Adhésion au ténofovir pour guider et évaluer rapidement la PrEP et le traitement du VIH (TARGET)

Objectifs de l'étude

Objectif principal:

• Déterminer la pharmacocinétique du ténofovir (TFV) dans le sang, l'urine et le plasma chez les adultes présentant une adhésion parfaite, médiane et faible au fumarate de ténofovir disoproxil (TDF).

Objectifs secondaires

• Déterminer le taux d'élimination du ténofovir dans le sang, le plasma et l'urine chez les participants présentant différents niveaux d'adhésion au TDF.
• Déterminer les concentrations à l'état d'équilibre de TFV dans le sang et le plasma parmi les niveaux contrôlés d'adhérence au TDF.
• Comparer la concordance entre le TFV dans les concentrations sanguines, plasmatiques et urinaires.
• Déterminer les concentrations minimales intracellulaires de ténofovir-diphosphate (TFV-DP) dans les échantillons de cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC) et de gouttes de sang séché (DBS) chez les adultes présentant une adhésion médicamenteuse parfaite, médiane et faible.
• Identifier les seuils de concentration possibles pour l'interprétation clinique d'un test binaire d'adhésion au point de service pour la mesure du TFV (et/ou du TFV-DP) en relation avec l'adhésion au TDF.

Conception:

La conception de l'étude est une étude pharmacocinétique randomisée et ouverte chez des volontaires adultes en bonne santé. L'étude implique la collecte de données cliniques et d'échantillons biologiques, et les sujets fourniront un consentement éclairé écrit pour participer. Des volontaires adultes en bonne santé (sérologie VIH et Ag de surface de l'hépatite B négatifs) seront recrutés. Une fois le consentement écrit obtenu, la visite de dépistage sera effectuée. L'équipe de l'étude obtiendra le numéro de téléphone, l'adresse et les coordonnées pertinentes de chaque participant.

Visite de dépistage:

La sélection des participants sera effectuée dans les 14 jours suivant l'inscription. Un questionnaire détaillé sur la démographie et la santé sera administré. Dix ml de sang seront prélevés pour les évaluations de base : numération globulaire complète, test d'anticorps anti-VIH, test d'antigène de surface de l'hépatite B, tests de la fonction rénale et hépatique et stockage du sang dans la bioréserve. Les tests sanguins et chimiques seront utilisés pour exclure les sujets présentant des tests de laboratoire anormaux parmi le nombre de neutrophiles, l'hémoglobine, les plaquettes, l'AST ou l'ALT. Un test anormal sera défini comme un grade ≥3 par le DAIDS Table for Grading the Severity of Adult and Pediatric Adverse Events, Version 2.0 Nov. 2014). Les résultats de l'examen clinique et des évaluations de laboratoire de base seront examinés pour les critères d'inclusion/exclusion.

Entrée:

Toutes les visites d'entrée débuteront un lundi matin. Après avoir reçu des informations détaillées sur le calendrier de l'étude, les sujets répondant aux critères d'inclusion seront recrutés et randomisés (1:1:1) dans l'un des 3 groupes pour recevoir un nombre contrôlé de doses de Truvada® (Gilead Sciences Inc.), qui contient du fumarate de ténofovir disoproxil (TDF, 300 mg) et de l'emtricitabine (FTC, 200 mg) pendant 6 semaines. Le participant sera soigneusement expliqué sur son calendrier de dosage des médicaments, son calendrier de visites et les effets secondaires potentiels des médicaments.

Nous inscrirons un total de 30 adultes avec des échantillons PK évaluables (10 par groupe). Tous les participants commenceront le TDF le matin de la visite d'entrée. La période de traitement de 6 semaines a été choisie afin d'assurer des concentrations de ténofovir dans les différentes matrices (c.-à-d. sang, plasma, urine, PBMC) imitent les conditions attendues chez les patients avec un dosage chronique d'observance médicamenteuse parfaite, médiane et faible. Le programme d'échantillonnage de sang/d'urine est basé sur la demi-vie plasmatique du ténofovir rapportée et sur les résultats d'études pharmacocinétiques antérieures.

Les concentrations de ténofovir seront déterminées chez chaque participant au cours de trois phases d'étude (1) période d'introduction, (2) échantillonnage PK intensif et (3) période de sevrage.

Phase 1 : Période d'initiation (d'entrée à 6 semaines) Visite avant la 2e dose : Immédiatement avant la deuxième dose (c.-à-d. Groupe 1 : 24 post-dose (Jour 2 ; mardi matin) ; Groupe 2 : 48 heures après l'administration (jour 3 ; mercredi matin) ; et groupe 3 ; 72 heures après l'administration (Jour n° 4 ; jeudi matin), le sujet retournera à l'hôpital. Un seul échantillon de sang sera prélevé (5 ml). A partir de cet échantillon de sang veineux, 5 gouttes de sang séché (50 µL/point) seront préparées sur une carte papier filtre Whatman 903. Le sang restant sera centrifugé et le plasma conservé. Un seul échantillon de sang total prélevé au bout du doigt sera prélevé et sur une deuxième carte de papier filtre Whatman 903, 2 gouttes de sang séché (50 µL/point) seront préparées. Un prélèvement sanguin séparé de 10 ml sera prélevé pour collecter les PBMC afin de déterminer les concentrations intracellulaires de ténofovir-DP. Enfin, un échantillon d'urine ponctuel sera prélevé (5-10 mL). Tous les échantillons seront stockés entre -70°C et -80°C.

Semaines 3 et 5 (lundi matin, pré-dose) : un seul échantillon de sang sera prélevé (5 mL) avant l'administration de la dose. A partir de cet échantillon de sang veineux, 5 gouttes de sang séché (50 µL/point) seront préparées sur une carte papier filtre Whatman 903. Le sang restant sera centrifugé et le plasma conservé. Un seul échantillon de sang total prélevé au bout du doigt sera prélevé et 2 gouttes de sang séché (50 µL/point) seront préparées sur une deuxième carte de papier filtre Whatman 903. Un prélèvement sanguin séparé de 10 ml sera prélevé pour collecter les PBMC afin de déterminer les concentrations intracellulaires de ténofovir-DP. Enfin, un échantillon d'urine ponctuel sera prélevé (5-10 mL). Tous les échantillons seront stockés entre -70°C et -80°C. Des tests de la fonction rénale et hépatique seront effectués.

Phase 2 : Échantillonnage PK intensif (à partir du lundi matin de la semaine 7 pendant 24 heures) Visite PK intensive de la semaine 7 : Le lundi matin de la semaine 7, les sujets retourneront à l'hôpital tôt le matin. Un médecin procédera à un examen physique et du sang sera prélevé pour des évaluations de sécurité en laboratoire (AST et ALT). Conformément à leur horaire quotidien normal de prise de médicaments le matin, un échantillon de sang pré-dose sera prélevé et un seul comprimé de Truvada® sera administré à jeun (au moins 6 heures de jeûne avant). Ce sera la dernière dose de Truvada® pour tous les sujets. Le sang veineux (3 ml/point temporel) sera prélevé 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 et 24 heures après l'administration. À chaque instant, un DBS de sang veineux (5 points) et un doigt (2 points) seront prélevés. Des tests de la fonction rénale et hépatique seront effectués.

Des échantillons d'urine seront prélevés avant la dose et sur des intervalles de 0 à 4 heures, 4 à 8 heures, 8 à 12 heures et 12 à 24 heures. Les sujets recevront une pré-dose supplémentaire de 10 mL de sang et les PBMC seront collectés et stockés entre -70 °C et -80 °C. Après 24 heures, le participant sortira de l'hôpital. Le sujet sera invité à recueillir toute son urine jusqu'à sa prochaine visite d'étude dans 24 heures.

Phase 3 : Échantillonnage PK avec lavage (semaines 7 à semaine 10) Semaine 7 (du mercredi au samedi) : une fois l'échantillonnage PK intensif terminé, les participants retourneront à la clinique une fois par jour pendant les 4 prochains jours (c'est-à-dire jusqu'au samedi de la semaine 7) pour un seul prélèvement de sang veineux (5 ml), un prélèvement d'échantillon par piqûre au doigt pour une tache de sang séché et un échantillon d'urine ponctuel (5-10 ml). Le sujet sera invité à recueillir toute son urine jusqu'à sa prochaine visite à la clinique.

Semaine 8 (lundi et jeudi) : Un seul prélèvement de sang veineux, un prélèvement d'échantillon par piqûre au doigt pour la tache de sang séché et un échantillon d'urine ponctuel (5-10 ml) seront prélevés le lundi et le jeudi de la semaine 8. Un seul échantillon de PBMC (10 ml de sang) sera prélevé le lundi matin de la semaine 8 (c'est-à-dire 1 semaine depuis la dernière dose de TDF).

Semaine 9 (lundi) : Un seul prélèvement de sang veineux, un prélèvement d'échantillon par piqûre au doigt pour la tache de sang séché et un échantillon d'urine ponctuel (5-10 ml) seront prélevés le lundi. Un seul échantillon de PBMC (10 ml de sang) sera également prélevé lundi (c'est-à-dire 2 semaines depuis la dernière dose de TDF).

Semaine 10 (lundi) : Un seul prélèvement de sang veineux, un prélèvement d'échantillon par piqûre au doigt pour la tache de sang séché et un échantillon d'urine ponctuel (5-10 ml) seront prélevés le lundi. Un seul échantillon de PBMC (10 ml de sang) sera également prélevé le lundi matin (c'est-à-dire 3 semaines depuis la dernière dose de TDF).

Visite de fin d'étude (c'est-à-dire fin de la semaine 10) :

Un seul prélèvement de sang veineux, un prélèvement d'échantillon par piqûre au doigt pour une tache de sang séché et un test d'urine ponctuel (5-10 ml) seront effectués lundi. Un seul échantillon de PBMC (10 ml de sang) sera également prélevé lundi (c'est-à-dire 4 semaines depuis la dernière dose de TDF). Des tests de la fonction rénale et hépatique seront effectués.

À ce stade, les participants auront terminé l'étude et aucune évaluation supplémentaire ne sera effectuée.

Les concentrations de ténofovir seront mesurées à l'aide d'essais validés de chromatographie liquide et de spectrométrie de masse triple quadripôle (LC-MS/MS) à la Faculté des sciences médicales associées de l'Université de Chiang Mai. Les concentrations intracellulaires de ténofovir-diphosphate (TFV-DP) seront déterminées à l'aide d'un test validé basé sur la LC-MS.