Målorganskada och polymorfismer Vav-2 och Vav-3 hos hypertensiva patienter (LOD-HTA)

Ambulatorisk blodtrycksövervakning (ABPM): ABPM kommer att utföras på en dag med standardaktivitet, med en lämplig manschett för storleken på patientens arm. Ett kontrollsystem, SpaceLabs 90207-modell (Spacelabs Healthcare, Issaquah, Washington, USA), validerat enligt protokollet från British Hypertension Society, kommer att användas [57]. De poster där andelen giltiga avläsningar kommer att vara 80 % av totalen och med giltiga avläsningar vid alla tidpunkter ansågs vara giltiga. Dessutom krävs minst 14 mätningar under dagtid, eller minst sju under natt- eller viloperioden, för att journalerna ska kunna utvärderas. Monitorn kommer att schemaläggas för att erhålla blodtrycksmätningar var 20:e minut under dagtid och var 30:e minut under viloperioden. Genomsnitts- och spridningsuppskattningarna av SBP och DBP beräknades under 24-timmars-, dag- och nattperioderna, definierade utifrån den dagbok som patienten rapporterade. Patienten fyller i ett formulär som anger läggtid och väckningstid.

Ambulatoriskt artärstyvhetsindex (AASI) och Home Arterial Stiffness Index (HASI): Arteriell stelhet kommer att utvärderas av ambulatoriskt och hemartärstyvhetsindex (AASI och HASI). För AASI- och HASI-uppskattning kommer regressionslutningen för diastoliskt på systoliskt blodtryck att beräknas för varje individ på basis av 24-timmars ABPM (AASI) och även HASI-avläsningar under 6 dagar. AASI såväl som HASI definierades som en minus respektive regressionslutning för DBP på SBP [58]. AASI kommer också att beräknas från vaket eller sovande blodtryck.

Utvärdering av retinala kärl: Retinografi kommer att utföras med en Topcon TRC NW 200 icke-mydriatisk retinalkamera (Topcon Europe B.C., Capelle a/d Ijssel, Nederländerna), för att erhålla nasala och temporala bilder centrerade på disken. Näsbilden med den centrerade skivan kommer att laddas in i den utvecklade programvaran, AV Index-kalkylator (Ciclorisk SL, Salamanca, Spanien, registernr. 00/2011/589). Programvaran känner automatiskt igen skivan och ritar två externa koncentriska cirklar som avgränsar area A, mellan 0 och 0,5 skivdiametrar från den optiska skivans marginal, och area B, mellan 0,5 och 1 skivdiametrar från marginalen. Mjukvaran identifierar först gränserna för de olika kärlen, varefter den automatiskt känner igen artärer och vener och gör flera mätningar av diametern på den del av kärlen som cirkulerar genom område B. Den uppskattar slutligen medelkalibern av vener och artärer i mm , och dessa mätningar sammanfattas som ett arteriol-venulförhållande, AVIx. En AVIx på 1,0 tyder på att arteriolära diametrar i genomsnitt kommer att vara samma som venulära diametrar i det ögat, medan en mindre AVR tyder på smalare arterioler. Vi använde paren av huvudkärl i den övre och nedre temporala kvadranten, förkastade alla andra kärl, för att förbättra tillförlitligheten och öka effektiviteten i processen, analyserade åtgärder för varje kvadrant separat och tillsammans för att uppskatta medelmåttet i varje öga. [64].

Laboratorium: Bestämning av koncentrationen av superoxid och katekolaminer (adrenalin och noradrenalin) i plasma- och urinanjon kommer att bestämmas med ELISA (CatCombi ELISA, IBL, Deventer, Nederländerna), enligt tillverkarens instruktioner. Superoxiddismutasaktivitet i plasma kommer också att bedömas med hjälp av ELISA-kit (Cu-Zn superoxid-dismutase ELISA, IBL), och urinutsöndringen och plasmanivåerna av lipidperoxider genom att mäta produkter som reagerar med tiobarbitursyra (TBARS) (OxiSelect TBARS Assay Kit, Cell Biolabs, Inc., San Diego, CA 92126).

I ett prov av DNA från perifert blod studeras erytrocytpolymorfismer av VAV- och VAV-2-3-gener i alla studieämnen. För detta ändamål, 10cc venöst blod erhållits med antikoagulant (EDTA: etylendiamintetraättiksyra).

Njurbedömning: Njurskadan kommer att bedömas genom att mäta kreatininplasmakoncentrationen, den glomerulära filtrationshastigheten uppskattades av CKD-EPI (Chronic Kidney Disease Epidemiology Collaboration) [59] och MDRD-IDMS (Modification of Diet in Renal Disease-Isotopic Dilution) Masspektrometri) [60] ekvation och proteinuri utvärderades av albumin/kreatinin-förhållandet enligt kriterierna från 2007 European Society of Hypertension/European Society of Cardiology Guidelines [2]. Subklinisk organskada definierades som plasmakreatinin mellan 1,3 - 1,5 mg/dl hos män och 1,2 - 1,4 mg/dl hos kvinnor, glomerulär filtrationshastighet under 60 ml/min eller albumin/kreatininförhållande > 22 mg/gr hos män och 31 mg / gr hos kvinnor. Njursjukdom definierades som plasmakreatinin på 1,5 mg/dl eller högre hos män och 1,4 mg/l hos kvinnor eller albumin/kreatininkvot > 300 mg/24 timmar.

Hjärtbedömning: Den elektrokardiografiska undersökningen kommer att utföras med ett General Electric MAC 3.500 EKG-system (Niskayuna, New York, USA), som automatiskt mäter spänningen och varaktigheten av vågor och uppskattar kriterierna för Cornell voltage-duration-produkten (Cornell VDP) [61] för att bedöma LVH genom följande ekvation: Män ((RaVL + SV3) * QRS) och kvinnor ((RaVL + SV3) * QRS + 6). LVH kommer att definieras som spänningsvaraktighetsprodukten > 2 440 mm/ms [2] och Sokolow och R avl > 11.

Pulsvåghastighet (PWV): Dessa parametrar kommer att uppskattas med hjälp av SphygmoCor-systemet (AtCor Medical Pty Ltd., huvudkontor, West Ryde, Australien). Med hjälp av SphygmoCor-systemet (Vx pulsvågshastighet) och med patienten i ryggläge analyserades pulsvågorna i halspulsådern och lårbensartärerna, för att uppskatta fördröjningen med avseende på EKG-vågen och beräkna PWV. Avståndsmätningar gjordes med ett måttband från bröstbenets skåra till halspulsådern och lårbensartärerna vid sensorplatsen [62].

Bedömning av vaskulär struktur genom carotis intima media thickness (IMT): Carotis ultraljud för att bedöma C-IMT kommer att utföras av två utredare utbildade för detta ändamål innan studien påbörjas. Tillförlitligheten av sådana inspelningar utvärderades före studien med användning av intraklasskorrelationskoefficienten, som visade värden på 0,97 (95%CI: 0,94-0,99) för intra-observatörsöverenskommelse om upprepade mätningar hos 20 försökspersoner och 0,90 (95 %CI: 0,74-0,96) för överenskommelse mellan observatörer. Enligt Bland-Altman-analysen var gränsen för överenskommelse mellan observatörer 0,02 (95 % KI: -0,05-0,10), medan gränsen för avtal inom observatören var 0,01 (95 % KI: -0,03-0,06). En Sonosite Micromax-ultraljudsenhet parad med en 5-10 MHz flerfrekvens högupplöst linjär givare med Sonocal-programvara kommer att användas för att utföra automatiska mätningar av carotis IMT för att optimera reproducerbarheten. Mätningar kommer att göras av den gemensamma halspulsåden efter undersökning av ett 10 mm längdsnitt på ett avstånd av 1 cm från bifurkationen, genom att utföra mätningar i den främre eller proximala väggen och i den bakre eller distala väggen i den laterala, främre och posteriora projektioner, som följer en axel vinkelrät mot artären för att urskilja två linjer: en för intima-blod-gränsytan och den andra för media-adventitiv-gränsytan. Totalt 6 mätningar kommer att erhållas av den högra karotisen, med ytterligare 6 mätningar av den vänstra halspulsåden, med hjälp av medelvärden (medelvärden för halspulsådern) och maximivärden (maximal halspulsåder IMT) som automatiskt beräknas av programvaran [63]. Mätningarna kommer att erhållas med försökspersonen liggande, med huvudet utsträckt och något vänt mot den undersökta halspulsådern. Den genomsnittliga IMT kommer att betraktas som onormal om den mätte 0,90 mm, eller om det kommer att finnas aterosklerotiska plack med en diameter på 1,5 mm eller en fokal ökning på 0,5 mm eller 50 % av den intilliggande IMT [2].