Sviluppo di un sistema di coltura emopoietica in vitro e applicazione alle sindromi mielodisplastiche. (HEMASTEM)

Le sindromi mielodisplastiche (SMD) sono emopatie mieloidi caratterizzate da emopoiesi clonale inefficace, citopenie periferiche e predisposizione all'insorgenza di leucemie mieloidi acute. La loro diagnosi comporta una valutazione citologica del midollo, mentre la loro prognosi, oltre a fattori estrinseci dipendenti dal paziente stesso (età, comorbilità), fattori intrinseci. La valutazione citologica è soggetta ad una certa soggettività in quanto qualitativa e la diagnosi è talvolta difficoltosa in assenza di marker di clonalità. Sempre più studi sottolineano l'interesse della citometria a flusso (CMF) nella diagnosi di SMD: ricercando aberrazioni qualitative e/o quantitative dell'espressione dei marcatori di membrana, CMF permette di stabilire i punteggi Diagnosi che abbiamo messo in atto all'interno del laboratorio . Tuttavia, questi studi si basano su un modello statico che studia le caratteristiche fenotipiche dei pazienti in un dato momento ma non riflette realmente un'emopoiesi inefficace. Un modello dinamico per la riproduzione in vitro dell'emopoiesi sarebbe uno strumento innovativo per lo studio della SMD. Questo progetto mira a sviluppare e standardizzare un sistema di differenziazione in mezzo liquido di cellule staminali ematopoietiche (CSH) in cellule mature studiando ogni stadio della differenziazione in termini di proliferazione, apoptosi ed espressione fenotipica. Le HSC saranno ottenute mediante CD34 + sorting dal campione midollare alla diagnosi: lo sperimentatore studierà la proliferazione cellulare, l'apoptosi e l'acquisizione di marcatori di superficie, al fine di identificare le anomalie quantitative e qualitative associate alla differenziazione dei progenitori ematopoietici Smart. Ciò dovrebbe consentire di identificare fattori diagnostici e prognostici in termini di risposta al trattamento, acutismo e sopravvivenza.