Infection palustre diagnostiquée par réaction en chaîne par polymérase (PCR) comme moyen d'évaluation des candidats vaccins antipaludiques pré-érythrocytaires

Objectif

L'objectif principal de l'étude était de déterminer si la technique PCR très sensible, capable de détecter les parasites du paludisme à de faibles densités, pouvait être utilisée comme méthode économique pour entreprendre une évaluation préliminaire sur le terrain des vaccins antipaludiques pré-érythrocytaires. Un objectif secondaire était de déterminer si le prélèvement sanguin intensif requis par cette méthode serait acceptable.

Zone d'étude

Cette étude a été menée de juin à octobre 2004 lorsque l'incidence du paludisme en Gambie est la plus élevée. Des volontaires ont été recrutés dans 9 villages à l'est de Farafenni, une ville située à 200 km à l'est de la capitale, Banjul. Le paludisme est très saisonnier dans cette zone avec un taux d'inoculation entomologique compris entre 10 et 50 piqûres infectieuses par an.

Population étudiée

Des volontaires sains âgés de 15 à 45 ans ont été sélectionnés dans deux centres pour déterminer leur éligibilité à participer à l'étude. Le dépistage comportait un examen physique approfondi ainsi que des prélèvements sanguins pour des tests hématologiques (numération formule sanguine, hématocrite [PCV]), rénaux (taux de créatinine plasmatique) et hépatiques (alanine amino transférase) et pour les tests VIH 1 et 2 par ELISA . Un test de déficit en glucose-6-phosphate déshydrogénase (G6PD) a été effectué en raison du risque lié à l'administration des médicaments à l'étude Primaquine et Lapdap à des volontaires déficients en G6PD. Les critères d'exclusion comprenaient un hématocrite < 30 %, une élévation de la créatinine plasmatique (> 130 micromoles/litre) ou des taux d'ALT (> 42 UI/litre), un déficit en G6PD, la participation simultanée à un autre essai clinique, une transfusion sanguine dans le mois précédant la vaccination, une vaccination antipaludique expérimentale, administration d'un autre vaccin dans les 2 semaines suivant la vaccination, allergie à toute vaccination antérieure ou à la sulfadoxine/pyriméthamine, antécédents de splénectomie et tout traitement par des médicaments immunosuppresseurs.

Procédure d'étude

Les volontaires éligibles ont été recrutés dans l'étude après l'obtention d'un consentement écrit et éclairé. Tous les volontaires éligibles ont reçu un numéro unique et une carte d'identité avec photo. Les volontaires ont été répartis au hasard en trois groupes pour recevoir soit deux doses de 5 x 10 ^ 7 pfu de FP9 ME-TRAP suivies d'une dose unique de 1 x 10 ^ 8 pfu MVA ME-TRAP (groupe vaccin contre le paludisme) ou 3 doses de vaccin contre la rage ( groupes Fansidar et rage). Tous les vaccins ont été administrés à 4 semaines d'intervalle et ont été administrés par voie intradermique. Après la vaccination, tous les volontaires ont été observés pendant 1 h et ont reçu un traitement antipyrétique (paracétamol) à prendre si nécessaire. De plus, des visites à domicile ont été effectuées par des agents de terrain les jours 1, 2, 7 et 28 après chaque vaccination pour enregistrer les événements indésirables à l'aide d'une fiche de journal standard. Tous les volontaires ont reçu une dose unique de primaquine (30 mg) 7 jours avant la dernière dose de vaccination en tant que traitement radical des gamétocytes et un traitement de 3 jours des médicaments antipaludiques à courte durée d'action, Lapdap et Artesunate en association à partir du jour de la vaccination finale. vaccination pour éliminer toute forme asexuée du parasite avant la période de suivi. De plus, les volontaires du groupe Fansidar ont reçu le médicament antipaludéen à action prolongée et devaient rester négatifs à la PCR tout au long de la période de suivi. Les volontaires ont été suivis intensivement pendant 28 jours à partir de 7 jours après la dernière vaccination. La période de suivi a été programmée pour correspondre à la période de forte transmission du paludisme. Le suivi consistait en des piqûres quotidiennes au doigt pour obtenir 0,5 ml de sang dans un microtainer pour l'analyse par PCR et un frottis sanguin en double pour l'estimation des parasites du paludisme. Le personnel de laboratoire qui a effectué les immunoessais et l'analyse par PCR était aveugle à l'affectation des groupes de volontaires jusqu'à l'approbation du plan d'analyse par le Data Safety Monitoring Board (DSMB).

Taille de l'échantillon

Sur la base de considérations pratiques et statistiques, les chercheurs ont proposé d'enrôler 40 volontaires par groupe (un total de 120). En tenant compte d'un taux constant d'abandon pendant le suivi s'élevant à un total de 20 % des sujets à la fin de l'essai, l'essai a une puissance d'au moins 80 % pour détecter une différence de temps avant l'infection entre le vaccin contre le paludisme et les groupes contre la rage , si l'efficacité du vaccin est d'au moins 60 % et qu'au moins 70 % des volontaires du groupe témoin développent une parasitémie détectée au cours de l'essai.

Comité de surveillance de la sécurité des données (DSMB)

Un DSMB a été mis en place pour superviser le déroulement de l'essai et approuver le plan d'analyse avant de lever l'aveugle du personnel du laboratoire. L'essai a été mené conformément aux directives de bonnes pratiques cliniques de l'ICH et a été guidé par les réglementations du Conseil de la recherche médicale pour la conduite des essais cliniques.