Caratteristiche dei parametri immunologici del sangue del cordone ombelicale dei neonati (AOS)

Metodi di campionamento/Raccolta dati

Campioni: il siero (1-2 ml) dei neonati arruolati verrà raccolto dal sangue del cordone ombelicale (T0). I campioni seriali (0,5-1 ml) verranno raccolti in altri 3 momenti: T1= 4-7 giorni, T2=10-14 giorni, T3= 20-30 giorni. Questi possono essere prelevati all'inizio di qualsiasi valutazione della sepsi, o prima di qualsiasi trasfusione di PRBC o quando verrà sprecato sangue ≥0,5 ml. Queste raccolte hanno lo scopo di analizzare l'ambiente immunologico nei neonati nelle varie fasi dell'adattamento immunitario natale e postnatale:

1. livelli basali da un ambiente relativamente privilegiato (sangue cordonale T0)
2. picco di risposta immunogenica dopo l'esposizione prenatale (T1)
3. plateau della risposta immunogenica dopo l'esposizione perinatale (T2)
4. stato di equilibrio relativo con la flora circostante (T3)

Raccolta dati:

Statistiche di riferimento all'arruolamento: peso alla nascita, valutazione ostetrica dell'età gestazionale, modalità di parto, presenza di travaglio, presenza di IAI, ROM, tipo e durata di antibiotici intrapartum. Raccoglieremo anche dati a 60 DOL, dimissione o morte su qualsiasi bambino arruolato.

Misure:

Laboratorio sperimentale:

Citochine- Ogni campione avrà plasma analizzato da Luminex (Biorad) per determinare i profili delle citochine: IL-2, IL-6, IL-8, IL-13, MIP1b, MCP1, IL-1b, IL-4, IL-5 , IL-7, IL-10, IL-12p70, IL-17, GMCSF, IFN-gamma e TNF-alfa. Sono state eseguite curve standard per ciascuna misurazione delle citochine per determinare i limiti di rilevamento superiore e inferiore.

L'ASC- sarà quantificato mediante saggio immunospot legato all'enzima (ELISPOT) per specifici isotipi IgA, IgM e IgG. Saranno anche collegati a 3 particolari agenti immunogenici: GBS, Candida e CoNS.

Laboratorio clinico:

I globuli bianchi totali e il rapporto di banda verranno eseguiti nel corso di cure di routine per questi neonati. Questo non è un campione aggiuntivo.

gravi infezioni batteriche diverse dalla sepsi (meningite, IVU)

• Corso di studio- 0-30 giorni di vita per campionamento. 0-60 giorni di vita per la raccolta dei dati.
• Iscrizione- ricoveri consecutivi di terapia intensiva neonatale secondo i seguenti criteri

Inclusione:

Ammesso in terapia intensiva neonatale presso MHCH

• 1500gm o ≤ 32 settimane GA Dalla nascita a <31 giorni di vita al momento dell'arruolamento

Esclusione:

Immunodeficienza nota o sospetta (incluso HIV materno o altra infezione congenita nota) Anomalia congenita maggiore nota

• Il reclutamento includerà ogni bambino idoneo da parte dell'investigatore principale o dei co-investigatori. Assumendo un'incidenza di LOS di ~25% e EOS di ~1-3%, una potenza dell'80%, dovremmo arruolare 50 neonati. Ciò coincide con gli studi precedenti che hanno valutato la risposta dell'ASC nei neonati e quelli che hanno valutato le citochine nel sangue del cordone ombelicale e dopo la nascita.
• Rischi noti Non ci saranno ulteriori prelievi di sangue. Ci sarà la raccolta di un maggior volume di sangue (ulteriori 0,5 ml-1,0 ml a seconda della taglia del bambino) durante le indicazioni cliniche per i prelievi di sangue. Nessuna decisione clinica sarà presa sulla base dei dati ottenuti.