Adherence tenofoviru k rychlému vedení a hodnocení PrEP a terapie HIV (TARGET)

Cíle studie

Primární cíl:

• Stanovit farmakokinetiku tenofoviru (TFV) v krvi, moči a plazmě u dospělých s perfektní, střední a nízkou adherencí k tenofovir-disoproxyl-fumarátu (TDF).

Sekundární cíle

• Stanovit rychlost vymývání tenofoviru v krvi, plazmě a moči u účastníků s různými úrovněmi adherence k TDF.
• Stanovit ustálené koncentrace TFV v krvi a plazmě mezi kontrolovanými hladinami adherence k TDF.
• Porovnat shodu mezi koncentracemi TFV v krvi, plazmě a moči.
• Stanovit minimální intracelulární koncentrace tenofovir-difosfátu (TFV-DP) ve vzorcích mononukleárních buněk periferní krve (PBMC) a suchých krevních skvrn (DBS) u dospělých s perfektní, střední a nízkou adherencí k léčivu.
• Identifikovat možné koncentrační prahy pro klinickou interpretaci binárního testu adherence v místě péče pro měření TFV (a/nebo TFV-DP) ve vztahu k adherenci k TDF.

Design:

Design studie je randomizovaná, otevřená farmakokinetická studie u zdravých dospělých dobrovolníků. Studie zahrnuje sběr klinických dat a biologických vzorků a subjekty poskytnou písemný informovaný souhlas s účastí. Budou zařazeni zdraví dospělí dobrovolníci (HIV sérologie a hepatitida B s povrchovým Ag negativním). Po obdržení písemného souhlasu bude provedena screeningová návštěva. Studijní tým získá od každého účastníka telefonní číslo, adresu a příslušné kontaktní údaje.

Prohlídka:

Screening účastníků bude proveden do 14 dnů od přihlášení. Bude poskytnut podrobný podkladový demografický a zdravotní dotazník. Bude odebráno 10 ml krve pro základní vyšetření: kompletní krevní obraz, testování protilátek proti HIV, testování povrchového Ag na hepatitidu B, testy funkce ledvin a jater a skladování krve v bioúložišti. Krevní a chemické testy budou použity k vyloučení subjektů s jakýmkoli abnormálním laboratorním testem mezi počtem neutrofilů, hemoglobinem, krevními destičkami, AST nebo ALT. Abnormální test bude definován jako stupeň ≥3 podle tabulky DAIDS pro klasifikaci závažnosti nežádoucích příhod u dospělých a dětí, verze 2.0 listopad 2014). Výsledky klinického vyšetření a základní laboratorní hodnocení budou přezkoumány z hlediska kritérií pro zařazení/vyloučení.

Vstup:

Všechny vstupní návštěvy začnou v pondělí ráno. Po obdržení podrobných informací o plánu studie budou subjekty splňující kritéria pro zařazení zařazeny a randomizovány (1:1:1) do jedné ze 3 skupin, které obdrží kontrolovaný počet dávek Truvady® (Gilead Sciences Inc.), který obsahuje tenofovir-disoproxil-fumarát (TDF, 300 mg) a emtricitabin (FTC, 200 mg) po dobu 6 týdnů. Účastníkovi bude pečlivě vysvětlen plán dávkování léků, plán návštěv a potenciální vedlejší účinky léků.

Zapíšeme celkem 30 dospělých s vyhodnotitelnými vzorky PK (10 na skupinu). Všichni účastníci zahájí TDF ráno v den vstupní návštěvy. 6týdenní období léčby bylo zvoleno tak, aby se zajistily koncentrace tenofoviru v různých matricích (tj. krev, plazma, moč, PBMC) napodobují očekávané stavy u pacientů s chronickým dávkováním dokonalé, střední a nízké adherence k léku. Schéma odběru krve/moči je založeno na hlášeném poločasu tenofoviru v plazmě a výsledcích předchozích farmakokinetických studií.

Koncentrace tenofoviru budou stanoveny u každého účastníka během tří fází studie (1) úvodní období, (2) intenzivní PK odběr vzorků a (3) vymývací období.

Fáze 1: Úvodní období (vstup do 6 týdnů) Návštěva před 2. dávkou: Bezprostředně před druhou dávkou (tj. Skupina 1: 24 po dávce (den #2; úterý ráno); Skupina 2: 48 hodin po dávce (den #3; středa ráno); a skupina 3; 72 hodin po dávce (den #4; čtvrtek ráno) se subjekt vrátí do nemocnice. Odebere se jeden vzorek krve (5 ml). Z tohoto vzorku žilní krve se připraví 5 sušených krevních skvrn (50 µl/spot) na filtrační papír Whatman 903. Zbývající krev bude odstředěna a plazma uložena. Odebere se jeden vzorek plné krve z prstu a na druhé kartě s filtračním papírem Whatman 903 se připraví 2 suché krevní skvrny (50 µl/spot). K odběru PBMC pro stanovení intracelulárních koncentrací tenofoviru-DP bude odebráno oddělených 10 ml krve. Nakonec bude odebrán vzorek moči (5-10 ml). Všechny vzorky budou skladovány při -70°C až -80°C.

Týden 3 a 5 (oba pondělí ráno, před podáním dávky): Před podáním dávky bude odebrán jeden vzorek krve (5 ml). Z tohoto vzorku žilní krve se připraví 5 sušených krevních skvrn (50 µl/spot) na filtrační papír Whatman 903. Zbývající krev bude odstředěna a plazma uložena. Odebere se jeden vzorek plné krve z prstu a připraví se 2 suché krevní skvrny (50 µl/spot) na druhé kartě filtračního papíru Whatman 903. K odběru PBMC pro stanovení intracelulárních koncentrací tenofoviru-DP bude odebráno oddělených 10 ml krve. Nakonec bude odebrán vzorek moči (5-10 ml). Všechny vzorky budou skladovány při -70°C až -80°C. Budou provedeny funkční testy ledvin a jater.

Fáze 2: Intenzivní odběr vzorků PK (začínající v pondělí ráno 7. týdne po 24 hodin) 7. týden Intenzivní návštěva PK: V pondělí ráno 7. týdne se subjekty vrátí do nemocnice brzy ráno. Lékař provede fyzikální vyšetření a odebere krev pro laboratorní hodnocení bezpečnosti (AST a ALT). Podle jejich běžného ranního denního rozvrhu příjmu léku bude odebrán vzorek krve před podáním dávky a jedna tableta Truvada® bude podána nalačno (nejméně 6 hodin předem nalačno). Toto bude poslední dávka přípravku Truvada® pro všechny subjekty. Venózní krev (3 ml/časový bod) bude odebrána 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 a 24 hodin po dávce. V každém časovém bodě bude odebrána žilní krev DBS (5 skvrn) a z prstu (2 skvrny). Budou provedeny funkční testy ledvin a jater.

Vzorky moči budou odebírány před podáním dávky a v intervalech 0-4 hodin, 4-8 hodin, 8-12 hodin a 12-24 hodin. Subjektům bude před dávkou odebráno dalších 10 ml krve a PBMC budou odebrány a uloženy při -70 °C až -80 °C. Po 24 hodinách bude účastník propuštěn z nemocnice. Subjekt bude požádán, aby shromáždil veškerou svou moč až do své další studijní návštěvy za 24 hodin.

Fáze 3: Vymývací odběr vzorků PK (7. až 10. týden) 7. týden (středa až sobota): Po dokončení intenzivního odběru PK se účastníci vrátí na kliniku jednou denně po další 4 dny (tj. do soboty). týdne 7) pro jeden odběr žilní krve (5 ml), odběr vzorku z prstu pro vysušenou krevní skvrnu a bodový vzorek moči (5-10 ml). Subjekt bude požádán, aby shromáždil veškerou moč až do své příští návštěvy kliniky.

Týden 8 (pondělí a čtvrtek): V pondělí a ve čtvrtek 8. týdne bude odebrán jeden odběr žilní krve, odběr vzorku z prstu na zaschlou krevní skvrnu a vzorek moči (5–10 ml). Jeden vzorek PBMC (10 ml krve) bude odebrán v pondělí ráno v týdnu 8 (tj. 1 týden od poslední dávky TDF).

Týden 9 (pondělí): V pondělí bude odebrán jeden odběr žilní krve, odběr vzorku zaschlé krevní skvrny z prstu a vzorek moči (5–10 ml). V pondělí (tj. 2 týdny od poslední dávky TDF) bude také odebrán jeden vzorek PBMC (10 ml krve).

10. týden (pondělí): V pondělí bude odebrán jednorázový odběr žilní krve, odběr vzorku z prstu na zaschlou krevní skvrnu a vzorek moči (5–10 ml). Jeden vzorek PBMC (10 ml krve) bude také odebrán v pondělí ráno (tj. 3 týdny od poslední dávky TDF).

Konec studijní návštěvy (tj. konec týdne 10):

V pondělí bude odebrán jeden odběr žilní krve, odběr vzorku zaschlé krevní skvrny z prstu a bodový test moči (5–10 ml). Jeden vzorek PBMC (10 ml krve) bude také odebrán v pondělí (tj. 4 týdny od poslední dávky TDF). Budou provedeny funkční testy ledvin a jater.

V tomto okamžiku účastníci dokončí studii a nebudou prováděna žádná další hodnocení.

Koncentrace tenofoviru budou měřeny pomocí validovaných testů kapalinové chromatografie-trojité kvadrupólové hmotnostní spektrometrie (LC-MS/MS) na Fakultě přidružených lékařských věd Univerzity Chiang Mai. Intracelulární koncentrace tenofovir-difosfátu (TFV-DP) budou stanoveny pomocí validovaného testu založeného na LC-MS.