MABs Therapy m.3243A>G Mutation Carriers (MABS01)

Justification : Les troubles mitochondriaux sont des troubles multisystémiques progressifs, souvent mortels, causés dans 20 à 25 % des cas par des mutations hétéroplasmiques de l'ADN mitochondrial (ADNmt). Des études épidémiologiques ont montré que les troubles de l'ADNmt affectent environ 1 personne sur 10 000 dans la population générale, induisant une morbidité et une mortalité importantes et des coûts sanitaires et sociétaux élevés. Les manifestations cliniques sont plus importantes dans les organes à forte demande énergétique, comme les muscles et le cerveau. À l'heure actuelle, il n'existe aucun traitement efficace connu pour influencer le processus ou la manifestation de la maladie. Les thérapies à base de cellules souches myogéniques complétant les cellules et les fibres musculaires défectueuses sont très prometteuses pour lutter contre la myopathie et l'intolérance à l'exercice qui affectent > 50 % des porteurs de mutations hétéroplasmiques de l'ADNmt. Les cellules souches myogéniques appelées mésoangioblastes (MAB) sont actuellement les seuls précurseurs myogéniques qui remplissent tous les critères pour être utilisés comme médicament de thérapie innovante (MTI) pour le traitement systémique, à savoir une bonne capacité de prolifération ex vivo, une capacité myogénique élevée et une capacité à traverser le sang vaisseaux sanguins, permettant l'administration intra-artérielle (systémique) vers le muscle affecté. Des greffes de MAB autologues et allogéniques génétiquement corrigées ont été réalisées chez des modèles de souris et de chiens, mais seule la greffe de MAB allogénique a été réalisée chez des patients atteints de dystrophie musculaire de Duchene (DMD). Le traitement avec des MAB expansés ex vivo a entraîné une régénération significative des fibres musculaires positives pour la DMD chez les modèles de souris et de chiens. L'administration intra-artérielle de MAB allogéniques chez les garçons DMD (étude clinique de phase I/IIa) a démontré que le traitement était relativement sûr et qu'une certaine quantité de dystrophine était produite par les nouvelles fibres musculaires, bien qu'insuffisante pour une amélioration fonctionnelle. L'approche de cette étude présente des avantages clés car des MAB autologues sont utilisés, qui ne nécessitent pas de régime immunosuppresseur. De plus, la fonction mitochondriale est en partie préservée chez les porteurs de mutations d'ADNmt et une supplémentation partielle par des fibres saines devrait suffire à améliorer la fonction mitochondriale. Les chercheurs ont démontré que les MAB de la plupart des porteurs m.3243A>G ne contiennent pas ou seulement une faible quantité (<10 %) de la mutation de l'ADNmt, permettant une expansion directe ex vivo des MAB dérivés du patient. L'objectif global est d'induire la régénération musculaire en utilisant ces MAB autologues avec une charge de mutation < 10 %, en tant que médicament de thérapie innovante (ATMP). Cette proposition couvre le premier essai de phase I/IIa.

Objectif : L'essai de phase I/IIa consistera en une injection intra-artérielle (via un cathéter dans l'artère fémorale) des MAB autologues dans la partie inférieure de la jambe gauche de 5 patients m.3243A>G. L'objectif principal est d'évaluer l'innocuité de l'administration de MAB autologues, qui n'ont pas été utilisés comme traitement auparavant chez l'homme. Les objectifs secondaires sont (1) d'évaluer le retour des MAB autologues marqués vers le muscle tibial antérieur 24 heures après i.a. et (2) évaluer l'efficacité au niveau tissulaire en mesurant la myogenèse et la charge de mutation de l'ADNmt du muscle tibial antérieur traité par rapport au muscle non traité de la jambe controlatérale.

Conception de l'étude : Étude clinique de phase I/IIa contrôlée, intra-sujet, prospective, ouverte, monocentrique.

Population étudiée : 15 patients adultes m.3243A>G, dont 5 seront inclus dans l'étude clinique.

Intervention : Les 15 patients adultes m.3243A>G subiront une cure d'environ 30 mg m. biopsie du muscle vaste externe lors de la visite 1. Parmi ces 15 patients, cinq patients s'inscriront à l'étude clinique en fonction de leur charge de mutation m.3243A>G dans le muscle squelettique et les mésoangioblastes. Ces 5 patients visiteront le MUMC quatre fois supplémentaires. De chaque patient, au cours de la visite 2 à 5, au total cinq biopsies musculaires seront prélevées (1x ~100 mg m.vastus lateralis les deux jambes lors de la visite 2, 2x ~30mg m. tibialis anterior les deux jambes lors de la visite 4 et 2x ~30mg m .tibial antérieur des deux jambes lors de la visite 5). Lors de la visite 4, le muscle tibial antérieur d'une jambe sera traité avec 5*10E7/kg de MAB autologues via l'administration de l'artère tibiale antérieure. Une séance d'exercices excentriques maximaux sera exécutée à la visite 3. Des échantillons de sang veineux seront prélevés à toutes les visites.

Principaux paramètres/critères d'évaluation : le critère d'évaluation principal consiste à évaluer l'innocuité en surveillant la perfusion (angiographie), en surveillant les effets indésirables aigus (24 heures), en effectuant des prélèvements sanguins et musculaires pour évaluer l'inflammation locale et systémique et les marqueurs musculaires (CK). Les critères d'évaluation secondaires sont l'évaluation de l'efficacité au niveau tissulaire : à savoir, la migration des mésoangioblastes marqués IC-Green de la circulation sanguine vers le muscle tibial antérieur (24 heures après la perfusion) et la formation de nouvelles fibres musculaires et la charge de mutation m.3243A>G ( 28 jours après la perfusion).

Nature et étendue du fardeau et des risques associés à la participation, aux avantages et à la relation de groupe : sur les 15 patients, 5 patients s'inscriront à l'étude clinique et se rendront à l'hôpital cinq fois au total. Les 10 patients non sélectionnés se rendront une fois au MUMC.

• Lors de la première visite (tous les 15 patients), un examen clinique neurologique et de routine et une biopsie du muscle squelettique du vaste latéral (~ 30 mg) seront collectés.
• Lors de la deuxième visite (5 patients), un examen physique de routine sera effectué, et une biopsie du muscle squelettique du vaste latéral (~ 100 mg) et un échantillon de sang veineux (~ 10 ml) seront prélevés et ils essaieront le combat de exercice excentrique.
• Lors de la visite 3 : examen physique de routine, une séance d'exercices excentriques maximaux sera effectuée et un échantillon de sang veineux (10 ml) sera prélevé.
• Lors de la visite 4 : examen physique de routine, administration intra-artérielle de 5*10E7 MAB dans une jambe, suivie d'une observation de 24 heures à l'hôpital comprenant un prélèvement sanguin régulier (4 x ~ 10 ml) et une biopsie du muscle tibial antérieur d'environ 30 mg des deux jambes 24 heures après perfusion des MAB autologues.
• La visite 5 consiste en un examen physique neurologique et de routine, un échantillon de sang veineux (~ 10 ml) et une biopsie musculaire d'environ 30 mg dans les muscles tibiaux antérieurs des deux jambes.