Metabotyypit flavan-3-olien metaboliittien erittymisessä virtsaan: "Metanolit" (Metanols)

Tutkimus on kerta-annos, osittain satunnaistettu, ristikkäinen suunnittelu, jossa on 4 peräkkäistä hoitoa. Tutkimus sisältää 4 vaihetta, joissa jokainen vapaaehtoinen kuluttaa tietyn annoksen yhtä tutkimukseen valituista tuotteista. Jokainen vapaaehtoinen kuluttaa jokaisen tuotteen kerran, yhteensä 4 eri kertaa. Tuotteet ovat elintarvikeuutetta, joka koostuu sikurien käymiskelpoisista kuitujakeista (inuliini) ja sen jälkeen kolmesta erityyppistä flavan-3-oleista runsaasti sisältävää elintarvikeuutetta, jotka kulutetaan kolmessa eri yhteydessä ja satunnaisessa järjestyksessä.

Vapaaehtoisia pyydetään toimittamaan kerran ensimmäisestä päivittäisestä ulostuksesta otettu ulostenäyte, josta analysoidaan ulosteen mikrobiston koostumus. Heille tehdään myös hengityskaasujen päiväprofiili, jotta voidaan arvioida inuliinin kulutuksen vaikutus paksusuolen käymiseen ja hengityskaasujen tuotantoon. Nämä kaksi analyysiä (ulostenäytteiden mikrobikoostumus ja hengityskaasujen tuotanto) auttavat karakterisoimaan vapaaehtoisten suoliston mikrobiston koostumusta ja toiminnallisuutta. Tarkemmin sanottuna 48 tuntia ennen uloste- ja hengitysnäytteiden keräämistä vapaaehtoisia pyydetään välttämään korkeaa kuitu- ja (poly)fenolipitoisuutta (ruokavaliorajoitusten noudattamisen helpottamiseksi luettelo sallituista ja kielletyistä elintarvikkeista toimitetaan. Ruokavalion noudattamisen tarkistamiseksi käytetään kutakin näytteenottopäivää edeltäneiden 2 päivän 2 päivän ruokavaliotietoja.

Ensimmäisen hoidon aamuna vapaaehtoiset saapuvat yön paaston jälkeen ja toimittavat tuoreen ulostenäytteen. Tämän jälkeen otetaan yksi näyte pakotetusta uloshengityksen lopusta alveolaarisesta ilmasta. Sen jälkeen heille tarjotaan standardoitu testiaamiainen, joka koostuu 12 g:sta sikuriinuliinifraktioiden ruokauutetta liuotettuna 250 g:aan veteen ja käymiskykyisestä kuiduttomasta, (poly)fenolittomasta, ravitsemuksellisesti tasapainoisesta kiinteästä aterioista. Heitä pyydetään nauttimaan koko aamiainen 15 minuutin kuluessa. Tuntivälein 11 tunnin ajan aamiaisen jälkeen kerätään uloshengityksen pakotettuja näytteitä alveolaarisesta ilmasta. Koko kokeen aikana kaikki koehenkilöt pidättäytyvät tupakoimasta, nukkumasta, harjoittelemasta ja syömästä muita kuin henkilökunnan tarjoamia ruokia tai aterioita. Viisi tuntia testin aloittamisen jälkeen vapaaehtoiset syövät käymiskelpoisen kuiduttoman, ravitsemuksellisesti tasapainotetun standardoidun lounaan, jonka tutkimushenkilökunta tarjoaa.

Tämän jälkeen kukin osallistuja kuluttaa satunnaisesti annoksen flavan-3-olipitoisia uutteita kolmessa eri yhteydessä ja yhden viikon pesulla eri hoitojen välillä. Osallistujat saavat jokaisena testipäivänä annoksen yhtä runsaasti flavan-3-oleja sisältävää ruokauuttetta (1 mmol PVL-prekursoreita) liuotettuna 200 ml:aan vettä. Sitten koehenkilöille tarjotaan sama standardoitu aamiainen (valmiiksi pakattu (poly)fenoliton välipala. Aamiaisen jälkeen vapaaehtoiset pääsevät poistumaan ja suorittamaan peräkkäiset virtsankeräykset itse. Virtsanäytteet kerätään valituin aikavälein 24 tunnin kuluessa uutteen nauttimisesta. Lisäksi virtsan näytteenottoa jatketaan vapaaehtoisten alaryhmässä peräkkäisen 24 tunnin ajan metabotyyppien kehityksen arvioimiseksi 24:stä 48 tuntiin. Tämä alaryhmä koostuu 30 ensimmäisestä tutkimukseen ilmoittautuneesta osallistujasta.

Koehenkilöitä pyydetään noudattamaan (poly)fenolia sisältävää ruokavaliota 48 tuntia ennen jokaista testipäivää ja näytteenoton aikana (ruokavaliorajoitusten noudattamisen helpottamiseksi toimitetaan luettelo sallituista ja kielletyistä elintarvikkeista; ruokavalion noudattamisen tarkistamiseksi, Käytetään 3/4 päivän ravintoliitäntöä kutakin näytteenottopäivää edeltäviltä kahdelta päivältä ja näytteenottopäiviltä riippuen alaryhmästä, johon koehenkilö kuuluu.

Kaikkien käsittelyjen päätyttyä ja kaasunäyteanalyysin tulosten perusteella yhtä metaanin tuottajien vapaaehtoisten alaryhmää (luku = 5) ja yhtä ei-metaanin tuottajia (numero = 5) pyydetään toimittamaan yksi lisä uloste. näyte, otettu ensimmäisestä päivittäisestä ulostuksesta lyhytketjuisten rasvahappojen ja kaasun tuotannon in vitro -analyysiä varten inkuboinnin jälkeen tutkimuksen in vivo -osassa käytettyjen eri inuliini- ja polyfenoliseosten kanssa. Vapaaehtoisia pyydetään noudattamaan (poly)fenoleja ja käymiskuitua sisältävää ruokavaliota 2 päivää ennen ulosteen luovuttamista.