Charakteristika imunologických parametrů pupečníkové krve u kojenců (AOS)

Metody vzorkování/sběr dat

Vzorky: Sérum (1-2ml) od zapsaných kojenců bude odebráno z pupečníkové krve (T0). Sériové vzorky (0,5-1 ml) budou odebrány ve 3 jiných časech: T1= 4-7 dnů, T2=10-14 dnů, T3= 20-30 dnů. Ty mohou být odebrány při zahájení jakéhokoli vyšetření sepse nebo před jakoukoli transfuzí PRBC nebo když dojde ke ztrátě jakékoli krve ≥ 0,5 ml. Tyto sbírky jsou určeny k analýze imunologického prostředí u kojenců v různých fázích natální a postnatální imunitní adaptace:

1. základní hladiny z relativně privilegovaného prostředí (pupečníková krev T0)
2. vrchol imunogenní odpovědi po prenatální expozici (T1)
3. plató imunogenní odpovědi po perinatální expozici (T2)
4. relativní rovnovážný stav s okolní flórou (T3)

Sběr dat:

Základní statistiky při zápisu: porodní hmotnost, porodnické hodnocení gestačního věku, způsob porodu, přítomnost porodu, přítomnost IAI, ROM, typ a délka intrapartálních antibiotik, Při každém odběru vzorků budou data shromážděna prostřednictvím přehledu grafu každého dítěte. Budeme také shromažďovat údaje o 60 DOL, propuštění nebo úmrtí o každém zapsaném kojenci.

Měření:

Experimentální laboratoř:

Cytokiny – každý vzorek bude mít plazmu analyzovanou Luminexem (Biorad), aby se určily profily cytokinů: IL-2, IL-6, IL-8, IL-13, MIP1b, MCP1, IL-1b, IL-4, IL-5 IL-7, IL-10, IL-12p70, IL-17, GMCSF, IFN-gama a TNF-alfa. Pro stanovení horní a dolní meze detekce byly provedeny standardní křivky pro každé měření cytokinů.

ASC- bude kvantifikováno pomocí enzymové imunospotové analýzy (ELISPOT) pro specifické izotypy IgA, IgM a IgG. Budou také spojeny se 3 konkrétními imunogenními činidly: GBS, Candida a CoNS.

Klinická laboratoř:

Celková WBC a poměr pásem budou probíhat v rámci rutinní péče o tyto děti. Toto není dodatečný vzorek.

závažné bakteriální infekce jiné než sepse (meningitida, UTI)

• Průběh studie - 0-30 dní života pro odběr vzorků. 0-60 dní životnosti pro sběr dat.
• Zápis – po sobě jdoucí přijetí na NICU podle následujících kritérií

Zařazení:

Přijat na NICU na MHCH

• 1500 gm nebo ≤ 32 týdnů GA od narození do <31 dnů života v době zápisu

Vyloučení:

Známá nebo suspektní imunodeficience (včetně HIV u matky nebo jiné známé vrozené infekce) Známá závažná vrozená anomálie

• Nábor Zahrne každé způsobilé dítě primárním zkoušejícím nebo spoluřešiteli. Za předpokladu výskytu LOS ~ 25 % a EOS ~ 1-3 %, tedy mocniny 80 %, bychom měli zapsat 50 kojenců. To se shoduje s předchozími studiemi hodnotícími odpověď ASC u novorozenců a studiemi hodnotícími cytokiny v pupečníkové krvi a postnatálně.
• Známá rizika Nebudou se konat žádné další odběry krve. Bude odebrán větší objem krve (dalších 0,5ml-1,0ml v závislosti na velikosti kojence) během klinických indikací k odběrům krve. Na základě získaných údajů nebudou učiněna žádná klinická rozhodnutí.