Determinazione della costante di dissociazione (Ka) del plasma e del sangue intero nei pazienti settici (ENTERPRISE)

L'equilibrio acido-base è oggetto di studio da oltre 100 anni in medicina per la sua rilevanza nella gestione dei pazienti e nella determinazione della loro prognosi, soprattutto in terapia intensiva.

Un concetto strettamente legato all'equilibrio acido-base è quello di "tampone", termine utilizzato per definire qualsiasi sostanza in grado di limitare le variazioni di pH causate dall'aggiunta o dalla perdita di alcali o acidi.

A seconda delle sue caratteristiche fisico-chimiche, ogni tampone ha uno o più valori di pH (logaritmo negativo della concentrazione di ioni idrogeno) in cui la sua capacità di mantenere il pH stabile è massima. Questi valori sono definiti come Ka o punti di semiequivalenza, cioè i valori di pH in cui il tampone disciolto in soluzione è metà nella sua forma associata (AH) e metà nella sua forma dissociata (A-).

Diversi studi hanno cercato di determinare i valori normali sia di concentrazione che di Ka di ATOT. Tuttavia, non hanno portato a risultati univoci. Inoltre, molti di questi valori provengono da studi di medicina veterinaria o sono il risultato di stime teoriche sul plasma umano.

Staempfli e Constable hanno eseguito un singolo studio sperimentale sul plasma umano nel 2003. Questi autori, tuttavia, hanno analizzato solo il plasma isolato, trascurando il sangue intero, e calcolato i valori di ATOT e Ka di volontari sani, mentre i valori di Ka e ATOT per i pazienti critici con sepsi sono ancora sconosciuti.

Lo scopo principale del presente studio è quantificare la costante di dissociazione acida (Ka) del plasma isolato di pazienti critici con sepsi e confrontare questi dati con valori normali, cioè ottenuti da controlli sani. I ricercatori ipotizzano che il plasma di pazienti settici critici abbia un Ka più basso e che, di conseguenza, subisca variazioni di pH più elevate per una data perturbazione del sistema (variazione dell'anidride carbonica).

Scopo secondario è quantificare la Ka del sangue intero di pazienti critici con sepsi e confrontare questi dati con valori normali, cioè ottenuti da controlli sani. Gli investigatori ipotizzano che il sangue di pazienti settici critici abbia un Ka più basso e che, di conseguenza, subisca variazioni di pH più elevate per una data perturbazione del sistema (variazione di anidride carbonica).

Altri scopi dello studio sono:

• quantificare la Ka del plasma e del sangue intero dei pazienti non settici ricoverati in terapia intensiva e confrontare questi risultati con i valori dei pazienti settici e dei volontari sani.
• definire la normale concentrazione di acidi non carbonici deboli (ATOT) nel plasma di pazienti settici e confrontarla con i dati ottenuti in volontari sani e pazienti non settici.

Infine, verranno valutate possibili alterazioni strutturali delle proteine ​​plasmatiche:

• Identificazione di proteoforme differenzialmente modificate dell'albumina sierica e delle principali proteine ​​plasmatiche mediante elettroforesi bidimensionale;
• Cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC) per identificare diverse forme redox dell'albumina
• Valutazione spettrofotometrica delle modificazioni delle proprietà di legame del ligando dell'albumina sierica.