Приверженность тенофовира для быстрого руководства и оценки PrEP и терапии ВИЧ (TARGET)

Цели исследования

Основная цель:

• Определить фармакокинетику тенофовира (TFV) в крови, моче и плазме у взрослых с идеальной, средней и низкой приверженностью лечению тенофовира дизопроксила фумаратом (TDF).

Второстепенные цели

• Определить скорость вымывания тенофовира из крови, плазмы и мочи у участников с разным уровнем приверженности TDF.
• Определить стационарные концентрации TFV в крови и плазме среди контролируемых уровней приверженности TDF.
• Сравнить соответствие между концентрациями TFV в крови, плазме и моче.
• Определить минимальные концентрации внутриклеточного тенофовир-дифосфата (TFV-DP) в мононуклеарных клетках периферической крови (PBMC) и высушенных пятнах крови (DBS) у взрослых с идеальной, средней и низкой приверженностью лечению.
• Определить возможные пороговые значения концентрации для клинической интерпретации бинарного теста на приверженность к месту лечения для измерения TFV (и/или TFV-DP) в отношении приверженности к TDF.

Дизайн:

Дизайн исследования представляет собой рандомизированное открытое фармакокинетическое исследование с участием здоровых взрослых добровольцев. Исследование включает сбор клинических данных и биологических образцов, и субъекты дадут письменное информированное согласие на участие. В исследование будут включены здоровые взрослые добровольцы (серология ВИЧ и отрицательный поверхностный антиген гепатита В). После получения письменного согласия будет проведен скрининговый визит. Исследовательская группа получит номер телефона каждого участника, адрес и соответствующую контактную информацию.

Проверочный визит:

Скрининг участников будет проводиться в течение 14 дней после регистрации. Будет проведена подробная анкета по демографическим данным и состоянию здоровья. Будет взято 10 мл крови для базовых оценок: общего анализа крови, тестирования на антитела к ВИЧ, тестирования поверхностного антигена гепатита В, функциональных тестов почек и печени и хранения крови в биорепозитории. Анализы крови и биохимия будут использоваться для исключения субъектов с любыми аномальными лабораторными тестами, такими как количество нейтрофилов, гемоглобин, тромбоциты, АСТ или АЛТ. Отклонение от нормы теста будет определяться как степень ≥3 по таблице DAIDS для оценки тяжести нежелательных явлений у взрослых и детей, версия 2.0, ноябрь 2014 г.). Результаты клинического обследования и исходных лабораторных оценок будут рассмотрены на предмет критериев включения/исключения.

Вход:

Все входные посещения начнутся в понедельник утром. После получения подробной информации о графике исследования субъекты, отвечающие критериям включения, будут зачислены и рандомизированы (1:1:1) в одну из 3 групп для получения контролируемого количества доз Truvada® (Gilead Sciences Inc.), который содержит тенофовира дизопроксила фумарат (TDF, 300 мг) и эмтрицитабин (FTC, 200 мг) в течение 6 недель. Участнику будет подробно объяснено расписание приема лекарств, график посещений и возможные побочные эффекты лекарств.

Мы зарегистрируем в общей сложности 30 взрослых с поддающимися оценке образцами ПК (по 10 на группу). Все участники начнут TDF утром в день вступительного визита. 6-недельный период лечения был выбран для обеспечения концентрации тенофовира в различных матрицах (т.е. кровь, плазма, моча, РВМС) имитируют ожидаемые состояния у пациентов с хроническим дозированием идеальной, средней и низкой приверженности к лечению. График отбора проб крови/мочи основан на данных о периоде полувыведения тенофовира из плазмы и результатах предыдущих фармакокинетических исследований.

Концентрации тенофовира будут определяться у каждого участника в течение трех фаз исследования (1) начальный период, (2) интенсивный фармакокинетический отбор и (3) период вымывания.

Фаза 1: Вводной период (в начале 6 недель) Посещение перед второй дозой: Непосредственно перед второй дозой (т.е. Группа 1: 24 после введения дозы (день № 2; вторник утром); Группа 2: через 48 часов после введения дозы (день № 3; среда, утро); и группа 3; Через 72 часа после введения дозы (день № 4, утро четверга) субъект вернется в больницу. Будет взят один образец крови (5 мл). Из этого образца венозной крови готовят 5 высушенных пятен крови (50 мкл/пятно) на карточке из фильтровальной бумаги Whatman 903. Оставшуюся кровь центрифугируют, а плазму сохраняют. Будет взят один образец цельной крови из пальца, а на второй карточке из фильтровальной бумаги Whatman 903 будут подготовлены 2 высушенных пятна крови (50 мкл/пятно). Отдельная кровь объемом 10 мл будет взята для сбора РВМС для определения внутриклеточных концентраций тенофовира-DP. Наконец, будет собрана проба мочи (5-10 мл). Все образцы будут храниться при температуре от -70°C до -80°C.

Недели 3 и 5 (обе в понедельник утром, перед введением дозы): перед введением дозы будет взят один образец крови (5 мл). Из этого образца венозной крови готовят 5 высушенных пятен крови (50 мкл/пятно) на карточке из фильтровальной бумаги Whatman 903. Оставшуюся кровь центрифугируют, а плазму сохраняют. Будет взят один образец цельной крови из пальца и приготовлены 2 высушенных капли крови (50 мкл/пятно) на второй карточке из фильтровальной бумаги Whatman 903. Отдельная кровь объемом 10 мл будет взята для сбора РВМС для определения внутриклеточных концентраций тенофовира-DP. Наконец, будет собрана проба мочи (5-10 мл). Все образцы будут храниться при температуре от -70°C до -80°C. Будут выполнены тесты функции почек и печени.

Фаза 2: Интенсивный отбор проб ФК (начиная с утра понедельника недели 7 в течение 24 часов) Неделя 7 Интенсивный визит ФК: В понедельник утром недели 7 испытуемые вернутся в больницу рано утром. Медицинский работник проведет медицинский осмотр и возьмет кровь для лабораторных оценок безопасности (АСТ и АЛТ). Следуя обычному утреннему ежедневному графику приема лекарств, будет взят образец крови перед введением дозы, и одна таблетка Truvada® будет введена натощак (по крайней мере, за 6 часов до этого). Это будет последняя доза Truvada® для всех испытуемых. Венозную кровь (3 мл/момент времени) собирают через 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и 24 часа после введения дозы. В каждый момент времени будут собирать DBS венозной крови (5 точек) и палец (2 точки). Будут выполнены тесты функции почек и печени.

Образцы мочи будут собираться перед введением дозы и с интервалами 0–4 часа, 4–8 часов, 8–12 часов и 12–24 часов. У субъектов будут взяты дополнительные 10 мл крови перед введением дозы, а РВМС будут собраны и сохранены при температуре от -70°C до -80°C. Через 24 часа участник будет выписан из больницы. Субъекту будет предложено собрать всю мочу до следующего исследовательского визита через 24 часа.

Фаза 3: Смывной ФК-отбор (с 7-й по 10-ю недели) Неделя 7 (со среды по субботу): после завершения интенсивного ФК-отбора участники будут возвращаться в клинику один раз в день в течение следующих 4 дней (т. е. до субботы). 7-й недели) для однократного забора венозной крови (5 мл), взятия пробы из пальца для взятия высушенной капли крови и взятия пробы мочи (5-10 мл). Субъекту будет предложено собрать всю мочу до следующего визита в клинику.

Неделя 8 (понедельник и четверг): однократный забор венозной крови, взятие пробы из пальца для выявления высохшей капли крови и выборка мочи (5-10 мл) будут взяты в понедельник и четверг недели 8. Один образец РВМС (10 мл крови) будет взят в понедельник утром на 8-й неделе (т. е. через 1 неделю после последней дозы TDF).

Неделя 9 (понедельник): в понедельник будет взят однократный забор венозной крови, взятие пробы из пальца на высохшую каплю крови и проба мочи (5–10 мл). Один образец РВМС (10 мл крови) также будет собран в понедельник (т.е. через 2 недели после последней дозы TDF).

Неделя 10 (понедельник): в понедельник будет проведен однократный забор венозной крови, взятие пробы из пальца для выявления сухой капли крови и выборка мочи (5–10 мл). Один образец РВМС (10 мл крови) также будет взят в понедельник утром (т.е. через 3 недели после последней дозы TDF).

Окончание учебного визита (т.е. конец 10-й недели):

В понедельник будет проведен однократный забор венозной крови, взятие образца из пальца для выявления сухой капли крови и анализ мочи (5-10 мл). Один образец РВМС (10 мл крови) также будет собран в понедельник (т.е. через 4 недели после последней дозы TDF). Будут проведены тесты функции почек и печени.

К этому времени участники завершат исследование, и дополнительные оценки проводиться не будут.

Концентрации тенофовира будут измеряться с использованием утвержденных анализов жидкостной хроматографии-тройной квадрупольной масс-спектрометрии (ЖХ-МС/МС) на факультете ассоциированных медицинских наук Университета Чиангмая. Внутриклеточные концентрации тенофовир-дифосфата (TFV-DP) будут определяться с использованием валидированного анализа на основе ЖХ-МС.