Détermination de la constante de dissociation (Ka) du plasma et du sang total chez les patients septiques (ENTERPRISE)

L'équilibre acido-basique fait l'objet d'études depuis plus de 100 ans en médecine en raison de sa pertinence dans la prise en charge des patients et dans la détermination de leur pronostic, notamment en réanimation.

Un concept étroitement lié à l'équilibre acido-basique est celui de "tampon", terme utilisé pour définir toute substance capable de limiter les variations de pH provoquées par l'ajout ou la perte d'alcali ou d'acide.

En fonction de ses caractéristiques physicochimiques, chaque tampon a une ou plusieurs valeurs de pH (logarithme négatif de la concentration en ions hydrogène) où sa capacité à maintenir un pH stable est maximale. Ces valeurs sont définies comme Ka ou points de semi-équivalence, c'est-à-dire les valeurs de pH où le tampon dissous dans la solution est à moitié sous sa forme associée (AH) et à moitié sous sa forme dissociée (A-).

Plusieurs études ont tenté de déterminer les valeurs normales de la concentration et du Ka d'ATOT. Cependant, ils n'ont pas conduit à des résultats univoques. De plus, nombre de ces valeurs proviennent d'études de médecine vétérinaire ou résultent d'estimations théoriques sur plasma humain.

Staempfli et Constable ont réalisé une seule étude expérimentale sur le plasma humain en 2003. Ces auteurs, cependant, n'ont analysé que du plasma isolé, en négligeant le sang total, et ont calculé les valeurs ATOT et Ka de volontaires sains, tandis que les valeurs Ka et ATOT pour les patients gravement malades atteints de septicémie sont encore inconnues.

L'objectif principal de la présente étude est de quantifier la constante de dissociation acide (Ka) du plasma isolé de patients gravement malades atteints de septicémie, et de comparer ces données avec des valeurs normales, c'est-à-dire obtenues à partir de témoins sains. Les chercheurs émettent l'hypothèse que le plasma des patients septiques en état critique a un Ka plus faible et que, par conséquent, il subit des variations de pH plus importantes pour une perturbation donnée du système (variation du dioxyde de carbone).

L'objectif secondaire est de quantifier le Ka du sang total de patients gravement malades atteints de septicémie et de comparer ces données avec des valeurs normales, c'est-à-dire obtenues à partir de témoins sains. Les chercheurs émettent l'hypothèse que le sang des patients septiques critiques a un Ka plus faible et que, par conséquent, il subit des variations de pH plus élevées pour une perturbation donnée du système (variation du dioxyde de carbone).

Les autres objectifs de l'étude sont :

• quantifier le Ka du plasma et du sang total de patients non septiques admis en réanimation et comparer ces résultats avec les valeurs de patients septiques et de volontaires sains.
• définir la concentration normale d'acides faibles non carboniques (ATOT) dans le plasma de patients septiques et la comparer aux données obtenues chez des volontaires sains et des patients non septiques.

Enfin, une éventuelle altération structurale des protéines plasmatiques sera évaluée :

• Identification de protéoformes différentiellement modifiées de l'albumine sérique et des principales protéines plasmatiques par électrophorèse bidimensionnelle ;
• Chromatographie liquide à haute performance (HPLC) pour identifier différentes formes redox d'albumine
• Évaluation spectrophotométrique des modifications des propriétés de liaison des ligands de l'albumine sérique.