Bestämning av dissociationskonstanten (Ka) av plasma och helblod hos septiska patienter (ENTERPRISE)

Syra-bas-jämvikt har varit föremål för studier i mer än 100 år inom medicinen på grund av dess relevans för patienthantering och för att bestämma deras prognos, särskilt på intensivvårdsavdelningen.

Ett begrepp som är nära besläktat med syra-bas-jämvikt är det av "buffert", term som används för att definiera vilken substans som helst som kan begränsa förändringar i pH som orsakas av tillsats eller förlust av alkali eller syra.

Beroende på dess fysiokemiska egenskaper har varje buffert ett eller flera pH-värden (negativ logaritm för vätejonkoncentration) där dess förmåga att hålla pH stabilt är maximal. Dessa värden definieras som Ka eller semi-ekvivalenspunkter, dvs pH-värdena där bufferten löst i lösning är hälften i dess associerade form (AH) och hälften i dess dissocierade form (A-).

Flera studier försökte fastställa de normala värdena för både koncentration och Ka av ATOT. De ledde dock inte till entydiga resultat. Dessutom kommer många av dessa värden från studier av veterinärmedicin eller är resultatet av teoretiska uppskattningar av human plasma.

Staempfli och Constable utförde en enda experimentell studie på human plasma 2003. Dessa författare analyserade emellertid endast isolerad plasma, försummade helblod, och beräknade ATOT- och Ka-värden för friska frivilliga, medan Ka- och ATOT-värden för kritiskt sjuka patienter med sepsis fortfarande är okända.

Det primära syftet med föreliggande studie är att kvantifiera den sura dissociationskonstanten (Ka) för isolerad plasma från kritiskt sjuka patienter med sepsis, och jämföra dessa data med normala värden, d.v.s. erhållna från friska kontroller. Utredarna antar att plasma från kritiskt sjuka septiska patienter har ett lägre Ka och att det följaktligen genomgår högre pH-variationer för en given störning av systemet (variation i koldioxid).

Sekundärt syfte är att kvantifiera Ka av helblod från kritiskt sjuka patienter med sepsis och jämföra dessa data med normala värden, d.v.s. erhållna från friska kontroller. Utredarna antar att blod från kritiskt sjuka septiska patienter har ett lägre Ka och att det följaktligen genomgår högre pH-variationer för en given störning av systemet (variation i koldioxid).

Andra syften med studien är:

• kvantifiera Ka för plasma och helblod från icke-septiska patienter som tagits in på ICU och jämför dessa resultat med värdena för septiska patienter och friska frivilliga.
• definiera den normala koncentrationen av svaga icke-kolsyror (ATOT) i plasma från septiska patienter och jämföra den med data som erhållits från friska frivilliga och icke-septiska patienter.

Slutligen kommer möjlig strukturell förändring av plasmaproteiner att utvärderas:

• Identifiering av differentiellt modifierade proteoformer av serumalbumin och större plasmaproteiner genom tvådimensionell elektrofores;
• High Performance Liquid Chromatography (HPLC) för att identifiera olika Redox-former av albumin
• Spektrofotometrisk utvärdering av modifieringar av ligandbindande egenskaper hos serumalbumin.