Tenofovir-adherentie om PrEP en hiv-therapie snel te begeleiden en te evalueren (TARGET)

Doelstellingen van het onderzoek

Hoofddoel:

• Het bepalen van de farmacokinetiek van tenofovir (TFV) in bloed, urine en plasma bij volwassenen met perfecte, mediane en lage therapietrouw aan tenofovirdisoproxilfumaraat (TDF).

Secundaire doelstellingen

• Om de snelheid van uitwassen van tenofovir in bloed, plasma en urine te bepalen bij deelnemers met verschillende niveaus van TDF-adhesie.
• Om de steady-state concentraties van TFV in bloed en plasma te bepalen bij gecontroleerde niveaus van TDF-adhesie.
• Om de overeenkomst tussen TFV in bloed-, plasma- en urineconcentraties te vergelijken.
• Het bepalen van de intracellulaire tenofovir-difosfaat (TFV-DP) dalconcentraties in monsters van perifere mononucleaire bloedcellen (PBMC) en gedroogde bloedvlekken (DBS) bij volwassenen met perfecte, mediane en lage therapietrouw.
• Om mogelijke concentratiedrempels te identificeren voor de klinische interpretatie van een binaire point-of-care therapietrouwtest voor het meten van TFV (en/of TFV-DP) in relatie tot therapietrouw aan TDF.

Ontwerp:

De onderzoeksopzet is een gerandomiseerde, open-label farmacokinetische studie bij gezonde volwassen vrijwilligers. De studie omvat het verzamelen van klinische gegevens en biologische monsters, en proefpersonen zullen schriftelijke geïnformeerde toestemming geven om deel te nemen. Gezonde volwassen vrijwilligers (hiv-serologie en hepatitis B-oppervlak Ag-negatief) zullen worden ingeschreven. Nadat schriftelijke toestemming is verkregen, wordt het screeningsbezoek uitgevoerd. Het onderzoeksteam zal het telefoonnummer, adres en relevante contactgegevens van elke deelnemer verkrijgen.

Screeningsbezoek:

De deelnemersscreening vindt plaats binnen 14 dagen na inschrijving. Er zal een gedetailleerde demografische en gezondheidsvragenlijst worden afgenomen. Er wordt tien ml bloed afgenomen voor basisbeoordelingen: volledig bloedbeeld, HIV-antilichaamtesten, Hepatitis B-oppervlakte-Ag-testen, nier- en leverfunctietesten en opslag van bloed in de biorepository. De bloed- en chemietests zullen worden gebruikt om proefpersonen uit te sluiten met een abnormale laboratoriumtest op het gebied van neutrofielen, hemoglobine, bloedplaatjes, AST of ALT. Een abnormale test wordt gedefinieerd als Graad ≥3 volgens de DAIDS-tabel voor het beoordelen van de ernst van ongewenste voorvallen bij volwassenen en kinderen, versie 2.0 nov. 2014). De resultaten van het klinisch onderzoek en de basislijnlaboratoriumbeoordelingen zullen worden beoordeeld op opname-/uitsluitingscriteria.

Invoer:

Alle toegangsbezoeken beginnen op maandagochtend. Na grondige informatie over het studieschema te hebben ontvangen, worden proefpersonen die aan de inclusiecriteria voldoen, ingeschreven en gerandomiseerd (1:1:1) in een van de 3 groepen om een ​​gecontroleerd aantal doses Truvada® (Gilead Sciences Inc.) te ontvangen. die tenofovirdisoproxilfumaraat (TDF, 300 mg) en emtricitabine (FTC, 200 mg) gedurende 6 weken bevat. De deelnemer krijgt zorgvuldig uitleg over het doseringsschema, het bezoekschema en mogelijke bijwerkingen van de medicatie.

We zullen in totaal 30 volwassenen inschrijven met evalueerbare PK-monsters (10 per groep). Alle deelnemers starten TDF op de ochtend van het instapbezoek. De behandelingsperiode van 6 weken werd gekozen om ervoor te zorgen dat de tenofovirconcentraties in de verschillende matrices (d.w.z. bloed, plasma, urine, PBMC's) bootsen de verwachte omstandigheden na bij patiënten met chronische dosering van perfecte, mediane en lage therapietrouw. Het schema voor bloed-/urinemonsters is gebaseerd op de gerapporteerde plasmahalfwaardetijd van tenofovir en resultaten van eerdere farmacokinetische onderzoeken.

Tenofovirconcentraties zullen bij elke deelnemer worden bepaald tijdens drie studiefasen (1) aanloopperiode, (2) intensieve PK-bemonstering en (3) uitwasperiode.

Fase 1: Aanloopperiode (start tot 6 weken) Bezoek voorafgaand aan de 2e dosis: Onmiddellijk voorafgaand aan de tweede dosis (d.w.z. Groep 1: 24 dagen na de dosis (dag #2; dinsdagochtend); Groep 2: 48 uur na de dosis (dag #3; woensdagochtend); en Groep 3; 72 uur na de dosis (dag #4; donderdagochtend) keert de proefpersoon terug naar het ziekenhuis. Er wordt één bloedmonster afgenomen (5 ml). Van dit veneuze bloedmonster worden 5 gedroogde bloedspots (50 µL/spot) bereid op een Whatman 903 filterpapierkaart. Het resterende bloed wordt gecentrifugeerd en het plasma wordt opgeslagen. Er wordt een volbloedmonster met een enkele vingerprik afgenomen en op een tweede Whatman 903-filterpapierkaart worden 2 gedroogde bloedspots (50 µL/spot) geprepareerd. Er zal apart 10 ml bloed worden afgenomen om PBMC's te verzamelen voor bepaling van intracellulaire tenofovir-DP-concentraties. Ten slotte wordt er een spot-urinemonster verzameld (5-10 ml). Alle monsters worden bewaard bij -70°C tot -80°C.

Week 3 en 5 (beide maandagochtend, pre-dosis): Er zal een enkele bloedmonster (5 ml) worden afgenomen voorafgaand aan de toediening van de dosis. Van dit veneuze bloedmonster worden 5 gedroogde bloedspots (50 µL/spot) bereid op een Whatman 903 filterpapierkaart. Het resterende bloed wordt gecentrifugeerd en het plasma wordt opgeslagen. Er wordt een volbloedmonster met een enkele vingerprik afgenomen en er worden 2 gedroogde bloedspots (50 µL/spot) bereid op een tweede Whatman 903-filterpapierkaart. Er zal apart 10 ml bloed worden afgenomen om PBMC's te verzamelen voor bepaling van intracellulaire tenofovir-DP-concentraties. Ten slotte wordt er een spot-urinemonster verzameld (5-10 ml). Alle monsters worden bewaard bij -70°C tot -80°C. Er worden nier- en leverfunctietesten uitgevoerd.

Fase 2: Intensieve PK-bemonstering (beginnend op maandagochtend van week 7 gedurende 24 uur) Week 7 Intensief PK-bezoek: Op de maandagochtend van week 7 keren de proefpersonen vroeg in de ochtend terug naar het ziekenhuis. Een medische officier zal een lichamelijk onderzoek uitvoeren en er zal bloed worden afgenomen voor laboratoriumveiligheidsevaluaties (AST en ALT). In navolging van hun normale dagelijkse ochtendschema voor inname van medicijnen, wordt er vóór de dosis een bloedmonster afgenomen en wordt een enkele Truvada®-tablet op een lege maag toegediend (minstens 6 uur nuchter van tevoren). Dit zal de laatste dosis Truvada® zijn voor alle proefpersonen. Veneus bloed (3 ml/tijdstip) wordt 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 en 24 uur na de dosis afgenomen. Op elk tijdstip wordt een DBS van veneus bloed (5 plekken) en een vingerprik (2 plekken) afgenomen. Er worden nier- en leverfunctietesten uitgevoerd.

Urinemonsters worden verzameld vóór de dosis en met tussenpozen van 0-4 uur, 4-8 uur, 8-12 uur en 12-24 uur. Proefpersonen krijgen vóór de dosis nog eens 10 ml bloed afgenomen en PBMC's worden verzameld en bewaard bij -70°C tot -80°C. Na 24 uur wordt de deelnemer ontslagen uit het ziekenhuis. De proefpersoon wordt gevraagd al zijn urine op te vangen tot zijn volgende studiebezoek binnen 24 uur.

Fase 3: Wash-out PK-afname (week 7 tot week 10) Week 7 (woensdag tot zaterdag): Nadat de intensieve PK-afname is voltooid, gaan de deelnemers gedurende de volgende 4 dagen eenmaal per dag terug naar de kliniek (d.w.z. tot de zaterdag van week 7) voor een enkele veneuze bloedafname (5 ml), vingerprikmonsterafname voor gedroogde bloedvlek en een urinemonster (5-10 ml). De proefpersoon zal worden gevraagd al zijn urine op te vangen tot zijn volgende bezoek aan de kliniek.

Week 8 (maandag en donderdag): Een enkele veneuze bloedafname, vingerprikmonsterafname voor opgedroogde bloedvlek en een urinemonster (5-10 ml) worden afgenomen op maandag en donderdag van week 8. Een enkel PBMC-monster (10 ml bloed) wordt afgenomen op maandagochtend van week 8 (d.w.z. 1 week sinds de laatste TDF-dosis).

Week 9 (maandag): Een enkele veneuze bloedafname, vingerprikmonsterafname voor opgedroogde bloedvlek en een vlekurinemonster (5-10 ml) zullen op maandag worden afgenomen. Een enkel PBMC-monster (10 ml bloed) zal ook op maandag worden afgenomen (d.w.z. 2 weken sinds de laatste TDF-dosis).

Week 10 (maandag): Een enkelvoudige veneuze bloedafname, vingerprikmonsterafname voor gedroogde bloedvlek en een vlekurinemonster (5-10 ml) worden op maandag afgenomen. Er zal ook een enkel PBMC-monster (10 ml bloed) worden afgenomen op maandagochtend (d.w.z. 3 weken sinds de laatste TDF-dosis).

Einde studiebezoek (d.w.z. einde week 10):

Een enkele veneuze bloedafname, vingerprikmonsterafname voor gedroogde bloedvlek en een spot-urinetest (5-10 ml) zullen op maandag worden afgenomen. Een enkel PBMC-monster (10 ml bloed) zal ook op maandag worden afgenomen (d.w.z. 4 weken sinds de laatste TDF-dosis). Er worden nier- en leverfunctietesten uitgevoerd.

Op dat moment zullen de deelnemers het onderzoek hebben voltooid en zullen er geen aanvullende evaluaties worden uitgevoerd.

Tenofovirconcentraties zullen worden gemeten met behulp van gevalideerde vloeistofchromatografie-triple quadrupool massaspectrometrie (LC-MS/MS) assays aan de Faculteit der Geassocieerde Medische Wetenschappen van de Universiteit van Chiang Mai. Intracellulaire tenofovir-difosfaat (TFV-DP)-concentraties zullen worden bepaald met behulp van een gevalideerde, op LC-MS gebaseerde assay.