Studie vaskulární funkce před vs po vykouření e-cigarety ve srovnání s normální cigaretou (ECIG-8)

Celkovým cílem této studie je porovnat krátkodobé vaskulární účinky kouření e-cigarety oproti kouření konvenční tabákové cigarety in vivo a in vitro.

Konkrétní cíle jsou následující:

i. Vyhodnotit účinky používání e-cigarety a konvenční hořlavé cigarety (CCC) na mikrovaskulární a makrovaskulární endoteliální funkci a ztuhlost u zdravých kuřáků.

ii. Stanovit cirkulující markery endoteliální funkce v reakci na kouření e-cigarety a CCC.

iii. Zkoumat vaskulární účinky použití e-cigarety a CCC na molekulární úrovni vystavením endoteliálních buněk stimulovanému séru z intervenční studie.

Primární cíl a parametr výsledku:

Primárním cílem této studie iniciované výzkumným pracovníkem (IIT) je vyhodnotit krátkodobý účinek bafání e-cigarety na funkci konduitové tepny ve srovnání s kouřením CCC u zdravých mužských dlouhodobých kuřáků.

Relativní změna průměru brachiální arterie v reakci na reaktivní hyperémii (průtokem zprostředkovaná vazodilatace), validovaný zástupný marker endoteliální funkce konduitu, bude použita jako primární cílový bod. FMD [%] je definováno jako (průměr pažní 60 s po vyfouknutí manžety [mm] - výchozí průměr pažní [mm]) x 100 / výchozí průměr pažní [mm].

Primárním měřítkem výsledku je absolutní rozdíl slintavky a kulhavky po e-cigaretě a CCC.

Sekundární cíl a parametr výsledku:

Sekundárními cíli je vyhodnotit in vivo endoteliální funkci v jiných cévních řečištích, zejména v mikrocirkulaci a systémové cirkulaci, stejně jako další aspekty vaskulární funkce, jako je tuhost arteriálního stromu. Endoteliální dysfunkce, klíčový jev rozvoje aterosklerózy, je charakterizována příslušným zvýšením nebo snížením molekul odvozených z endotelu a změnami v upstream signálních drahách, které řídí syntézu a biologickou dostupnost těchto molekul odvozených z endotelu. Analýza cirkulujících biomarkerů funkce endotelu a studie exprese enzymů zapojených do aktivace endotelu pomohou přesně charakterizovat možné účinky expozice e-cigaretám na funkci endotelu in vivo.

Sekundární koncové body jsou:

• Augmentační index v reakci na salbutamol (%) jako náhrada globální endoteliální funkce ve vztahu k jeho reakci na glyceryltrinitrát (%)
• Index augmentace (%) jako ukazatel odrazu a tuhosti pulzní vlny
• Retinální arteriální a venózní průměr v reakci na stimulaci blikajícím světlem (%) jako náhrada mikrovaskulární endoteliální funkce
• Centrální retinální arteriální a venózní ekvivalent a poměr arteriolární a venulární jako indikátory generalizovaného arteriálního zúžení
• Cirkulující biomarkery endoteliální funkce a aktivace (Endothelin-1; BH4/BH2) Sekundárními výslednými ukazateli jsou absolutní rozdíly sekundárních koncových bodů mezi e-cigaretou a CCC (viz část 13.4.2).

Funkční in vitro testy a molekulární analýzy:

• mRNA a proteinová exprese endoteliální syntázy oxidu dusnatého (eNOS), cílových genů NRF2 HMOX1, NQO1 a adhezních molekul (ICAM1, VCAM1, SELE, CCL2).
• Primární kultury endoteliálních buněk lidské pupečníkové žíly budou stimulovány sérem lidských subjektů (odebraným před nebo po vykouření jedné cigarety nebo e-cigarety) a bude stanoven potenciál hojení ran.

Terciární cíl a parametr výsledku:

Terciárním cílem je posoudit rozdíly ve funkci cév mezi kuřáky a nikdy nekuřáky. Terciární koncové body jsou výchozí hodnoty primárních a sekundárních koncových bodů.