Metylacja genomu gospodarza: narzędzie przesiewowe w wykrywaniu raka odbytu (AMethysT)

I. Aktualny stan wiedzy na temat patologii

W 2020 r. Na całym świecie zgłoszono 30 000 przypadków raka płaskonabłonkowego odbytu. Te nowotwory wpływają na kobiety w 2/3 przypadków. Są one dość rzadkie w populacji ogólnej, z standardową częstością występowania 0,35 na 100 000 osobników (P.A.) u mężczyzn i 0,57 u kobiet.

Populacja mężczyzn uprawiających seks z mężczyznami (MSM) żyjącymi z HIV jest bardziej narażona na raka odbytu: w badaniach w 2012 r. Wykazały 80-krotny wzrost ryzyka względnego w porównaniu z populacją mężczyzn nie zakażoną HIV. Ta populacja jest również bardziej narażona na infekcje HPV odbytu, co zwiększa dysimmunian związaną z zakażeniem HIV. W rezultacie populacja ta była już przedmiotem konkretnych zaleceń dotyczących badań przesiewowych kanałów analnych w oparciu o cytologię. Niedawna metaanaliza rozwinąła ryzyko raka odbytu w różnych populacjach. Potwierdza nadmierne ryzyko raka odbytu w populacji MSM żyjącej z HIV (do 100 na 100 000 PA w MSM, żyjąc z HIV w wieku powyżej 45 lat).

Zidentyfikował także inne grupy zagrożone rakiem odbytu. Wyższa częstość występowania raka odbytu u kobiet, które miały już raka szyjki macicy lub sromu, jest wyraźnie ustalona. Ale ta metaanaliza Clifford i in. pokazuje inną stratyfikację ryzyka raka odbytu w zależności od rodzaju wcześniejszego raka indukowanego przez HPV. Zatem częstość występowania raka odbytu jest najwyższa w przypadku historii raka sromu, równa 50 na 100 000 PA, podczas gdy wynosi blisko 10 na 100 000 Pa w przypadku historii raka pochwy lub szyjki macicy. Inna grupa zagrożona rakiem odbytu składa się z osób z immunosupresją, które nie są zakażone HIV, aw szczególności biorcy przeszczepu stałego, z różnymi częstością występowania raka odbytu w zależności od rodzaju przeszczepu, a przede wszystkim od przeszczepu.

Ogólnie rzecz biorąc, wskaźniki zachorowalności na raka odbytu, niezależnie od płci, są wyższe w krajach o wysokich dochodach. W 2018 r. we Francji zgłoszono 1532 nowe przypadki raka odbytu u kobiet, co odpowiada współczynnikowi zapadalności wynoszącemu 2,4 na 100 000 osobolat i 479 nowych przypadków u mężczyzn, co odpowiada współczynnikowi zapadalności wynoszącemu 0,8 na 100 000 osobolat. Podobnie jak w wielu krajach o wysokich dochodach, we Francji zaobserwowano ogólny wzrost zachorowalności na ten nowotwór, zarówno u kobiet (odpowiednio +3,4% i +5,7% w latach 1990–2018 oraz między 2010 a 2018 r.), jak i u mężczyzn (+ odpowiednio 1,5% i +3,3% w latach 1990–2018 i 2010–2018). Tendencje w zależności od wieku w przypadku raka odbytu wskazują na wzrost liczby zachorowań, głównie u kobiet w wieku 50 i 60 lat.

Analiza metylacji ludzkiego genomu w wymazach z odbytu jest obiecującym biomarkerem ryzyka raka odbytu. Metylacja jest epigenetycznym zjawiskiem fizjologicznym, które reguluje ekspresję niektórych genów. Wykazano, że wirusowe onkoproteiny E6 i E7 onkogennych HPV wysokiego ryzyka (zwłaszcza HPV16) indukują aktywację lub zwiększoną ekspresję enzymów komórkowych odpowiedzialnych za te zjawiska metylacji. Z reguły hipermetylacja promotorów genów prowadzi do ich inaktywacji. Represja genów biorących udział w odpowiedzi przeciwwirusowej lub przeciwnowotworowej może przyczyniać się do ucieczki układu odpornościowego, podczas gdy hipermetylacja wywołująca represję genów supresorowych nowotworu sprzyja procesowi nowotworowemu.

Jeśli chodzi o raka odbytu, dwa badania wykazały, że markery metylacji opracowane wcześniej dla szyjki macicy nie dyskryminowały raka odbytu. Następnie przekrojowa analiza biopsji odbytu na różnych etapach (cytologia prawidłowa, zmiany o niskim lub wysokim stopniu złośliwości, rak) ujawniła w biopsjach odbytu (inwazyjne pobieranie próbek tkanki) markery metylacji specyficzne dla karcynogenezy odbytu.

Markery te są niezwykle obiecujące, a zatem metylacja może stanowić solidny marker progresji do zmiany inwazyjnej, a zatem byłby decydującym czynnikiem w decyzji o leczeniu inwazyjnym w porównaniu z nadzorem.

Ii. Stan wiedzy na temat procedur referencyjnych

Ewolucja zmian przednowotworowych odbytu jest słabiej opisana niż zmian w szyjce macicy ze względu na brak dotychczas programów badań przesiewowych.

Po raz pierwszy amerykańskie badanie ANCHOR obejmujące prawie 5000 osób zakażonych wirusem HIV wykazało wpływ leczenia zmian o wysokim stopniu złośliwości, powodując zmniejszenie o 57% częstości występowania nowotworów w leczonym ramieniu (zapadalność 173 na 100 000 rocznie w porównaniu z 402 na 100 000 rocznie w proste ramię monitorujące). W następstwie tego badania zaczynają pojawiać się zalecenia dotyczące badań przesiewowych w kierunku przednowotworowych zmian odbytu w bezobjawowych populacjach ryzyka.

W styczniu 2023 r. Francuskie Krajowe Towarzystwo Colo-Proktologii (SNFCP) wydało zalecenia dotyczące badań przesiewowych w kierunku raka odbytu u osób bez objawów w trzech populacjach ryzyka: MSM zakażone wirusem HIV w wieku powyżej 30 lat, kobiety ze zmianami przedrakowymi lub nowotworami w wywiadzie sromu i kobiet, które przeszły przeszczep narządu litego przez ponad 10 lat. Zalecenia te dotyczą populacji, w których zapadalność na raka odbytu przekracza 40 na 100 000 rocznie, zgodnie z metaanalizą przeprowadzoną przez Clifforda i wsp. W tym kontekście badania przesiewowe w kierunku raka odbytu opierają się na pierwotnym badaniu przesiewowym pod kątem HPV16, w szczególności na samodzielnym pobieraniu próbek z odbytu i, w przypadku wyniku pozytywnego, na pobraniu wymazu z odbytu do cytologii i standardowym badaniu proktologicznym. W przypadku nieprawidłowej cytologii pacjent zostanie skierowany na konsultację proktologiczną z wykonaniem anoskopii wysokiej rozdzielczości (HRA).

W Francji jest niewielu proktologów, którzy przeprowadzają egzaminy AHR, a czasy oczekiwania na konsultacje są już bardzo wysokie. Główną przeszkodą w wprowadzeniu badań przesiewowych raka odbytu jest przewidywane pogorszenie przeludnienia badań AHR i konsultacji proktologii. Na przykład niedawna metaanaliza wykazała częstość występowania od 27% do 35% zakażenia HPV16 w regionie odbytu MSM życia z HIV. Kluczowe jest zatem opracowanie narzędzi segregacyjnych umożliwiających tylko tych pacjentów najbardziej narażonych na dysplazję odbytu o wysokiej jakości odbycie.

Celem tego nowego badania jest potwierdzenie zdolności predykcyjnej markerów metylacji rozmazu odbytu dla badań przesiewowych pacjentów narażonych na awans do dysplazji wysokiej jakości i zdefiniowanie odpowiednich progów w tej próbce, w tym pacjentów ukierunkowanych na nowe zalecenia SNFCP, a zatem z udziałem, a zatem z udziałem, a zatem z udziałem, a zatem z udziałem, a zatem z udziałem, a zatem z udziałem, a zatem z udziałem, a zatem z udziałem z udziałem SNFCP Brak historii zmian AIN3.

Iii. Hipoteza

Badanie to opiera się na hipotezie, że poziom metylacji markerów ASCL1 i ZNF582 będzie przewidywał ryzyko bezobjawowych pacjentów rozwijających wysokiej jakości zmiany odbytu, a zatem raka odbytu.