Metabotipi nell'escrezione urinaria dei metaboliti Flavan-3-ol: "Metanols" (Metanols)

Lo studio sarà un disegno cross-over a dose singola, parzialmente randomizzato, con 4 trattamenti consecutivi. Lo studio prevede 4 fasi in cui ogni volontario consumerà una dose specifica di uno dei prodotti scelti per lo studio. Ogni volontario consumerà ogni prodotto una volta, per un totale di 4 diverse occasioni. I prodotti saranno un estratto alimentare costituito da frazioni di fibra fermentescibile di cicoria (inulina) seguito da tre estratti alimentari ricchi di un diverso tipo di flavan-3-oli, consumati in tre diverse occasioni e in ordine casuale.

Ai volontari verrà chiesto di fornire una volta un campione fecale, prelevato dalla prima defecazione giornaliera, che verrà analizzato per la composizione del microbiota fecale. Saranno inoltre sottoposti a un profilo giornaliero dei gas respiratori per valutare l'effetto del consumo di inulina sulla fermentazione del colon e sulla produzione di gas respiratori. Queste due analisi (composizione microbica dei campioni fecali e produzione di gas respiratori) serviranno a caratterizzare la composizione e la funzionalità del microbiota intestinale dei volontari. In dettaglio, durante le 48 ore che precedono la raccolta dei campioni fecali e respiratori, ai volontari verrà chiesto di evitare un livello elevato di fibre e (poli)fenoli (per facilitare il rispetto delle restrizioni dietetiche, verrà fornito un elenco di alimenti consentiti e vietati fornito. Per verificare la conformità dietetica, verrà utilizzato un registro dietetico di 2 giorni dei 2 giorni precedenti a ciascun giorno di campionamento.

La mattina del primo trattamento arriveranno i volontari, dopo il digiuno notturno, e consegneranno il campione fecale fresco. Successivamente, verrà raccolto un campione di campioni di aria alveolare di fine espirazione forzata. Quindi, riceveranno una colazione di prova standardizzata composta da 12 g di estratto alimentare di frazioni di inulina di cicoria sciolte in 250 g di acqua e un pasto solido fermentabile privo di fibre, (poli)fenoli e nutrizionalmente bilanciato. Verrà chiesto loro di consumare l'intera colazione entro 15 minuti. Ad intervalli orari per 11 ore dopo la colazione, verranno raccolti campioni di aria alveolare di fine espirazione forzata. Durante l'intera prova, tutti i soggetti si asterranno dal fumare, dormire, fare esercizio fisico e consumare cibi o pasti diversi da quelli forniti dal personale. Cinque ore dopo l'inizio del test, i volontari mangeranno un pranzo standardizzato nutrizionalmente bilanciato privo di fibre fermentabili fornito dal personale dello studio.

Successivamente, in tre occasioni distinte e con una settimana di lavaggio tra i diversi trattamenti, ciascun partecipante consumerà in modo casuale una dose di estratti ricchi di flavan-3-ol. Ogni giorno del test, i partecipanti, dopo aver raccolto le urine basali a digiuno, riceveranno la dose di uno degli estratti alimentari ricchi di flavan-3-oli (1 mmol di precursori PVL) sciolti in 200 mL di acqua. Quindi, ai soggetti verrà fornita la stessa colazione standardizzata (spuntino preconfezionato (poli)fenolo). Dopo la colazione, i volontari potranno uscire e svolgere autonomamente le successive raccolte delle urine. I campioni di urina saranno raccolti ad intervalli di tempo selezionati lungo le 24 ore successive all'ingestione dell'estratto. Inoltre, il prelievo delle urine proseguirà in un sottogruppo di volontari per le successive 24 ore per valutare l'evoluzione dei metabotipi dalle 24 alle 48 ore. Questo sottogruppo sarà composto dai primi 30 partecipanti arruolati nello studio.

Ai soggetti verrà chiesto di seguire una dieta povera di (poli)fenoli 48 ore prima di ogni giorno di test e durante il campionamento (per facilitare l'aderenza alle restrizioni dietetiche, verrà fornito un elenco di alimenti consentiti e proibiti; per verificare la conformità dietetica, un Verrà utilizzata la scheda dietetica di 3/4 giorni dei 2 giorni precedenti ogni giorno di campionamento e del/i giorno/i di campionamento, a seconda del sottogruppo di appartenenza del soggetto.

Al termine di tutti i trattamenti, e sulla base dei risultati delle analisi dei campioni di gas, un sottogruppo di volontari produttori di metano (numero=5) e uno di volontari non produttori di metano (numero=5) saranno invitati a fornire un ulteriore campione, prelevato dalla prima defecazione giornaliera per l'analisi in vitro degli acidi grassi a catena corta e della produzione di gas dopo l'incubazione con diverse miscele di inulina e polifenoli utilizzate durante la parte in vivo dello studio. Ai volontari verrà chiesto di seguire una dieta povera di (poli)fenoli e fibre fermentescibili per 2 giorni prima della donazione fecale.