Metabotypy w wydalaniu z moczem metabolitów flawan-3-olu: „metanole” (Metanols)

Badanie będzie oparte na pojedynczej dawce, częściowo randomizowane, naprzemiennie, z 4 kolejnymi terapiami. Badanie obejmuje 4 fazy, w których każdy ochotnik spożywa określoną dawkę jednego z wybranych do badania produktów. Każdy ochotnik spożyje każdy produkt raz, w sumie 4 różne okazje. Produktami będą ekstrakty spożywcze składające się z frakcji błonnika fermentującego z cykorii (inuliny), po których następują trzy ekstrakty spożywcze bogate w różne rodzaje flawan-3-oli, spożywane przy trzech różnych okazjach iw przypadkowej kolejności.

Chętni zostaną poproszeni o jednorazową próbkę kału, pobraną z pierwszego codziennego wypróżnienia, która zostanie przeanalizowana pod kątem składu mikrobiomu kałowego. Przejdą również dzienny profil gazów oddechowych w celu oceny wpływu spożycia inuliny na fermentację okrężnicy i produkcję gazów oddechowych. Te dwie analizy (skład mikrobiologiczny próbek kału i produkcja gazów oddechowych) posłużą do scharakteryzowania składu i funkcjonalności mikroflory jelitowej ochotników. Szczegółowo, w ciągu 48 godzin poprzedzających pobranie próbek kału i oddechu, ochotnicy zostaną poproszeni o unikanie wysokiego poziomu błonnika i (poli)fenoli (aby ułatwić przestrzeganie ograniczeń dietetycznych, lista dozwolonych i zabronionych pokarmów zostanie dostarczone. Aby sprawdzić przestrzeganie diety, wykorzystany zostanie zapis diety z 2 dni poprzedzających każdy dzień pobierania próbek.

Rano w dniu pierwszego zabiegu ochotnicy przybędą po całonocnym poście i dostarczą świeżą próbkę kału. Następnie zostanie pobrana jedna próbka natężonego końcowo-wydechowego powietrza pęcherzykowego. Następnie otrzymają wystandaryzowane śniadanie testowe składające się z 12 g ekstraktu spożywczego frakcji inuliny z cykorii rozpuszczonej w 250 g wody oraz bezfermentowalnego, wolnego od błonnika, (poli)fenolu, zbilansowanego pod względem odżywczym posiłku stałego. Zostaną poproszeni o zjedzenie całego śniadania w ciągu 15 minut. W odstępach godzinnych przez 11 godzin po śniadaniu pobierane będą wymuszone końcowo-wydechowe próbki powietrza pęcherzykowego. Podczas całego testu wszyscy badani będą powstrzymywać się od palenia, spania, ćwiczeń i spożywania pokarmów lub posiłków innych niż dostarczone przez personel. Pięć godzin po rozpoczęciu testu ochotnicy zjedzą fermentowalny, wolny od błonnika, zbilansowany pod względem odżywczym, znormalizowany lunch dostarczony przez personel badawczy.

Następnie, przy trzech różnych okazjach iz tygodniową przerwą między różnymi zabiegami, każdy uczestnik losowo spożyje dawkę ekstraktów bogatych we flawan-3-ol. W każdym dniu badania uczestnicy, po wyjściowym pobraniu moczu na czczo, otrzymają dawkę jednego z ekstraktów spożywczych bogatych we flawan-3-ole (1 mmol prekursorów PVL) rozpuszczonych w 200 ml wody. Następnie takie samo standaryzowane śniadanie (wstępnie zapakowana (poli)fenolowa przekąska) zostanie podane pacjentom. Po śniadaniu chętni będą mogli wyjść i samodzielnie wykonać kolejne zbiórki moczu. Próbki moczu będą pobierane w wybranych odstępach czasu w ciągu 24 godzin po spożyciu ekstraktu. Ponadto pobieranie próbek moczu będzie kontynuowane w podgrupie ochotników przez kolejne 24 godziny, aby ocenić ewolucję metabotypów od 24 do 48 godzin. Ta podgrupa będzie się składać z pierwszych 30 uczestników włączonych do badania.

Osoby badane zostaną poproszone o przestrzeganie diety ubogiej w (poli)fenole na 48 godzin przed każdym dniem badania i podczas pobierania próbek (aby ułatwić przestrzeganie ograniczeń dietetycznych, zostanie dostarczona lista dozwolonych i zabronionych pokarmów; w celu sprawdzenia przestrzegania zaleceń dietetycznych, Wykorzystany zostanie zapis diety z 3/4 dni z 2 dni poprzedzających każdy dzień pobierania próbek i dni pobierania próbek, w zależności od podgrupy, do której należy badany.

Na koniec wszystkich zabiegów, na podstawie wyników analizy próbek gazów, jedna podgrupa ochotników produkujących metan (liczba=5) i jedna z producentów niemetanowych (liczba=5) zostanie poproszona o oddanie jeszcze jednego kału próbkę pobraną z pierwszego codziennego wypróżnienia do analizy in vitro krótkołańcuchowych kwasów tłuszczowych i produkcji gazu po inkubacji z różnymi mieszankami inuliny i polifenoli stosowanych podczas części badania in vivo. Ochotnicy zostaną poproszeni o przestrzeganie diety ubogiej w (poli)fenole i błonnik ulegający fermentacji przez 2 dni przed oddaniem kału.