替诺福韦坚持快速指导和评估 PrEP 和 HIV 治疗 (TARGET)

研究目的

主要目标：

• 确定富马酸替诺福韦二吡呋酯(TDF) 完全依从性、中等依从性和低依从性成人血液、尿液和血浆中替诺福韦(TFV) 的药代动力学。

次要目标

• 确定不同 TDF 依从性水平的参与者血液、血浆和尿液中替诺福韦的清除率。
• 确定受控水平的 TDF 依从性中血液和血浆中 TFV 的稳态浓度。
• 比较 TFV 在血液、血浆和尿液浓度之间的一致性。
• 确定完全、中位和低药物依从性成人外周血单核细胞 (PBMC) 和干血斑 (DBS) 样本中的细胞内替诺福韦二磷酸 (TFV-DP) 谷浓度。
• 确定用于测量与 TDF 依从性相关的 TFV（和/或 TFV-DP）的二元床旁依从性测试的临床解释的可能浓度阈值。

设计：

该研究设计是一项在健康成年志愿者中进行的随机、开放标签药代动力学研究。 该研究涉及收集临床数据和生物标本，受试者将提供书面知情同意书以参与。 将招募健康的成年志愿者（HIV 血清学和乙型肝炎表面 Ag 阴性）。 一旦获得书面同意，将进行筛选访问。 研究小组将获得每个参与者的电话号码、地址和相关联系信息。

放映访问：

参与者筛选将在注册后 14 天内进行。 将进行详细的背景人口统计和健康调查问卷。 将抽取 10 mL 血液进行基线评估：全血细胞计数、HIV 抗体检测、乙型肝炎表面 Ag 检测、肾功能和肝功能检测以及生物储存库中的血液储存。 血液和化学测试将用于排除在中性粒细胞计数、血红蛋白、血小板、AST 或 ALT 中有任何异常实验室测试的受试者。 DAIDS 成人和儿童不良事件严重程度分级表（2014 年 11 月 2.0 版）将异常测试定义为 ≥ 3 级）。 临床检查和基线实验室评估的结果将根据纳入/排除标准进行审查。

入口：

所有入境访问都将从周一早上开始。 在收到有关研究计划的深入信息后，符合纳入标准的受试者将被纳入并随机分配 (1:1:1) 到 3 组中的一组，以接受受控剂量的 Truvada®（Gilead Sciences Inc.），其中包含富马酸替诺福韦二吡呋酯（TDF，300 毫克）和恩曲他滨（FTC，200 毫克），为期 6 周。 参与者将被仔细解释他们的药物给药时间表、访问时间表和潜在的药物副作用。

我们将招募总共 30 名具有可评估 PK 样本的成年人（每组 10 名）。 所有参与者都将在入境访问的早上开始 TDF。 选择 6 周治疗期是为了确保替诺福韦在不同基质（即 血液、血浆、尿液、PBMCs）模拟慢性给药完全、中等和低药物依从性患者的预期情况。 血液/尿液采样时间表基于报告的替诺福韦血浆半衰期和先前 PK 研究的结果。

替诺福韦浓度将在三个研究阶段 (1) 导入期、(2) 强化 PK 取样和 (3) 清除期确定每个参与者的浓度。

第 1 阶段：导入期（进入 6 周） 第 2 剂之前的访视：紧接在第 2 剂之前（即 第 1 组：给药后 24 天（第 2 天；星期二早上）；第 2 组：给药后 48 小时（第 3 天；周三上午）；第 3 组；给药后 72 小时（第 4 天；星期四早上），受试者将返回医院。 将抽取一份血样 (5 mL)。 从该静脉血样中，将在 Whatman 903 滤纸卡上制备 5 个干血点（50 µL/点）。 剩余的血液将被离心并储存血浆。 将收集单个指尖全血样本，并在第二张 Whatman 903 滤纸卡上制备 2 个干血点（50 µL/点）。 将单独抽取 10 mL 血液以收集 PBMC，用于测定细胞内替诺福韦-DP 浓度。 最后，将收集点尿样（5-10 毫升）。 所有样品将储存在 -70°C 至 -80°C。

第 3 周和第 5 周（星期一早上，给药前）：在给药前抽取一份血样 (5 mL)。 从该静脉血样中，将在 Whatman 903 滤纸卡上制备 5 个干血点（50 µL/点）。 剩余的血液将被离心并储存血浆。 将收集单个指尖全血样本，并在第二张 Whatman 903 滤纸卡上制备 2 个干血点（50 µL/点）。 将单独抽取 10 mL 血液以收集 PBMC，用于测定细胞内替诺福韦-DP 浓度。 最后，将收集点尿样（5-10 毫升）。 所有样品将储存在 -70°C 至 -80°C。 将进行肾功能和肝功能检查。

第 2 阶段：强化 PK 采样（从第 7 周的星期一早上开始，持续 24 小时） 第 7 周强化 PK 访问：在第 7 周的星期一早上，受试者将在清晨返回医院。 医务人员将进行身体检查，并抽血进行实验室安全评估（AST 和 ALT）。 按照他们每天早上正常的药物摄入时间表，将抽取服药前的血样，并在空腹时服用一片 Truvada® 药片（至少提前 6 小时禁食）。 这将是所有受试者的最后一剂 Truvada®。 将在给药后 1、2、4、6、8、10、12 和 24 小时收集静脉血（3 mL/时间点）。 在每个时间点，将收集静脉血 DBS（5 个点）和指尖血（2 个点）。 将进行肾功能和肝功能检查。

将在给药前和在 0-4 小时、4-8 小时、8-12 小时和 12-24 小时的间隔内收集尿样。 受试者将在给药前额外抽取 10 mL 血液，并将收集 PBMC 并将其储存在 -70°C 至 -80°C 下。 24 小时后，参与者将出院。 受试者将被要求收集他们所有的尿液，直到他们在 24 小时内进行下一次研究访问。

第 3 阶段：清除 PK 采样（第 7 周至第 10 周） 第 7 周（周三至周六）：强化 PK 采样完成后，参与者将在接下来的 4 天（即直到周六第 7 周）用于单次静脉血抽取（5 毫升）、干血点指尖样本采集和尿点样本（5-10 毫升）。 受试者将被要求收集他们所有的尿液，直到他们下次就诊。

第 8 周（周一和周四）：将在第 8 周的周一和周四抽取单次静脉血、干血点指尖样本采集和尿点样本（5-10 毫升）。 单个 PBMC 样本（10 mL 血液）将在第 8 周的星期一早上（即自上次 TDF 给药后 1 周）采集。

第 9 周（星期一）：星期一将抽取单次静脉血、干血点指尖样本和尿点样本（5-10 毫升）。 周一（即自上次 TDF 给药后 2 周）也将收集单个 PBMC 样本（10 mL 血液）。

第 10 周（星期一）：星期一将抽取单次静脉血、干血点指尖样本和尿点样本（5-10 毫升）。 周一早上（即自上次 TDF 给药后 3 周）也将收集单个 PBMC 样本（10 mL 血液）。

研究访问结束（即 第 10 周结束）：

周一将进行单次静脉血抽取、干血点指尖样本采集和尿液点检（5-10 毫升）。 周一（即自上次 TDF 给药后 4 周）也将收集单个 PBMC 样本（10 mL 血液）。 将进行肾脏和肝脏功能测试。

此时参与者将完成研究，不会进行额外的评估。

清迈大学相关医学科学学院将使用经过验证的液相色谱-三重四极杆质谱 (LC-MS/MS) 测定法测量替诺福韦浓度。 细胞内替诺福韦二磷酸 (TFV-DP) 浓度将使用经过验证的基于 LC-MS 的测定法来确定。