Methylierung des Wirtsgenoms: Ein Screening -Instrument zum Nachweis von Analkrebs (AMethysT)

I. Aktueller Wissensstand zur Pathologie

Im Jahr 2020 wurden weltweit 30.000 Fälle von Plattenepithelkarzinomen des Anus gemeldet. Diese Krebsarten betreffen in 2/3 der Fälle Frauen. Sie sind in der Allgemeinbevölkerung relativ selten, mit einer altersstandardisierten Inzidenzrate von 0,35 pro 100.000 Personenjahre (p.a.) bei Männern und 0,57 bei Frauen.

Die Population der Männer, die Sex mit Männern haben (MSM), die mit HIV leben, hat ein höheres Risiko für Analkrebs: Studien aus dem Jahr 2012 berichteten von einem 80-fachen Anstieg des relativen Risikos im Vergleich zur nicht HIV-infizierten männlichen Population. Diese Bevölkerungsgruppe ist auch stärker analen HPV-Infektionen ausgesetzt, was zu der mit einer HIV-Infektion verbundenen Immunschwäche beiträgt. Daher gab es für diese Population bereits konkrete Empfehlungen zur zytologischen Früherkennung von Analkanalkrebs. Eine aktuelle Metaanalyse hat das Risiko für Analkrebs in verschiedenen Bevölkerungsgruppen geschichtet. Es bestätigt das erhöhte Risiko für Analkrebs in der MSM-Population mit HIV (bis zu 100 pro 100.000 pro Jahr bei MSM mit HIV über 45).

Es wurden auch andere Risikogruppen für Analkrebs identifiziert. Eine höhere Inzidenzrate von Analkrebs bei Frauen, die bereits an Gebärmutterhals- oder Vulvovaginalkrebs erkrankt sind, ist eindeutig erwiesen. Aber diese Metaanalyse von Clifford et al. zeigt eine unterschiedliche Stratifizierung des Analkrebsrisikos je nach Art der früheren HPV-induzierten Krebserkrankung. So ist die Inzidenzrate von Analkrebs bei Vulvakarzinomen in der Vorgeschichte am höchsten und liegt bei 50 pro 100.000 pro Jahr, während sie bei Vaginal- oder Gebärmutterhalskrebs in der Vorgeschichte bei nahezu 10 pro 100.000 pro Jahr liegt. Eine weitere Risikogruppe für Analkrebs sind immunsupprimierte Menschen, die nicht mit HIV infiziert sind, und insbesondere solide Transplantatempfänger, wobei die Inzidenzraten von Analkrebs je nach Art der Transplantation und vor allem der Zeit seit der Transplantation unterschiedlich sind.

Insgesamt sind die Inzidenzraten von Analkrebs unabhängig vom Geschlecht in Ländern mit hohem Einkommen höher. Im Jahr 2018 wurden in Frankreich 1.532 neue Fälle von Analkrebs bei Frauen gemeldet, was einer Inzidenzrate von 2,4 pro 100.000 Frauenjahre entspricht, und 479 neue Fälle bei Männern, was einer Inzidenzrate von 0,8 pro 100.000 Mannjahre entspricht. Wie in vielen Ländern mit hohem Einkommen wurde auch in Frankreich ein allgemeiner Anstieg der Inzidenz dieser Krebsart beobachtet, und zwar sowohl bei Frauen (+3,4 % bzw. +5,7 % zwischen 1990 und 2018 bzw. zwischen 2010 und 2018) als auch bei Männern (+). 1,5 % bzw. +3,3 % zwischen 1990 und 2018 bzw. zwischen 2010 und 2018). Trends nach Alter zeigen bei Analkrebs einen Anstieg der Fallzahlen, vor allem bei Frauen im Alter von 50 und 60 Jahren.

Die Analyse der Methylierung des menschlichen Genoms in Analabstrichen ist ein vielversprechender Biomarker für das Analkrebsrisiko. Methylierung ist ein epigenetisches physiologisches Phänomen, das die Expression bestimmter Gene reguliert. Es wurde gezeigt, dass die viralen Onkoproteine ​​E6 und E7 von onkogenen Hochrisiko-HPVs (insbesondere HPV16) eine Aktivierung oder erhöhte Expression der zellulären Enzyme induzieren, die für diese Methylierungsphänomene verantwortlich sind. Generell gilt, dass eine Hypermethylierung von Genpromotoren zu deren Inaktivierung führt. Die Unterdrückung von Genen, die an der antiviralen oder Anti-Tumor-Reaktion beteiligt sind, kann zum Entweichen des Immunsystems beitragen, wohingegen eine Hypermethylierung, die eine Unterdrückung von Tumorsuppressorgenen induziert, den Krebsprozess begünstigt.

In Bezug auf Analkrebs zeigten zwei Studien, dass die zuvor für den Gebärmutterhals entwickelten Methylierungsmarker für Analkrebs nicht diskriminierend waren. Anschließend hat eine Querschnittsanalyse von Analbiopsien in verschiedenen Stadien (normale Zytologie, niedriggradige oder hochgradige Läsionen, Krebs) Methylierungsmarker ergeben, die für die Analkarzinogenese in Analbiopsien (invasive Gewebeentnahme) spezifisch sind.

Diese Marker sind äußerst vielversprechend, und die Methylierung könnte daher einen robusten prädiktiven Marker für das Fortschreiten einer invasiven Läsion darstellen und wäre daher ein entscheidender Faktor bei der Entscheidung zwischen invasiver Behandlung und Überwachung.

Ii. Wissenszustand über Referenzverfahren

Die Entwicklung analer vorkrebsartigen Läsionen ist aufgrund des bisherigen Fehlens von Screening-Programmen weniger gut beschrieben als die von Halsläsionen.

Zum ersten Mal zeigte die American Anchor-Studie von fast 5.000 PLHIV den Einfluss der Behandlung hochwertiger Läsionen mit einer Verringerung der Krebsrate im behandelten Arm um 57% (Inzidenz 173 pro 100.000 PA gegenüber 402 pro 100.000 PA in der einfache Überwachungsarm). Nach dieser Studie werden Empfehlungen zum Screening auf präkanzeröse Analläsionen in asymptomatischen gefährdeten Populationen entstehen.

Im Januar 2023 gab die französische National Society of Colo-Proctology (SNFCP) Empfehlungen für das Screening von asymptomatischen Personen in drei gefährdeten Bevölkerungsgruppen aus Analkrebsempfehlungen: MSM, das mit HIV über 30 Jahre alt ist, Frauen mit vorbereitender Läsion oder Krebs in der Vergangenheit der Vulva und Frauen, die seit mehr als 10 Jahren eine solide Organtransplantation erhalten haben. Diese Empfehlungen richten sich nach der Metaanalyse von Clifford et al. In diesem Zusammenhang basiert das Screening auf Analkrebs auf dem primären HPV16-Screening, insbesondere durch Anal-Selbstabtastung und, wenn positiv, ein Analstrich für die Zytologie und eine Standard-Proktologieuntersuchung. Im Falle einer abnormalen Zytologie werden Patienten für eine Proktologie-Konsultation mit hochauflösender Anoskopie (HRA) überwiesen.

In Frankreich gibt es nur wenige Proktologen, die AHR-Untersuchungen durchführen, und die Wartezeiten für Konsultationen sind bereits sehr hoch. Das größte Hindernis für die Einführung des Analkrebs-Screenings ist die erwartete Verschärfung der Überfüllung von AHR-Untersuchungen und proktologischen Konsultationen. Beispielsweise berichtete eine aktuelle Metaanalyse über eine Prävalenz von 27 % bis 35 % der HPV16-Infektion im Analbereich von MSM, die mit HIV leben. Daher ist die Entwicklung von Triage-Instrumenten, die es ermöglichen, nur die Patienten zu dieser Untersuchung zu überweisen, bei denen das größte Risiko für eine hochgradige Analdysplasie besteht, von entscheidender Bedeutung.

Das Ziel dieser neuen Studie besteht darin, die Vorhersagefähigkeit von Analabstrich-Methylierungsmarkern für das Screening von Patienten zu validieren, bei denen das Risiko einer Entwicklung einer hochgradigen Dysplasie besteht, und geeignete Schwellenwerte in dieser Stichprobe zu definieren, einschließlich Patienten, auf die die neuen SNFCP-Screening-Empfehlungen abzielen und die daher betroffen sind Keine Vorgeschichte von AIN3-Läsionen.

III. Hypothese

Diese Studie basiert auf der Hypothese, dass das Methylierungsniveau der Marker ASCL1 und ZNF582 das Risiko von asymptomatischen Patienten vorhersagen wird, die hochgradige Anal-Läsionen und damit Analkrebs entwickeln.