Methylace genomu hostitele: Screeningový nástroj při detekci anální rakoviny (AMethysT)

I. Současný stav znalostí o patologii

V roce 2020 bylo celosvětově hlášeno 30 000 případů spinocelulárního karcinomu řitního otvoru. Tyto rakoviny postihují ženy ve 2/3 případů. V běžné populaci jsou poměrně vzácné, s věkově standardizovanou incidencí 0,35 na 100 000 osoboroků (p.a.) u mužů a 0,57 u žen.

Populace mužů, kteří mají sex s muži (MSM) žijícími s HIV, je vystavena většímu riziku rakoviny konečníku: studie v roce 2012 uvedly 80násobné zvýšení relativního rizika ve srovnání s mužskou populací neinfikovanou HIV. Tato populace je také více vystavena análním infekcím HPV, což přispívá k dysimunitě spojené s infekcí HIV. V důsledku toho byla tato populace již předmětem specifických doporučení týkajících se screeningu rakoviny análního kanálu na základě cytologie. Nedávná metaanalýza stratifikovala riziko análního karcinomu v různých populacích. Potvrzuje nadměrné riziko rakoviny konečníku v populaci MSM žijící s HIV (až 100 na 100 000 pa v MSM žijících s HIV ve věku nad 45 let).

Rovněž identifikovala jiné skupiny ohrožené anální rakovinou. Je jasně stanovena vyšší míra incidence rakoviny análu u žen, které již měly děložní nebo vulvovaginální rakovinu. Ale tato metaanalýza Clifford et al. ukazuje odlišnou stratifikaci rizika rakoviny análního rakoviny podle typu předchozí rakoviny indukované HPV. Míra incidence rakoviny análu je tedy nejvyšší v případě anamnézy rakoviny vulváru, která se rovná 50 na 100 000 PA, zatímco v případě anamnézy vaginálních nebo děložních rakovin se blíží 10 na 100 000 PA. Další skupina ohrožená anální rakovinou je tvořena imunosupresivními lidmi, kteří nejsou infikováni HIV, a zejména příjemci solidních transplantací, s různou mírou incidence análu v závislosti na typu transplantace a především od transplantace.

Celkově je míra incidence anální rakoviny bez ohledu na sex vyšší v zemích s vysokými příjmy. V roce 2018 bylo u žen ve Francii hlášeno 1 532 nových případů rakoviny análního análního, což odpovídá incidenci 2,4 na 100 000 ženských let a 479 nových případů u mužů, což odpovídá výskytu 0,8 na 100 000 mužských let. Stejně jako v mnoha zemích s vysokými příjmy byl ve Francii pozorován celkový nárůst incidence této rakoviny, a to jak u žen (+3,4% a+5,7% mezi lety 1990 a 2018 a mezi lety 2010 a 2018) a u mužů (+u mužů (+u mužů (+ 1,5% a +3,3% mezi lety 1990 a 2018 a mezi lety 2010 a 2018). Trendy podle věku pro rakovinu análních ukazují nárůst počtu případů, zejména u žen ve věku 50 a 60 let.

Analýza methylace lidského genomu v análních výtěrech je slibným biomarkerem rizika anální rakoviny. Methylace je epigenetický fyziologický jev, který reguluje expresi určitých genů. Bylo prokázáno, že virové onkoproteiny E6 a E7 vysoce rizikových onkogenních HPV (zejména HPV16) indukují aktivaci nebo zvýšenou expresi buněčných enzymů odpovědných za tyto methylační jevy. Obecně platí, že hypermethylace promotorů genů vede k jejich inaktivaci. Represe genů zapojených do antivirové nebo protinádorové odpovědi může přispět k imunitnímu úniku, zatímco hypermethylace vyvolávající potlačení genů supresorů nádoru upřednostňuje rakovinový proces.

Pokud jde o rakovinu konečníku, dvě studie prokázaly, že metylační markery dříve vyvinuté pro děložní čípek nebyly diskriminační pro rakovinu konečníku. Následně průřezová analýza análních biopsií v různých stadiích (normální cytologie, léze nízkého nebo vysokého stupně, rakovina) odhalila methylační markery specifické pro anální karcinogenezi v análních biopsiích (invazivní odběr vzorků tkáně).

Tyto markery jsou nesmírně slibné a methylace by proto mohla představovat robustní prediktivní marker progrese k invazivní lézi, a proto by byl rozhodujícím faktorem při rozhodování o invazivní léčbě versus dohled.

II. Stav znalostí o referenčních postupech

Vývoj análních prekancerózních lézí je méně dobře popsán než vývoj cervikálních lézí kvůli absenci screeningových programů až do současnosti.

Studie americké kotvy poprvé prokázala dopad léčby vysoce kvalitních lézí poprvé s 57% snížením rychlosti rakoviny v léčeném rameni (incidence 173 na 100 000 pa vs. 402 na 100 000 PA v Jednoduchá dozorovací rameno). Po této studii se začínají objevovat doporučení pro screening na prekancerózní anální léze v asymptomatických rizikových populacích.

V lednu 2023 vydala Francouzská národní společnost pro koloproktologii (SNFCP) doporučení pro screening análního karcinomu u asymptomatických jedinců ve třech rizikových populacích: MSM žijící s HIV ve věku nad 30 let, ženy s anamnézou prekancerózních lézí nebo rakoviny. vulvy a žen, které podstoupily transplantaci solidních orgánů déle než 10 let. Tato doporučení se zaměřují na populace s incidencí análního karcinomu vyšší než 40 na 100 000 pa podle metaanalýzy Clifforda et al. V této souvislosti je screening análního karcinomu založen na primárním screeningu HPV16, zejména análním self-samplingem, a pokud je pozitivní, análním stěrem pro cytologii a standardním proktologickým vyšetřením. V případě abnormální cytologie budou pacienti odesláni na proktologickou konzultaci s anoskopií s vysokým rozlišením (HRA).

Ve Francii je jen málo proctologů, kteří provádějí zkoušky AHR, a čekací doby na konzultace jsou již velmi vysoké. Hlavním blokem úrazu k zavedení screeningu anální rakoviny je očekávané zhoršení přeplnění zkoušek AHR a proctologických konzultací. Například nedávná metaanalýza vykázala prevalenci 27% až 35% infekce HPV16 v anální oblasti MSM žijící s HIV. Vývoj nástrojů třídění, které umožňují pouze těm pacientům, které jsou nejvíce ohroženy anální dysplazie vysoce kvalitního pro toto zkoumání, je proto zásadní.

Cílem této nové studie je ověřit prediktivní kapacitu markerů metylace análního stěru pro screening pacientů s rizikem progrese do dysplazie vysokého stupně a definovat vhodné prahové hodnoty v tomto vzorku, včetně pacientů, na které se zaměřují nová doporučení pro screening SNFCP, a proto s bez anamnézy lézí AIN3.

III. Hypotéza

Tato studie je založena na hypotéze, že úroveň methylace markerů ASCL1 a ZNF582 bude prediktivní rizikem asymptomatických pacientů vyvíjejících se vysoce kvalitních análních lézí, a tedy anální rakoviny.