Regulación de la secreción de lipoproteínas intestinales y hepáticas por resveratrol

Los sujetos recibirán resveratrol (Transmax 1 comprimido de 500 mg dos veces al día durante una semana seguido de 2 x 500 mg dos veces al día durante la segunda semana (Biotivia Longevity Biologicals, Nueva York, NY, EE. UU.) o placebo y se les recomendará que comiencen a tomar los comprimidos 14 días antes de la primer estudio de cinética de lipoproteínas.

Para el estudio de cinética de lipoproteínas, los sujetos recibirán una infusión de leucina enriquecida con isótopos estables y un bolo de glicerol enriquecido con isótopos estables para medir las tasas de síntesis de ácidos grasos, apolipoproteínas y triglicéridos, respectivamente. Esta metodología de enriquecimiento de isótopos estables in vivo ha sido ampliamente establecida y utilizada por investigadores de todo el mundo durante más de 30 años para examinar el metabolismo de varios metabolitos en humanos.

El primer día de la admisión de 2 días en el hospital para el estudio de cinética de lipoproteínas, después de un ayuno nocturno, aproximadamente al mediodía del día 1 del estudio, el sujeto será ingresado en el hospital y se le extraerá una muestra de sangre en ayunas de 30 ml para el análisis de glucosa plasmática, colesterol plasmático total, colesterol LDL, colesterol HDL, triglicéridos (TG), ácidos grasos libres (FFA), insulina, citoquinas, enriquecimiento de isótopos estables y un análisis más detallado de la composición de lipoproteínas ricas en triglicéridos (TRL) (lípidos y apolipoproteínas). contenido). Al sujeto se le permitirá comer comidas regulares durante el día, pero ayunará durante la noche después de las 7:00 p. m.

A las 4 am, el sujeto comenzará a ingerir la primera de 17 alícuotas pequeñas idénticas por hora de una fórmula líquida llamada Great Shake Plus (Hormel), cada dosis por hora equivale a 1/17 de su requerimiento calórico diario estimado calculado por la fórmula de Harris-Benedict. Aparte del batido, el sujeto no comerá hasta el final del estudio a las 7 p. m. de esa noche. Esto proporcionará un estado de alimentación estable para la evaluación posterior de la cinética de recambio de lipoproteínas. A las 7 am, se insertarán 2 iv en una vena superficial de cada antebrazo, uno para infusión y otro para muestreo.

A las 7 a. m. (los investigadores se referirán a este momento como 0 h del estudio de renovación de lipoproteínas), comenzará el estudio de renovación de lipoproteínas. Se administrará un bolo iv de glicerol deuterado (d5-glicerol, 75 micromol/kg), seguido de una infusión constante preparada de leucina deuterada (L-[5,5,5-2H3]-leucina; d3-leucina, 98 %, Cambridge Isotope Laboratories, Andover, MA, EE. UU. (Bolo de 10 micromol/kg seguido de 10 micromol/kg/h durante 10 horas). Las muestras de sangre se recolectarán antes y en intervalos de tiempo regulares durante 10 horas después del bolo iv de d3-glicerol (para el enriquecimiento de palmitato de triglicéridos 13C para evaluar la lipogénesis de novo) y el comienzo de la infusión constante de d3-leucina (para la evaluación de cinética de las lipoproteínas). La sensibilidad a la insulina se evaluará mediante el cálculo de HOMA-IR.