A tenofovir ragaszkodása a PrEP- és HIV-terápia gyors irányításához és értékeléséhez (TARGET)

A tanulmány céljai

Az elsődleges célkítűzés:

• A tenofovir (TFV) farmakokinetikájának meghatározása vérben, vizeletben és plazmában olyan felnőtteknél, akiknél a tenofovir-dizoproxil-fumaráthoz (TDF) tökéletes, közepes és alacsony adherencia.

Másodlagos célok

• A tenofovir vérből, plazmából és vizeletből történő kiürülésének mértékének meghatározása a különböző szintű TDF-adherenciával rendelkező résztvevők körében.
• A TFV steady-state koncentrációjának meghatározása a vérben és a plazmában a TDF adherencia kontrollált szintjei között.
• Összehasonlítani a TFV közötti egyezést a vér, a plazma és a vizelet koncentrációjában.
• Az intracelluláris tenofovir-difoszfát (TFV-DP) legalacsonyabb koncentrációjának meghatározása perifériás vér mononukleáris sejtekben (PBMC) és szárított vérfolt (DBS) mintákban tökéletes, medián és alacsony gyógyszeradherencia mellett.
• Lehetséges koncentrációs küszöbértékek azonosítása a TFV (és/vagy TFV-DP) mérésére szolgáló, a TDF-hez való ragaszkodással összefüggésben végzett bináris gondozási adherencia teszt klinikai értelmezéséhez.

Tervezés:

A vizsgálat terve egy randomizált, nyílt elrendezésű farmakokinetikai vizsgálat egészséges felnőtt önkénteseken. A vizsgálat klinikai adatok és biológiai minták gyűjtését foglalja magában, és az alanyok írásos beleegyezését adják a részvételhez. Egészséges felnőtt önkénteseket (HIV szerológia és hepatitis B felszíni Ag negatív) vesznek fel. Az írásos hozzájárulás megszerzése után a szűrővizsgálatra kerül sor. A vizsgálati csoport minden résztvevő telefonszámát, címét és vonatkozó elérhetőségeit megkapja.

Szűrőlátogatás:

A résztvevők szűrésére a jelentkezést követő 14 napon belül kerül sor. Részletes demográfiai és egészségügyi háttérkérdőívet adunk ki. Tíz ml vért vesznek a kiindulási értékeléshez: teljes vérkép, HIV-ellenanyag-vizsgálat, hepatitis B felszíni Ag-teszt, vese- és májfunkciós tesztek, valamint vér tárolása a biorepository-ban. A vér- és kémiai teszteket arra használják, hogy kizárják azokat az alanyokat, akiknél a neutrofilszám, a hemoglobin, a vérlemezkék, az AST vagy az ALT kóros laboratóriumi vizsgálata van. A kóros tesztet ≥3-as fokozatnak minősíti a DAIDS táblázat a felnőttkori és gyermekgyógyászati ​​mellékhatások súlyosságának osztályozására, 2.0-s verzió, 2014. november). A klinikai vizsgálat és a kiindulási laboratóriumi értékelések eredményeit felülvizsgálják a felvételi/kizárási kritériumok szempontjából.

Belépés:

Minden belépő látogatás hétfő reggel kezdődik. A vizsgálati ütemtervvel kapcsolatos alapos információk megszerzése után a felvételi kritériumoknak megfelelő alanyokat besorolják és randomizálják (1:1:1) a 3 csoport egyikébe, hogy kontrollált számú adag Truvada®-t (Gilead Sciences Inc.) kapjanak. amely tenofovir-dizoproxil-fumarátot (TDF, 300 mg) és emtricitabint (FTC, 200 mg) tartalmaz 6 hétig. A résztvevőt alaposan elmagyarázzák a gyógyszeradagolási ütemtervükről, a látogatási ütemtervről és a gyógyszeres kezelés lehetséges mellékhatásairól.

Összesen 30 felnőttet veszünk fel értékelhető PK mintákkal (csoportonként 10). Minden résztvevő megkezdi a TDF-et az Entry látogatás reggelén. A 6 hetes kezelési időszakot azért választották, hogy biztosítsák a tenofovir koncentrációját a különböző mátrixokban (pl. vér, plazma, vizelet, PBMC-k) utánozzák az elvárt állapotokat olyan betegeknél, akiknek krónikus adagolása tökéletes, medián és alacsony gyógyszeradherencia mellett. A vér/vizelet mintavételi ütemterv a tenofovir plazma felezési idején és a korábbi farmakokinetikai vizsgálatok eredményein alapul.

A tenofovir-koncentrációkat minden résztvevőnél három vizsgálati fázisban határozzák meg (1) bevezető periódus, (2) intenzív PK mintavétel és (3) kimosási időszak.

1. fázis: Bevezető időszak (6 hétig) Látogatás a 2. adag előtt: Közvetlenül a második adag előtt (pl. 1. csoport: 24. az adagolás után (2. nap; kedd reggel); 2. csoport: 48 órával az adagolás után (3. nap; szerda reggel); és 3. csoport; Az adagolás után 72 órával (4. nap; csütörtök reggel) az alany visszatér a kórházba. Egyetlen vérmintát vesznek (5 ml). Ebből a vénás vérmintából 5 szárított vérfoltot (50 µl/folt) készítünk egy Whatman 903 szűrőpapír kártyán. A megmaradt vért centrifugáljuk, és a plazmát tároljuk. Egyetlen ujjbegyű teljes vérmintát veszünk, és egy második Whatman 903 szűrőpapír kártyán 2 szárított vérfoltot (50 µl/folt) készítünk. Külön 10 ml vért vesznek a PBMC-k összegyűjtéséhez az intracelluláris tenofovir-DP koncentrációjának meghatározásához. Végül egy pontszerű vizeletmintát veszünk (5-10 ml). Minden mintát -70°C és -80°C közötti hőmérsékleten kell tárolni.

3. és 5. hét (mindkettő hétfő reggel, adagolás előtt): Egyetlen vérmintát vesznek (5 ml) az adag beadása előtt. Ebből a vénás vérmintából 5 szárított vérfoltot (50 µl/folt) készítünk egy Whatman 903 szűrőpapír kártyán. A megmaradt vért centrifugáljuk, és a plazmát tároljuk. Egyetlen ujjbegyű teljes vérmintát veszünk, és 2 szárított vérfoltot (50 µL/folt) készítünk egy második Whatman 903 szűrőpapír kártyán. Külön 10 ml vért vesznek a PBMC-k összegyűjtéséhez az intracelluláris tenofovir-DP koncentrációjának meghatározásához. Végül egy pontszerű vizeletmintát veszünk (5-10 ml). Minden mintát -70°C és -80°C közötti hőmérsékleten kell tárolni. Vese- és májfunkciós vizsgálatokat végeznek.

2. fázis: Intenzív PK mintavétel (a 7. hét hétfő reggelétől 24 órán keresztül) 7. hét Intenzív PK vizit: A 7. hét hétfő reggelén az alanyok a kora reggeli órákban térnek vissza a kórházba. Az orvos fizikális vizsgálatot végez, és vért vesznek a laboratóriumi biztonsági értékelésekhez (AST és ALT). A szokásos reggeli napi gyógyszerbeviteli ütemterv szerint az adagolás előtt vérmintát vesznek, és egyetlen Truvada® tablettát éhgyomorra (előtte legalább 6 órás koplalással) adnak be. Ez lesz az utolsó adag Truvada® minden alany számára. A vénás vért (3 ml/időpont) 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 és 24 órával az adagolás után gyűjtik. Minden időpontban vénás vér DBS-t (5 folt) és ujjbegyet (2 folt) gyűjtenek. Vese- és májfunkciós vizsgálatokat végeznek.

A vizeletmintákat az adagolás előtt és 0-4 órás, 4-8 órás, 8-12 órás és 12-24 órás időközönként veszik. Az alanyoknak további 10 ml vért vesznek az adagolás előtt, és a PBMC-ket összegyűjtik és -70 °C és -80 °C közötti hőmérsékleten tárolják. 24 óra elteltével a résztvevőt kiengedik a kórházból. Az alanyokat felkérik, hogy gyűjtsék össze az összes vizeletüket a 24 órán belüli következő tanulmányi látogatásukig.

3. fázis: Kimosó PK mintavétel (7. héttől 10. hétig) 7. hét (szerdától szombatig): Az intenzív PK mintavétel befejezése után a résztvevők a következő 4 napban (azaz szombatig) naponta egyszer visszatérnek a klinikára. 7. hét) egyszeri vénás vérvételhez (5 ml), ujjszúrásos mintavételhez a kiszáradt vérfolthoz és egy pontszerű vizeletmintához (5-10 ml). Az alanynak meg kell gyűjtenie az összes vizeletét a következő klinikai látogatásig.

8. hét (hétfőn és csütörtökön): A 8. hét hétfőjén és csütörtökén egyszeri vénás vérvétel, ujjlenyomat-mintavétel a kiszáradt vérfoltra, valamint egy pontszerű vizeletminta (5-10 ml) kerül levételre. Egyetlen PBMC-mintát (10 ml vért) veszünk a 8. hét hétfő reggelén (azaz 1 hét telt el az utolsó TDF-adag óta).

9. hét (hétfő): Hétfőn egyszeri vénás vérvétel, ujjlenyomat-mintavétel a kiszáradt vérfolthoz, valamint pontszerű vizeletminta (5-10 ml). Egyetlen PBMC-mintát (10 ml vért) is gyűjtenek hétfőn (azaz 2 héttel az utolsó TDF-adag óta).

10. hét (hétfő): Hétfőn egyszeri vénás vérvétel, ujjlenyomat-mintavétel a kiszáradt vérfolthoz, valamint pontszerű vizeletminta (5-10 ml). Egyetlen PBMC-mintát (10 ml vért) is gyűjtenek hétfő reggel (azaz 3 héttel az utolsó TDF-adag óta).

Tanulmányi látogatás vége (pl. 10. hét vége):

Hétfőn egyszeri vénás vérvétel, ujjlenyomat-mintavétel a kiszáradt vérfoltra, valamint pontszerű vizeletvizsgálat (5-10 ml) történik hétfőn. Egyetlen PBMC-mintát (10 ml vért) is gyűjtenek hétfőn (azaz 4 héttel az utolsó TDF-adag óta). Vese- és májfunkciós vizsgálatokat végeznek.

Ekkor a résztvevők befejezték a vizsgálatot, és további értékelésekre nem kerül sor.

A tenofovir koncentrációkat validált folyadékkromatográfiás-hármas kvadrupólus tömegspektrometriás (LC-MS/MS) vizsgálatokkal mérik a Chiang Mai Egyetem Társult Orvostudományi Karán. Az intracelluláris tenofovir-difoszfát (TFV-DP) koncentrációját validált LC-MS alapú assay segítségével határozzuk meg.