Sekundární intolerance laktózy v důsledku chronické infekce norovirem

V kohortě vyšetřovatelů 1000 příjemců ledvinového transplantátu (RTR) v Univerzitní nemocnici v Curychu mají vyšetřovatelé v současné době k dispozici 10 pacientů s chronickou norovirovou infekcí, což bylo prokázáno analýzou pozitivní polymerázové řetězové reakce (PCR) nedávných vzorků stolice, zatímco chronické vylučování viru je definováno jako více než dva PCR pozitivní vzorky v intervalu alespoň jednoho měsíce. Negativní kultivace stolice a PCR analýzy vylučují souběžné virové (jiné než noroviry), bakteriální nebo parazitární (zejména Gardia lamblia) střevní infekce. Hlavním vylučovacím kritériem pro tuto sérii případů je současná střevní infekce (jiná než norovirus) a primární intolerance laktózy, která je dříve vyloučena absencí genotypu CC varianty DNA -13910 T/C upstream v genu LCT. Po obdržení písemného a ústního informovaného souhlasu vyšetřovatelé provedou laktózový vodíkový dechový test (LH2BT) a laktózový toleranční test (LTT) ve všech způsobilých RTR s prokázanou chronickou norovirovou infekcí bez ohledu na aktuální abdominální symptomy.

Studovaná populace (N=10) je rozdělena do dvou skupin podle gastrointestinálních symptomů (asymptomatické versus symptomatické, jako je chronický průjem nebo difúzní břišní diskomfort). Výzkumníci zvolili pro účely této studie limitní tři nebo více stolic za den jako ukazatel průjmu. RTR s jinak nevysvětlitelným chronickým průjmem, ale bez norovirové infekce, slouží jako kontrolní skupina (N=10).

Laktóza Laktóza je disacharidový cukr, který se nachází především v mléce a je tvořen z galaktózy a glukózy. Laktóza tvoří asi 2 ~ 8 % mléka (podle hmotnosti), ačkoli množství se u jednotlivých druhů a jedinců liší. Extrahuje se ze sladké nebo kyselé syrovátky. Střevní klky vylučují enzym zvaný laktáza (β-D-galaktosidáza), který je tráví. Tento enzym štěpí molekulu laktózy na její dvě podjednotky, jednoduché cukry glukózu a galaktózu, které mohou být absorbovány. Vzhledem k tomu, že laktóza se vyskytuje převážně v mléce, u většiny savců produkce laktázy postupně klesá s dospělostí v důsledku nedostatku stálé spotřeby. U lidí s intolerancí laktózy se laktóza nerozkládá a poskytuje potravu pro střevní flóru produkující plyn, což může vést k průjmu, nadýmání, plynatosti a dalším gastrointestinálním symptomům.

Laktózový H2 dechový test (LH2BT) LH2BT se provádí podle Newcomer et al. [8]. Po celonočním hladovění trvajícím alespoň 12 hodin se odebere vzorek bazálního dechu. RTR mohou během celého vyšetření pít vodu a dodržovat svůj obvyklý léčebný režim. Po odběru základního vzorku se RTR podává k pití 25 g laktózy rozpuštěné ve 250 ml vody. Laktóza je přírodní disacharid D-glukózy a D-galaktózy („mléčný cukr“), který je obsažen ve všech mléčných výrobcích. Pro účely studie je poskytován jako laktózový prášek (nebo sušené mléko) se sadou AlveoSampler™ Lactose Kit s 25 gramy laktózy s pomerančovou příchutí (obrázek 1). Vzorky dechu na konci výdechu jsou poté odebírány 30, 60, 90 a 120 minut po orální zátěži laktózou, aby se změřila koncentrace vodíku (H2), která je považována za významně zvýšenou a svědčící pro maldigesci laktózy nad hodnotou 20 ppm. 8]. Během testu se LTR smí zapojit do běžných činností. Po celou dobu vyšetření je povolena pouze spotřeba vody. Test se provádí v dobře větrané místnosti bez čerstvě natřených stěn nebo předmětů a bez známek jakýchkoli organických rozpouštědel nebo cigaretového kouře. Vzorky se odebírají do speciálně konstruovaných vaků, které jsou dodávány spolu s přístrojem (Quintron Instrument Co., Milwaukee, WI, USA, [obrázek 1]). Koncentrace H2 v dechu se měří na mikrolyzéru Model 12 zakoupeném od Quintron Instrument Co. Je také dokumentován počet volných pohybů a plynatost během testu.

A-AlveoSamplerTM a Model 12i MicroLyzer (Quintron Instrument Co., WI, USA, [Obrázek 1]) Rozměry plynového chromatografu jsou: výška, 27 cm; šířka, 35 cm; hloubka 23 cm a hmotnost 7,3 kg. Pro analýzu vzorků vodíkového dechu by měl být přístroj umístěn v místnosti někde poblíž vyšetřovaného místa se stabilní pokojovou teplotou. Pro každý subjekt a pro každou studijní relaci je zapotřebí jeden systém sběru plynu včetně odhazovacího vaku, náustku, uzavíracího kohoutu a injekční stříkačky. Každý vzorek dechu na konci exspirace odebraný do injekční stříkačky systému musí být ihned po odběru analyzován. Ke generování výsledných parametrů není potřeba žádný specifický software.

Obrázek 1: Systém sběru dechu (AlveoSamplerTM) a plynový chromatograf (Model 12i MicroLyzer, Quintron Instrument Co., WI, USA). Sady AlveoSampler™ System jsou ekonomickým a jednorázovým řešením pro dechové zkoušky. Tyto sady umožňují snadný sběr a maximalizují návratnost vaší investice. Umožňuje technikovi ručně odebrat alveolární vzorek do injekční stříkačky pro okamžitou analýzu.

Použití tohoto zařízení pro jednoho pacienta odstraňuje nebezpečí zkřížené infekce mezi pacienty a šetří čas a peníze spojené s náklady na čištění a sterilizaci opakovaně použitelných součástí.

Každá sada se dodává předem sestavená se substrátem dle vašeho výběru; Laktóza, fruktóza, d-xylóza nebo laktulóza. Tyto sady jsou k dispozici také bez substrátu, aby bylo možné využít další substráty pro dechové testy, které nelze přibalit k testovací sadě, jako je glukóza, sacharóza a sorbitol.

Každá sada obsahuje:

1 balíček substrátu (určeno podle objednané sady)

1 jednorázová 35ml injekční stříkačka

1 jednocestný uzavírací kohout na jedno použití

1 jednorázový odpadní sáček AlveoSampler™

1 sada instrukcí s analytickým záznamem

Katalogová čísla:

QT00828-P - AlveoSampler™ Lactose Kit s 25 gramy laktózy s pomerančovou příchutí

Laktózový toleranční test (LTT) Po výše uvedeném perorálním podání 25 g laktózy se zdokumentují hladiny glukózy v krvi po 0, 60 a 120 minutách, které se provádějí pomocí glukometru "Bayer Ascensia Contour Set" pomocí vzorků kapilární krve. Zvýšení glykémie o méně než 1,1 mmol/l ve spojení s rozvojem abdominálních symptomů je definováno jako diagnostické pro intoleranci laktózy [8].

b. Měření výsledků studie Prevalence intolerance laktózy vyjádřená s pozitivním LH2BT a/nebo pozitivním LTT v RTR s chronickou norovirovou infekcí.