Cioccolato fondente e funzione piastrinica negli esseri umani
Effetti acuti del consumo di cioccolato fondente arricchito in flavan-3-oli sulla funzione piastrinica e sul proteoma piastrinico
Le malattie cardiovascolari sono una delle principali cause di mortalità in tutto il mondo e responsabili di un decesso su tre a livello globale. Una caratteristica principale delle malattie cardiovascolari è l'alterazione del flusso sanguigno e la formazione di coaguli di sangue. Le piastrine sono cellule formatrici di coaguli responsabili della prevenzione del sanguinamento. Tuttavia, in condizioni di malattia possono essere eccessivamente attivate, promuovendo la formazione di coaguli di sangue e il blocco dei vasi sanguigni.
Il consumo di diete ricche di frutta e verdura riduce la mortalità per malattie cardiovascolari attraverso una serie di meccanismi, tra cui la prevenzione della coagulazione e dell'aggregazione piastrinica. Ci sono alcune prove che suggeriscono che l'aggregazione piastrinica può essere modulata attraverso un gruppo di composti noti come flavan-3-oli, che si trovano in vari alimenti, e specialmente nel cacao. Tuttavia, i meccanismi con cui tali composti influenzano la funzione piastrinica non sono ancora del tutto chiari. Abbiamo progettato uno studio sull'uomo per valutare i meccanismi mediante i quali i flavan-3-oli del cacao influenzano positivamente la funzione piastrinica e il proteoma piastrinico.
Panoramica dello studio
Stato
Condizioni
Descrizione dettagliata
Le malattie cardiovascolari (CVD) sono una causa primaria di morte prematura in tutto il mondo, con tassi di incidenza nel Regno Unito, in particolare in Scozia, tra i più alti al mondo. Pertanto, l'identificazione dei componenti dietetici che prevengono più efficacemente le malattie cardiovascolari è potenzialmente di ampio beneficio per la salute pubblica.
Il consumo di diete ricche di prodotti a base vegetale protegge dallo sviluppo di malattie cardiovascolari. Tali effetti sono stati attribuiti in parte ai polifenoli, che sono metaboliti secondari non nutritivi ma potenzialmente bioattivi ubiquitari che si trovano in frutta, verdura, erbe, spezie, tè e vini. Si ritiene che gli effetti benefici dei polifenoli sulla CVD siano mediati, almeno in parte, pur migliorando la funzione piastrinica. Almeno 10 studi sull'intervento sull'uomo hanno trovato un consistente e robusto effetto benefico dei prodotti del cacao sulla funzione piastrinica, ma sfortunatamente tutti questi studi hanno utilizzato solo uno o due metodi per valutare la funzione piastrinica, ottenendo quindi solo informazioni limitate sul complesso comportamento fisiologico delle piastrine. Inoltre, nessuno di questi studi ha valutato i potenziali meccanismi attraverso i quali i flavan-3-oli possono inibire la funzione piastrinica. Schram et al. hanno dimostrato che il consumo di cioccolato ricco di flavan-3-oli e dei loro oligomeri (procianidine) porta ad un aumento della produzione di prostaciclina, un forte inibitore piastrinico. Questa scoperta è stata osservata anche quando le cellule endoteliali aortiche sono trattate con procianidine in vitro. Pertanto, la stimolazione della produzione di prostaciclina nelle cellule endoteliali può riflettere un percorso attraverso il quale i flavan-3-oli inibiscono indirettamente l'attivazione piastrinica. Molti altri potenziali meccanismi sono discussi in letteratura, ma finora l'evidenza di tali meccanismi è limitata o inesistente.
In questo studio valutiamo gli effetti del consumo di cioccolato arricchito in flavan-3-oli sulla funzione piastrinica misurando non solo l'aggregazione piastrinica, ma anche la coagulazione in vitro e l'attivazione piastrinica in esseri umani sani. Inoltre, esaminiamo gli effetti del consumo di flavan-3-oli sulla regolazione del proteoma piastrinico per chiarire i percorsi attraverso i quali questi composti bioattivi del cacao influenzano la funzione piastrinica.
IPOTESI
Il consumo acuto di una moderata quantità di cioccolato fondente arricchito in flavan-3-oli provoca una diminuzione dell'attivazione e dell'aggregazione piastrinica diminuendo i livelli di trombossano A2 prodotto dalle cellule endoteliali.
OBIETTIVI
L'obiettivo principale dello studio proposto è determinare se il consumo di 60 g di cioccolato fondente arricchito in flavan-3-oli determini una diminuzione dell'attivazione e dell'aggregazione piastrinica diminuendo i livelli di trombossano A2, oltre a valutare quali altri meccanismi potrebbero essere coinvolti.
Gli obiettivi specifici dello studio proposto sono determinare:
- se l'assunzione acuta di 60 g di cioccolato fondente arricchito in flavan-3-oli, rispetto al cioccolato fondente standard a basso contenuto di flavan-3-oli e al cioccolato bianco che non contiene flavan-3-oli, influenzi l'aggregazione piastrinica, la formazione di trombossano A2 dopo l'aggregazione, tempo di sanguinamento in vitro, espressione di P-selectina e attivazione del recettore del fibrinogeno;
- se e come l'assunzione acuta di 60 g di cioccolato fondente arricchito in flavan-3-oli, rispetto al cioccolato fondente standard e al cioccolato bianco, influenzi il proteoma piastrinico e quindi potenziali nuovi biomarcatori della funzione piastrinica, nonché i livelli proteici di anti- enzimi ossidanti;
- identità e concentrazioni di flavan-3-oli e dei loro metaboliti nel plasma e/o nelle urine 2 e 6 ore dopo l'assunzione acuta di 60 g di cioccolato fondente arricchito in flavan-3-oli, rispetto al cioccolato fondente standard e al cioccolato bianco.
Tipo di studio
Iscrizione (Effettivo)
Fase
- Non applicabile
Contatti e Sedi
Luoghi di studio
-
-
Aberdeenshire
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Aberdeen, Aberdeenshire, Regno Unito, AB21 9SB
- University of Aberdeen Rowett Institute of Nutrition and Health
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Criteri di partecipazione
Criteri di ammissibilità
Età idonea allo studio
Accetta volontari sani
Sessi ammissibili allo studio
Descrizione
Criterio di inclusione:
- Volontari sani di sesso maschile e/o femminile, di età compresa tra i 18 ei 70 anni
Criteri di esclusione:
I soggetti sono esclusi se:
- stanno assumendo aspirina o farmaci contenenti aspirina, altri farmaci antinfiammatori o qualsiasi farmaco o medicinale a base di erbe noto per alterare la funzione piastrinica o il sistema emostatico in generale (senza un periodo minimo di sospensione di un mese)
- stanno assumendo oli di pesce o olio di enotera o integratori vitaminici liposolubili nelle ultime 4 settimane
- sta assumendo qualsiasi medicinale noto per influenzare il metabolismo dei lipidi e/o del glucosio
- stanno assumendo una terapia ormonale sostitutiva
- hanno segni clinici noti di diabete, ipertensione, malattia renale, epatica, ematologica, disturbi gastrointestinali, disturbi endocrini, malattia coronarica, infezione o cancro
- soffrono di abuso di alcol o di qualsiasi altra sostanza o hanno disturbi alimentari
- di solito consumano una dieta vegetariana
- hanno un BMI inferiore a 18 o superiore a 35 kg/mq
- stanno intraprendendo più di 6 ore di esercizio vigoroso a settimana
- stanno avendo un ciclo mestruale anormale
- sono incinte
- soffrono di un'allergia al cacao oa uno qualsiasi degli ingredienti contenuti in una delle tavolette di cioccolato
- hanno donato mezzo litro di sangue a scopo trasfusionale nell'ultimo mese
- hanno un basso numero di piastrine (< 170 x 10E09/L)
- hanno vene non idonee al prelievo di sangue e/o alla cannulazione
- il loro ematocrito è inferiore al 40% per i maschi e al 35% per le femmine
- la loro emoglobina è inferiore a 130 g/L per i maschi e 115 g/L per le femmine
- non sono in grado di recarsi da soli al Rowett Institute of Nutrition and Health, Aberdeen per ciascuno degli interventi
Piano di studio
Come è strutturato lo studio?
Dettagli di progettazione
- Scopo principale: Prevenzione
- Assegnazione: Randomizzato
- Modello interventistico: Assegnazione incrociata
- Mascheramento: Separare
Armi e interventi
Gruppo di partecipanti / Arm |
Intervento / Trattamento |
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Sperimentale: 42 volontari sani - crossover
Consumo acuto di tre interventi (60 g di cioccolato fondente arricchito in flavan-3-oli, 60 g di cioccolato fondente standard o 60 g di cioccolato bianco) in tre giorni separati (a distanza di almeno 2 settimane) in ordine casuale. Misurazioni post-prandiali a t = 0 h, t = 2 h e t = 6 h. |
Consumo acuto (entro 15 minuti) di 60 g di cioccolato contenente ~900 mg di flavan-3-oli totali e procianidine.
Altri nomi:
Consumo acuto (entro 15 minuti) di 60 g di cioccolato contenente ~400 mg totali di flavan-3-oli e procianidine.
Consumo acuto (entro 15 minuti) di 60 g di cioccolato bianco senza flavan-3-oli e procianidine.
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Cosa sta misurando lo studio?
Misure di risultato primarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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Cambiamento nell'aggregometria della trasmissione della luce del plasma ricco di piastrine
Lasso di tempo: Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Misure di risultato secondarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
|---|---|---|
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Modifica del tempo di sanguinamento ex vivo utilizzando il Platelet Function Analyzer-100 (PFA-100)
Lasso di tempo: Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Utilizzo di cartucce rivestite di collagene-epinefrina.
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Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Modifica dell'espressione della P-selectina e attivazione del recettore del fibrinogeno mediante citometria a flusso
Lasso di tempo: Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Livelli di flavan-3-oli e dei loro metaboliti nel plasma e nelle urine
Lasso di tempo: Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Alterazioni del proteoma piastrinico
Lasso di tempo: Post-prandiale, 2 ore dopo l'ingestione di cioccolato
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Utilizzando l'elettroforesi su gel 2D e l'identificazione LC-MS/MS delle proteine.
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Post-prandiale, 2 ore dopo l'ingestione di cioccolato
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Cambiamenti nella produzione di trombossano A2 indotti da ADP e TRAP
Lasso di tempo: Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Utilizzo del test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) nel plasma dopo l'aggregazione piastrinica
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Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Livelli di prostacicline e/o leucotrieni nel plasma
Lasso di tempo: Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Utilizzo di cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC) e/o test immunologici
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Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Fenolici totali nelle urine
Lasso di tempo: Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Utilizzando il saggio di Folin-Ciocalteu
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Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Catechine totali nelle urine
Lasso di tempo: Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Utilizzando un adattamento del dosaggio DMACA
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Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Creatinina urinaria
Lasso di tempo: Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Utilizzando un analizzatore chimico selettivo Thermo KONELAB 30 (Thermo Scientific, Hertfordshire, Regno Unito) e il relativo kit Da utilizzare per la normalizzazione dei flavan-3-oli urinari e dei fenoli totali da campioni di urina spot. |
Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Analisi del contenuto di flavan-3-olo e procianidina nei cioccolatini di studio
Lasso di tempo: All'inizio (aprile 2009) e alla fine (ottobre 2009) del periodo di intervento
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Utilizzando un metodo HPLC
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All'inizio (aprile 2009) e alla fine (ottobre 2009) del periodo di intervento
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1H-NMR non mirato di campioni di plasma e urina
Lasso di tempo: Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Stabilire un profilo metabolico - marcatori di assunzione e potenziali effetti sul metabolismo dell'ospite
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Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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LC-MS non mirato di campioni di urina
Lasso di tempo: Post-prandiale, poco prima e 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Stabilire un profilo metabolico - marcatori di assunzione e potenziali effetti sul metabolismo dell'ospite
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Post-prandiale, poco prima e 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Marcatori di stress ossidativo nel plasma
Lasso di tempo: Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Post-prandiale, fino a 6 ore dopo il consumo di cioccolato
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Analisi degli acidi grassi dei cioccolatini di studio
Lasso di tempo: Poco dopo la fine del periodo di intervento (febbraio 2009)
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Utilizzando l'analisi dell'estere metilico degli acidi grassi (FAME) e un approccio gascromatografico
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Poco dopo la fine del periodo di intervento (febbraio 2009)
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Collaboratori e investigatori
Sponsor
Collaboratori
Investigatori
- Investigatore principale: Baukje de Roos, MSc PhD, University of Aberdeen Rowett Institute of Nutrition and Health
Pubblicazioni e link utili
Pubblicazioni generali
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- Bordeaux B, Yanek LR, Moy TF, White LW, Becker LC, Faraday N, Becker DM. Casual chocolate consumption and inhibition of platelet function. Prev Cardiol. 2007 Fall;10(4):175-80. doi: 10.1111/j.1520-037x.2007.06693.x.
- de Roos B, Duthie SJ, Polley AC, Mulholland F, Bouwman FG, Heim C, Rucklidge GJ, Johnson IT, Mariman EC, Daniel H, Elliott RM. Proteomic methodological recommendations for studies involving human plasma, platelets, and peripheral blood mononuclear cells. J Proteome Res. 2008 Jun;7(6):2280-90. doi: 10.1021/pr700714x. Epub 2008 May 20.
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- Wang-Polagruto JF, Villablanca AC, Polagruto JA, Lee L, Holt RR, Schrader HR, Ensunsa JL, Steinberg FM, Schmitz HH, Keen CL. Chronic consumption of flavanol-rich cocoa improves endothelial function and decreases vascular cell adhesion molecule in hypercholesterolemic postmenopausal women. J Cardiovasc Pharmacol. 2006;47 Suppl 2:S177-86; discussion S206-9. doi: 10.1097/00005344-200606001-00013.
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Parole chiave
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Altri numeri di identificazione dello studio
- 600
- 09/002 (Altro identificatore: Rowett Human Studies Ethical Review Panel)
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