поражений анальной области описана хуже, чем эволюция поражений шейки матки, из-за отсутствия на сегодняшний день программ скрининга.

Впервые американское исследование ANCHOR, в котором приняли участие почти 5000 ЛЖВ, продемонстрировало влияние лечения поражений высокой степени злокачественности на 57% снижение частоты рака в группе, получавшей лечение (заболеваемость 173 на 100 000 в год против 402 на 100 000 в год в группе, получавшей лечение). простой рычаг наблюдения). После этого исследования начинают появляться рекомендации по скринингу предраковых поражений анального канала в бессимптомных группах риска.

В январе 2023 года Национальное общество колопроктологов Франции (SNFCP) выпустило рекомендации по скринингу анального рака у бессимптомных лиц в трех группах риска: МСМ, живущие с ВИЧ, в возрасте старше 30 лет, женщины с предраковыми поражениями или раком в анамнезе. вульвы и женщин, перенесших трансплантацию твердых органов в течение более 10 лет. Эти рекомендации ориентированы на группы населения с заболеваемостью анальным раком более 40 на 100 000 человек в год согласно метаанализу Clifford et al. В этом контексте скрининг анального рака основан на первичном скрининге на ВПЧ-16, в частности, путем самостоятельного взятия проб из анального отверстия и, в случае положительного результата, цитологического анализа анального мазка и стандартного проктологического обследования. В случае отклонений от нормы цитологии пациенты будут направлены на консультацию проктолога с аноскопией высокого разрешения (HRA).

Во Франции мало проктологов, которые проводят AHR-обследования, а время ожидания консультаций уже очень велико. Основным камнем преткновения на пути внедрения скрининга анального рака является ожидаемое ухудшение ситуации с переполненностью отделений AHR для обследований и консультаций проктологов. Например, недавний метаанализ показал, что распространенность инфекции ВПЧ16 в анальной области МСМ, живущих с ВИЧ, составляет от 27% до 35%. Поэтому разработка инструментов сортировки, позволяющих направлять на это обследование только тех пациентов, которым грозит наибольшая степень риска анальной дисплазии, имеет решающее значение.

Цель этого нового исследования состоит в том, чтобы проверить прогнозирующую способность маркеров метилирования анального мазота для скрининга пациентов с риском прогрессирования до дисплазии высокой степени и определить соответствующие пороговые значения в этой выборке, включая пациентов, нацеленных на новые рекомендации по скринингу SNFCP и, следовательно, с помощью Нет истории поражений AIN3.

III. Гипотеза

Это исследование основано на гипотезе о том, что уровень метилирования маркеров ASCL1 и ZNF582 будет предсказывать риск развития у бессимптомных пациентов анальных поражений высокой степени и, следовательно, анального рака.