Studio della funzione vascolare prima e dopo aver fumato una sigaretta elettronica rispetto a una sigaretta normale (ECIG-8)

Lo scopo generale di questo studio è confrontare gli effetti vascolari a breve termine del fumo di una sigaretta elettronica rispetto al fumo di una sigaretta di tabacco convenzionale in vivo e in vitro.

Gli obiettivi specifici sono i seguenti:

io. Per valutare gli effetti della sigaretta elettronica e dell'uso di sigarette combustibili convenzionali (CCC) sulla funzione endoteliale microvascolare e macrovascolare e sulla rigidità nei fumatori sani.

ii. Per valutare i marcatori circolanti della funzione endoteliale in risposta al fumo di sigaretta elettronica e CCC.

iii. Per studiare gli effetti vascolari della sigaretta elettronica e dell'uso di CCC a livello molecolare esponendo le cellule endoteliali con siero stimolato dallo studio di intervento.

Obiettivo primario e parametro di risultato:

L'obiettivo principale di questo studio avviato dall'investigatore (IIT) è valutare l'effetto a breve termine dello sbuffo di sigaretta elettronica sulla funzione dell'arteria del condotto rispetto al fumo di un CCC nei fumatori maschi sani a lungo termine.

La variazione relativa del diametro dell'arteria brachiale in risposta all'iperemia reattiva (vasodilatazione flusso-mediata), un marcatore surrogato convalidato della funzione endoteliale del condotto, sarà utilizzato come endpoint primario. L'afta epizootica [%] è definita come (diametro brachiale 60 s dopo lo sgonfiamento della cuffia [mm] - diametro brachiale di riferimento [mm]) x 100 / diametro brachiale di riferimento [mm].

La misura dell'esito primario è la differenza assoluta di afta epizootica dopo sigaretta elettronica e CCC.

Obiettivo secondario e parametro di risultato:

Gli obiettivi secondari sono valutare la funzione endoteliale in vivo in altri letti vascolari, in particolare nel microcircolo e nella circolazione sistemica, nonché altri aspetti della funzione vascolare come la rigidità dell'albero arterioso. La disfunzione endoteliale, un evento chiave dello sviluppo dell'aterosclerosi, è caratterizzata da un rispettivo aumento o diminuzione delle molecole derivate dall'endotelio e dai cambiamenti nelle vie di segnalazione a monte che controllano la sintesi e la biodisponibilità di queste molecole derivate dall'endotelio. L'analisi dei biomarcatori circolanti della funzione endoteliale e gli studi di espressione degli enzimi coinvolti nell'attivazione endoteliale aiuteranno a caratterizzare da vicino i possibili effetti dell'esposizione alla sigaretta elettronica sulla funzione endoteliale in vivo.

Gli endpoint secondari sono:

• Indice di aumento in risposta al salbutamolo (%) come surrogato della funzione endoteliale globale in relazione alla sua risposta al trinitrato di glicerile (%)
• Indice di aumento (%) come marker di riflessione e rigidità dell'onda del polso
• Diametro arterioso e venoso retinico in risposta alla stimolazione della luce intermittente (%) come surrogato della funzione endoteliale microvascolare
• Equivalente arterioso e venoso retinico centrale e rapporto arteriolare-venulare come indicatori di restringimento arterioso generalizzato
• Biomarcatori circolanti della funzione endoteliale e dell'attivazione (Endothelin-1; BH4/BH2) Le misure di outcome secondari sono le differenze assolute degli endpoint secondari tra sigaretta elettronica e CCC (fare riferimento alla sezione 13.4.2).

Saggi funzionali in vitro e analisi molecolari:

• Espressione di mRNA e proteine ​​dell'ossido nitrico sintasi endoteliale (eNOS), geni bersaglio NRF2 HMOX1, NQO1 e molecole di adesione (ICAM1, VCAM1, SELE, CCL2).
• Le colture primarie di cellule endoteliali della vena ombelicale umana saranno stimolate con siero di soggetti umani (campionato prima o dopo aver fumato una sigaretta o una sigaretta elettronica) e sarà determinato il potenziale di guarigione della ferita.

Obiettivo terziario e parametro di risultato:

L'obiettivo terziario è quello di valutare le differenze nella funzione vascolare tra fumatori e non fumatori. Gli endpoint terziari sono i valori di riferimento degli endpoint primari e secondari.