人类的黑巧克力和血小板功能
食用富含 Flavan-3-ols 的黑巧克力对血小板功能和血小板蛋白质组的急性影响
心血管疾病是全球死亡的主要原因,占全球死亡人数的三分之一。 心血管疾病的一个主要特征是血流受损和血块形成。 血小板是负责预防出血的凝块形成细胞。 然而,在疾病情况下,它们可能会过度激活,促进血块和血管阻塞。
食用富含水果和蔬菜的饮食可通过多种机制降低心血管疾病的死亡率,包括预防血小板凝固和聚集。 有一些证据表明,血小板聚集可能通过一组称为黄烷 3 醇的化合物来调节,这些化合物存在于各种食物中,尤其是可可中。 然而,这些化合物影响血小板功能的机制尚不完全清楚。 我们设计了一项人体研究,评估可可中的 flavan-3-ols 对血小板功能和血小板蛋白质组产生有益影响的机制。
研究概览
详细说明
心血管疾病 (CVD) 是全世界过早死亡的主要原因,英国,尤其是苏格兰的发病率是全球最高的。 因此,确定最有效预防 CVD 的膳食成分可能具有广泛的公共健康益处。
食用富含植物性产品的饮食可以防止 CVD 的发展。 这种影响部分归因于多酚,它们没有营养,但具有潜在的生物活性,在水果、蔬菜、草药、香料、茶和葡萄酒中普遍存在。 多酚对 CVD 的有益作用被认为至少部分是通过改善血小板功能介导的。 至少 10 项人类干预研究发现可可制品对血小板功能具有一致且强大的有益作用,但不幸的是,所有这些研究仅使用一种或两种方法来评估血小板功能,因此对血小板复杂的生理行为的了解有限。 此外,这些研究均未评估 flavan-3-ols 可能抑制血小板功能的潜在机制。 施拉姆等人。已经表明,食用富含黄烷 3 醇及其低聚物(原花青素)的巧克力会导致前列环素(一种强血小板抑制剂)的产生增加。 当主动脉内皮细胞在体外用原花青素处理时也观察到了这一发现。 因此,刺激内皮细胞产生前列环素可能反映了一种途径,通过这种途径,flavan-3-ols 间接抑制了血小板活化。 文献中讨论了许多其他潜在的机制,但到目前为止,此类机制的证据有限或不存在。
在这项研究中,我们不仅通过测量血小板聚集,而且通过测量健康人的体外凝血和血小板活化来评估食用富含黄烷-3-醇的巧克力对血小板功能的影响。 此外,我们检查了食用黄烷 3 醇对血小板蛋白质组调节的影响,以阐明这些具有生物活性的可可化合物影响血小板功能的途径。
假设
急性摄入适量富含黄烷-3-醇的黑巧克力会降低内皮细胞产生的血栓烷 A2 水平,从而导致血小板活化和聚集减少。
目标
拟议研究的主要目的是确定食用 60 克富含黄烷-3-醇的黑巧克力是否会通过降低血栓烷 A2 水平来降低血小板活化和聚集,并评估可能涉及的其他机制。
拟议研究的具体目标是确定:
- 与不含黄烷 3 醇的标准黑巧克力和不含黄烷 3 醇的白巧克力相比,急性摄入富含黄烷 3 醇的 60 克黑巧克力是否会影响血小板聚集,聚集时凝血恶烷 A2 的形成,体外出血时间、P-选择素表达和纤维蛋白原受体激活;
- 与标准黑巧克力和白巧克力相比,急性摄入富含黄烷-3-醇的 60 克黑巧克力是否以及如何影响血小板蛋白质组,从而影响血小板功能的潜在新生物标志物,以及抗氧化酶;
- 与标准黑巧克力和白巧克力相比,急性摄入 60 克富含黄烷 3 醇的黑巧克力后 2 小时和 6 小时,黄烷 3 醇及其代谢物在血浆和/或尿液中的特性和浓度。
研究类型
注册 (实际的)
阶段
- 不适用
联系人和位置
学习地点
-
-
Aberdeenshire
-
Aberdeen、Aberdeenshire、英国、AB21 9SB
- University of Aberdeen Rowett Institute of Nutrition and Health
-
-
参与标准
资格标准
适合学习的年龄
接受健康志愿者
有资格学习的性别
描述
纳入标准:
- 健康的男性和/或女性志愿者,年龄在 18 至 70 岁之间
排除标准:
如果出现以下情况,受试者将被排除在外:
- 他们正在服用阿司匹林或含阿司匹林的药物、其他抗炎药或任何已知会改变血小板功能或一般止血系统的药物或草药(没有至少一个月的清除期)
- 他们在过去 4 周内服用鱼油或月见草油,或脂溶性维生素补充剂
- 他们正在服用任何已知会影响脂质和/或葡萄糖代谢的药物
- 他们正在接受激素替代疗法
- 他们有任何已知的糖尿病、高血压、肾病、肝病、血液病、胃肠道疾病、内分泌失调、冠心病、感染或癌症的临床症状
- 他们患有酒精或任何其他药物滥用或饮食失调
- 他们通常吃素
- 他们的 BMI 低于 18 或高于 35 公斤/平方米
- 他们每周进行超过 6 小时的剧烈运动
- 他们的月经周期不正常
- 他们怀孕了
- 他们对可可或任一巧克力棒中所含的任何成分过敏
- 他们在上个月内一直在为输血目的献出一品脱血液
- 他们的血小板计数低 (< 170 x 10E09/ L)
- 他们有不适合采血和/或插管的静脉
- 他们的血细胞比容男性低于 40%,女性低于 35%
- 他们的血红蛋白男性低于 130 g/ L,女性低于 115 g/ L
- 他们无法独自前往阿伯丁的 Rowett 营养与健康研究所进行每项干预措施
学习计划
研究是如何设计的?
设计细节
- 主要用途:预防
- 分配:随机化
- 介入模型:交叉作业
- 屏蔽:单身的
武器和干预
参与者组/臂 |
干预/治疗 |
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实验性的:42名健康志愿者-交叉
在不同的三天(至少相隔 2 周)随机服用三种干预措施(60 克富含黄烷-3-醇的黑巧克力、60 克标准黑巧克力或 60 克白巧克力)。 在 t = 0 小时、t = 2 小时和 t = 6 小时的餐后测量。 |
急性食用(15 分钟内)60 克巧克力,其中含有约 900 毫克总黄烷-3-醇和原花青素。
其他名称:
急性食用(15 分钟内)60 克巧克力,其中含有约 400 毫克总黄烷-3-醇和原花青素。
急性食用(15 分钟内)60 克不含黄烷-3-醇和原花青素的白巧克力。
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研究衡量的是什么?
主要结果指标
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
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富血小板血浆光透射聚集度的变化
大体时间:餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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次要结果测量
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
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使用 Platelet Function Analyzer-100 (PFA-100) 改变离体出血时间
大体时间:餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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使用胶原蛋白肾上腺素涂层药筒。
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餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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通过流式细胞术改变 P-选择素表达和纤维蛋白原受体的激活
大体时间:餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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血浆和尿液中黄烷-3-醇及其代谢物的水平
大体时间:餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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血小板蛋白质组的变化
大体时间:餐后,摄入巧克力后 2 小时
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使用 2D 凝胶电泳和 LC-MS/MS 鉴定蛋白质。
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餐后,摄入巧克力后 2 小时
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ADP 和 TRAP 诱导的血栓素 A2 产生的变化
大体时间:餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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血小板聚集后在血浆中使用酶联免疫吸附测定 (ELISA)
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餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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血浆中前列环素和/或白三烯的水平
大体时间:餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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使用高效液相色谱 (HPLC) 和/或免疫测定
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餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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尿总酚
大体时间:餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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使用 Folin-Ciocalteu 测定
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餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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尿中总儿茶素
大体时间:餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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使用 DMACA 测定的改编
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餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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尿肌酐
大体时间:餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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使用 Thermo KONELAB 30 选择性化学分析仪(Thermo Scientific,英国赫特福德郡)及其相应的套件 用于标准化尿黄烷-3-醇和尿样中的总酚类物质。 |
餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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研究巧克力中黄烷-3-醇和原花青素含量的分析
大体时间:干预期开始(2009 年 4 月)和结束(2009 年 10 月)
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使用 HPLC 方法
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干预期开始(2009 年 4 月)和结束(2009 年 10 月)
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血浆和尿液样本的非靶向 1H-NMR
大体时间:餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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建立代谢概况 - 摄入标志物和对宿主代谢的潜在影响
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餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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尿样的非靶向 LC-MS
大体时间:餐后、食用巧克力之前和之后 6 小时
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建立代谢概况 - 摄入标志物和对宿主代谢的潜在影响
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餐后、食用巧克力之前和之后 6 小时
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血浆中氧化应激的标志物
大体时间:餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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餐后,食用巧克力后最多 6 小时
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研究巧克力的脂肪酸分析
大体时间:干预期结束后不久(2009 年 2 月)
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使用脂肪酸甲酯 (FAME) 分析和气相色谱法
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干预期结束后不久(2009 年 2 月)
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合作者和调查者
合作者
调查人员
- 首席研究员:Baukje de Roos, MSc PhD、University of Aberdeen Rowett Institute of Nutrition and Health
出版物和有用的链接
一般刊物
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与本研究相关的术语
其他研究编号
- 600
- 09/002 (其他标识符:Rowett Human Studies Ethical Review Panel)
药物和器械信息、研究文件
研究美国 FDA 监管的药品
研究美国 FDA 监管的设备产品
在美国制造并从美国出口的产品
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