Определение константы диссоциации (Ka) плазмы и цельной крови у пациентов с сепсисом (ENTERPRISE)

Кислотно-щелочное равновесие является объектом изучения в медицине более 100 лет из-за его важности для ведения пациентов и определения их прогноза, особенно в отделении интенсивной терапии.

Понятие, тесно связанное с кислотно-щелочным равновесием, - это понятие «буфер», термин, используемый для определения любого вещества, способного ограничивать изменения pH, вызванные добавлением или потерей щелочи или кислоты.

В зависимости от своих физико-химических свойств каждый буфер имеет одно или несколько значений pH (отрицательный логарифм концентрации ионов водорода), при которых его способность поддерживать стабильный pH максимальна. Эти значения определяются как Ka или точки полуэквивалентности, то есть значения pH, при которых буфер, растворенный в растворе, находится наполовину в связанной форме (AH) и наполовину в диссоциированной форме (A-).

В нескольких исследованиях пытались определить нормальные значения как концентрации, так и Ka АТОТ. Однако к однозначным результатам они не привели. Более того, многие из этих значений взяты из исследований ветеринарной медицины или являются результатом теоретических оценок плазмы человека.

Staempfli и Constable провели единственное экспериментальное исследование плазмы человека в 2003 году. Эти авторы, однако, проанализировали только изолированную плазму, пренебрегая цельной кровью, и рассчитали значения ATOT и Ka здоровых добровольцев, в то время как значения Ka и ATOT для критически больных пациентов с сепсисом до сих пор неизвестны.

Основная цель настоящего исследования состоит в том, чтобы количественно определить кислотную константу диссоциации (Ka) изолированной плазмы больных с сепсисом в критическом состоянии и сравнить эти данные с нормальными значениями, т.е. полученными от здоровых контролей. Исследователи предполагают, что плазма больных с сепсисом в критическом состоянии имеет более низкую Ка и, следовательно, она испытывает более высокие колебания рН при данном возмущении системы (изменении содержания углекислого газа).

Вторичная цель состоит в том, чтобы количественно определить Ka цельной крови больных с сепсисом в критическом состоянии и сравнить эти данные с нормальными значениями, т.е. полученными от здоровых контролей. Исследователи предполагают, что кровь больных сепсисом в критическом состоянии имеет более низкую Ка и, следовательно, она испытывает более высокие колебания рН при данном возмущении системы (изменении содержания углекислого газа).

Другими целями исследования являются:

• количественно определить Ka плазмы и цельной крови пациентов без сепсиса, поступивших в отделение интенсивной терапии, и сравнить эти результаты со значениями пациентов с сепсисом и здоровых добровольцев.
• определяют нормальную концентрацию слабых некарбоновых кислот (АТОТ) в плазме больных сепсисом и сравнивают ее с данными, полученными у здоровых добровольцев и больных без сепсиса.

Наконец, будут оценены возможные структурные изменения белков плазмы:

• Идентификация дифференциально модифицированных протеоформ сывороточного альбумина и основных белков плазмы методом двумерного электрофореза;
• Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) для идентификации различных окислительно-восстановительных форм альбумина.
• Спектрофотометрическая оценка модификации лигандсвязывающих свойств сывороточного альбумина.