Caratteristiche cliniche e reperti istologici nella sindrome da dolore vescicale/cistite interstiziale (HistologyIC)

Tra il 2005 e il 2016, nel nostro Dipartimento 57 pazienti consecutivi sono stati sottoposti a cistoscopia in anestesia per classificare i casi sospetti di BPS/IC. I pazienti hanno riportato sintomi irritativi della vescica di lunga durata, tra cui urgenza, frequenza diurna di sette o più episodi, nicturia e dolore al basso addome, alla parte bassa della schiena, alla vagina o al perineo durante il riempimento o dopo la minzione. Sono state escluse diagnosi alternative come l'infezione del tratto urinario (UTI). Le malattie confondibili sono state escluse da anamnesi completa, esame clinico, analisi delle urine e imaging.

Attraverso una dettagliata anamnesi abbiamo considerato il tempo di insorgenza dei sintomi, la frequenza delle minzioni, la presenza di patologie associate. A tutti i pazienti è stato somministrato lo stesso questionario (O'Leary-Sant Interstitial Cystitis Symptom and Problem Index) (19), compilato al momento della biopsia vescicale.

Per quanto riguarda la valutazione dei punteggi ICSI-ICPI abbiamo considerato valori rilevanti significativi quelli ≥ 12.

Tutti i pazienti sono stati sottoposti a cistoscopia con idrodistensione in anestesia generale (90%) o locoregionale. Un cistoscopio rigido con un Ch. È stato utilizzato il calibro 22, la soluzione di mannitolo è stata utilizzata come fluido di riempimento e l'altezza dell'infusione era di 80 cm sopra la sinfisi pubica. Durante il riempimento la vescica è stata continuamente ispezionata. Alla massima capacità, la distensione è stata mantenuta fino all'arresto del riempimento spontaneo e al raggiungimento della massima capacità. A questo punto la vescica è stata drenata e le pareti e la mucosa della vescica sono state attentamente esaminate. La vescica è stata quindi riempita di nuovo a circa metà capacità e sono state prelevate almeno tre biopsie profonde, compreso il muscolo detrusore, da quelle aree con le lesioni più evidenti della parete vescicale.

Tutte le biopsie sono state quindi fissate in formalina al 4% e inviate al patologo per l'esame. È stato specificamente richiesto di valutare la presenza di denudazione uroteliale, infiltrato infiammatorio, conta dei mastociti nella sottomucosa e nel detrusore, presenza di fibrosi intrafascicolare e sanguinamento sottomucoso. Per la valutazione della mastocitosi detrusoriale è stato utilizzato un cut-off di 28 mastociti/mm2.

Studio morfologico I campioni bioptici sono stati tagliati in sezioni spesse 5 μm, quindi colorati con i seguenti reagenti per la valutazione morfologica: Hematoxylin-Eosin, Giemsa e Masson Tricromic Stain. Questa procedura è stata eseguita da coloratori automatici (Leica, mod. ST5020 e mod. Autostainer® XL).

In ogni biopsia sono stati valutati i seguenti parametri, secondo le raccomandazioni riportate da Hanno et al. (20) e riportato in Tabella 1.

Se la biopsia non era di dimensioni adeguate (< 1 mm2 di larghezza), abbiamo deciso di valutare i parametri più affidabili, dando una risposta N.V. (Not Valuable) agli altri.

Tali parametri sono stati studiati in singolo cieco da due patologi indipendenti utilizzando microscopi ottici (Nikon, mod. Eclipse™ E400 e mod. Eclipse™ CI) e casi discordanti sono stati poi discussi congiuntamente.

Studi immunoistochimici Sono state eseguite reazioni immunoistochimiche con l'anticorpo monoclonale Dako anti-Human Mast-cell Tryptase (Clone AA1; IgG1, Kappa), alla diluizione 1:4000, al fine di evidenziare la componente mastocitaria dell'infiltrato infiammatorio, e quindi quantificare Esso. Secondo il protocollo seguito presso il Laboratorio di Immunoistochimica dell'Unità di Patologia è stato utilizzato l'immunocoloratore automatico Dako Omnis™.

Valutazione delle immunocolorazioni

Le reazioni sono state valutate utilizzando microscopi ottici (Nikon, mod. Eclipse™ E400 e mod. Eclipse™CI). Sono stati studiati i seguenti parametri:

• Numero di mastociti/mm2 di mucosa;
• Numero di mastociti/mm2 di sottomucosa;
• Numero di mastociti/mm2 dello strato detrusoriale. Per ottenere la massima precisione, è stata eseguita una valutazione in singolo cieco da parte di due patologi indipendenti; i casi discordanti o incerti venivano poi discussi congiuntamente.

Tutti i pazienti sono stati valutati retrospettivamente utilizzando le cartelle dei pazienti, è stato assegnato loro un punteggio compreso tra 0 e 5 in base alla presenza dei seguenti criteri (ogni criterio conta un punto): dolore, nicturia, capacità della vescica di 500 ml, glomerulazioni o fibrosi interfascicolare .