Innovatív reagensek a mikobakteriális fertőzések gyors diagnosztizálására (TIKA_TB)

Bevezetés Az M. tuberculosis (TB) jelentős közegészségügyi probléma az Egyesült Királyságban és külföldön egyaránt. 2013-ban összesen 7832 esetet jelentettek az Egyesült Királyságban. A tenyésztéssel igazolt (59%) közül a gyógyszerrezisztencia aránya 7,8% volt. Egyes populációkban a gyógyszerrezisztencia incidenciája magasabb: hajléktalan betegek, börtönben ültek és különösen kelet-európaiak. A pácienst általában 18 hónapig vagy tovább kezelik, és a PHE becslése szerint ennek költsége akár 50 000 GBP is lehet.

A jelenlegi diagnózis a M. tuberculosis tenyészetén és a gyógyszerérzékenységi vizsgálaton alapul. Ez hat-nyolc hétig is eltarthat, ami azt jelenti, hogy a betegek egy ideig hatástalan terápiában részesülhetnek, ami további átvitelhez és a beteg klinikai állapotának romlásához vezethet. Ha a szervezet tenyésztési sebességét jelentősen meg lehetne növelni, akkor a diagnózis és a megfelelő kezelés megkezdésének késése csökkenthető lenne. Ezen túlmenően, ha a tenyésztéssel igazolt esetek százalékos aránya növelhető, akkor a beteg és a klinikus számára előnyös lenne. A betegeket gyakran úgy kezdik el kezelni, hogy a tbc-t nem igazolták magabiztos diagnózissal. Más mikobaktériumok tbc-nek álcázhatják magukat, ami késleltetheti a diagnózist és a kezelés bizonytalanságát, mielőtt a megerősített tenyésztési eredmény elérhetővé válik.

A tuberkulózist a szokásos módon, a megfelelő minták rutinelemzésével diagnosztizálják, beleértve a standard PCR-t és a tenyésztést. Olyan betegeket vonnak be a vizsgálatba, akikről feltételezhető, hogy tuberkulózisban szenvednek, vagy akikről megállapították, hogy tuberkulózisban szenvednek.

A betegek kezelése a szokásos módon történik, a tuberkulózis kezelésére vonatkozó standard protokollok szerint, a kezelőorvos utasítása szerint.

Jelenleg a tuberkulózis diagnózisa hosszadalmas folyamat, amely több hetes szervezettenyésztést igényel. A mintákon esetleg elvégezhető gyorsabb vagy egyszerűbb vizsgálat azonosítása nagy előnyökkel járna a jövőbeli betegek számára. A kutatás kutatói azt keresik, hogy ez az eltérő tenyésztési módszer jelentősen megnöveli-e a diagnózis felgyorsítását.

Elsődleges cél Az új tenyésztési módszer sebességének számszerűsítése és összehasonlítása a hagyományos rendszerekkel.

Ez egy megfigyeléses vizsgálat, és további beavatkozásokat nem végeznek.

Mód

Legalább 200 köpetminta, amelyet két példányban vettek a megfelelő beiratkozott betegektől:

1. A rutinmintát a helyi NHS Trust Orvosi Mikrobiológiai Osztálya címkézi és dolgozza fel hagyományos módszerekkel és validált SOP-okkal, a szokásos módon.
2. A vizsgálati mintát anonimizálják, és a lehető leggyorsabban feldolgozzák az SGUL különálló III. kategóriás kutatólaboratóriumában, képzett kutatószemélyzet által. Ez a mintából kivonja a mikobaktériumokat, amelyeket azután egy új táptalajba oltanak, amelyet növekedési adalékokkal (TiKa Medium) egészítenek ki. . Ezután minden egyes vizsgálati mintát véletlenszerűen kiosztanak a három különböző, kereskedelmi forgalomban kapható kultúrpalackrendszer (MGIT, BacTALert, VersaTrek) egyikébe, és a gyártó által általában javasolt módon dolgozzák fel, legfeljebb 42 napig. A pozitivitásig eltelt időt (TTP) rögzítjük, és a növekvő kultúra azonosságát a hagyományos (molekuláris próba) módszertan segítségével igazoljuk.

A TTP értékek egy adatbázisban kerülnek összeállításra. A vizsgálat végén ezt az adatbázist összehasonlítjuk az eredeti párhuzamos mintákból meghatározott rutin mycobacterium tenyésztési eredmények retrospektív adataival.

Az adatelemzés meghatározza az egyes módszerek által elért javulás mértékét (napokban a pozitivitásig), és teszteli azt a hipotézist, hogy a TiKa táptalaj szignifikánsan képes (P<0,05) javítja a nem tenyészthető fenotípusok visszanyerését és a patogén mikobaktériumok tenyészthető fenotípusait gyorsabban szaporítja a klinikai mintákból, mint azt korábban megfigyelték.

Nem lesz kivétel (lemondás) az alkalmassági kritériumok alól, mielőtt a résztvevőt bevonják a vizsgálatba. Bármilyen, a jogosultsággal kapcsolatban felmerülő kérdést meg kell oldani a résztvevő jelentkezése előtt.

Bevonási kritériumok: Minden lehetséges vagy diagnosztizált tuberkulózisban szenvedő betegnek, aki képes beleegyezését adni, felajánljuk, hogy részt vegyen a vizsgálatban.

Kizárási kritériumok: Minden 18 éven aluli, vagy tájékozott beleegyező nyilatkozatot nem tudó beteget kizárnak ebből a vizsgálatból. Az őrizetben lévő személyek nem számítanak bele. Minden olyan beteg, aki nem tud mintát adni.

Bármely beteg bármikor kiléphet a vizsgálatból. Minden olyan beteggel felvesszük a kapcsolatot, aki elveszett a nyomon követésben, és megpróbálják újra bevonni a szolgáltatásokat a tuberkulózisban szenvedő betegek szokásos gyakorlatának megfelelően.

A résztvevők toborzása egy telephelyen csak akkor kezdődik, ha a következő jóváhagyás/alapvető dokumentumok bizonyítékai rendelkezésre állnak:

1. A fő REC jóváhagyás, ha van
2. A szponzorálás és a fogadó webhely végleges jóváhagyása,

Minden olyan résztvevőt, aki részt kíván venni a vizsgálatban, teljes körűen átvizsgálja, és beleegyezését adja a vizsgálatvezető, vagy a vizsgálatban klinikai társkutatóként részt vevő szakképzett klinikusok egyike.

A rutin klinikai csapat megkeresi a betegeket, és megkérdezi, hogy érdekli-e őket. Ha érdeklődést mutatnak, az egyik kutató felveszi velük a kapcsolatot.

A hozzájárulást a kutatócsoport olyan tagja kéri ki, aki tapasztalattal, képzettséggel és képesítéssel rendelkezik a helyes klinikai gyakorlat terén a beleegyezés megszerzéséhez.

Az aláírt informált beleegyező nyilatkozat (ICF) egy példányát, valamint a betegtájékoztató (PIS) másolatát megkapja a vizsgálatban résztvevő. Az eredeti aláírt és keltezett beleegyezési formanyomtatvány az orvosi feljegyzésekben megőrződik, egy példányát pedig az ISF-ben helyezzük el.

A beiratkozáskor az adatokat pszeudoanonimizált formában, a protokoll szerint gyűjtjük.

Minden adatot az 1998. évi adatvédelmi törvénynek megfelelően kezelünk. Az esetjelentési űrlapokon (CRF) nem szerepel a résztvevő neve vagy más, közvetlenül azonosítható adat. Az azonosításhoz csak a résztvevő próbaazonosító számát (ID) használjuk fel. A JREOLOG0002 szponzori alanyazonosító napló felhasználható a résztvevő azonosítható információinak kereszthivatkozására.

Az esetjelentési űrlapokat a CI készíti el, a végső verziót pedig a szponzor hagyja jóvá. Minden adat olvashatóan, fekete tintával, golyóstollal kerül beírásra a GCP szerint.

A próba archiválási ideje 5 év. Ez magában foglal minden tanulmányi adatbázist.

A vizsgálatba bevonandó betegek számát standard teljesítményszámítással számították ki, amely korábbi kísérleti adatokon alapul, amelyek arra utalnak, hogy 0,05-ös hibavalószínűség mellett 0,3-nál nagyobb hatásméret érhető el az ezzel a protokollal várt szóráson belül. Ez a becslések szerint a 0,95-ös teljesítmény 20%-kal marad el a begyűjtendő minták számától.

Elsődleges végpont: Statisztikai különbség (P<0,05) kimutatása a teszt és a rutin csoport minta TTP adatai között.

Statisztikai elemzési terv: Az alapadatok és a betegek áramlásának összefoglalása. A kutatók 200 beteg felvételét javasolják 9 hónapon keresztül. A kutatóhely a tuberkulózis kiválósági központja, és a kutatók teljes mértékben elvárják, hogy megfeleljenek ennek a résztvevői számnak. Ebben a vizsgálatban nem szerepel differenciált betegkezelés, és nem lesz szükség a betegek véletlenszerű besorolására a vizsgálaton belül.

A tesztmintákat azonban véletlenszerű utófeldolgozásnak vetik alá, hogy mind a három tenyésztőgépben (karban) bekerüljenek egy véletlenszámmal generált diagram (n=3) felhasználásával, amely korlátozva van, hogy minden egyes tesztkar azonos számot kapjon.

Ezt a tanulmányt teljes egészében az Innovate UK finanszírozásával finanszírozzák