Effetti del digiuno prolungato su microbioma e HDL

Screening e consenso:

Potenziali soggetti che superano il colloquio iniziale di screening telefonico (ad es. soddisfare i criteri di inclusione/esclusione) sarà ammesso allo studio e programmato per una visita di consenso. Alla visita di consenso, i soggetti che decidono di partecipare riceveranno una serie di questionari tra cui un questionario sull'anamnesi, un questionario sull'attività fisica e verrà chiesto di completare un registro della dieta di 3 giorni, da completare prima della visita di riferimento all'inizio dello studio. Le donne che acconsentiranno a partecipare saranno programmate per completare lo studio entro la fase follicolare e le mestruazioni del ciclo mestruale per evitare alterazioni confondenti nelle lipoproteine.

Visita di studio 1 (basale a digiuno):

Il giorno 1 del protocollo di studioi partecipanti allo studio si riferiranno al Ragle Human Nutrition Research Center situato nel campus UC Davis (1283 Academic Surge, University of California, Davis, a Davis CA 95616) per un prelievo di sangue notturno a digiuno di 12 ore e analisi antropometriche misurazioni alle 8:00 circa. Tutti i partecipanti che riscontreranno una glicemia a digiuno superiore o inferiore a 70-100 mg/dL verranno rimossi dallo studio. Ai partecipanti allo studio verrà fornito un kit per il test dei chetoni del sangue Precision Xtra per raccogliere i dati sui chetoni nel sangue durante il periodo di digiuno del protocollo di studio, un set di kit di raccolta delle feci per raccogliere campioni di feci durante il resto del protocollo di studio e dotato di un monitor di attività GoBe per tenere traccia dell'attività fisica per tutto il resto del protocollo di studio. L'uso, la cura e la conservazione corretti dei sistemi Precision Xtra, dei kit di raccolta delle feci e dei monitor GoBe verranno spiegati in dettaglio ai partecipanti allo studio durante la visita di riferimento. Ai partecipanti allo studio verrà fornito un diario alimentare di 24 ore per registrare l'assunzione di cibo e bevande durante il resto della giornata o potrebbe essere chiesto di tenere traccia della propria dieta utilizzando GB 360.

Visita di studio 2 (basale postprandiale):

Dopo la visita di base del giorno 1 del protocollo di studio, i partecipanti allo studio seguiranno le loro normali routine e mangeranno la loro dieta abituale ad libitum registrando l'assunzione dietetica durante il giorno. Questo registro alimentare verrà utilizzato per consentire ai partecipanti allo studio di imitare l'assunzione di cibo il giorno 1 durante il periodo di alimentazione del giorno 3 del protocollo di studio. I partecipanti allo studio mangeranno il loro ultimo pasto della giornata verso le 18:00. I campioni di sangue post-prandiale saranno raccolti 2 ore dopo l'ingestione di quest'ultimo pasto e processati immediatamente per produrre plasma del paziente e PBMC isolate da conservare per future analisi. Questi campioni post-prandiali costituiranno lo stato "Fed" di base di ciascun partecipante. I partecipanti allo studio eseguiranno anche la loro prima puntura di sangue per la misurazione dei chetoni utilizzando il Precision Xtra Monitor sotto istruzione e supervisione da parte del personale dello studio.

Digiuno:

Dopo l'ingestione del loro pasto finale, i partecipanti saranno sottoposti a un digiuno completo di 36 ore comprendente il giorno 2 e l'inizio del giorno 3 della prova senza modificare in altro modo la loro routine tipica, incluso bere caffè o tè (ma senza creme o dolcificanti di alcun tipo ), se questo fa parte della loro normale routine. L'ora dell'ingestione del pasto standardizzato sarà utilizzata come punto di partenza (0h) per le 36 ore continue di digiuno. È stato dimostrato che 36 ore di digiuno sono ben tollerate nei soggetti umani ed è stato scelto per questo studio in quanto rappresenta la quantità approssimativa di tempo in cui il digiuno verrebbe sperimentato durante un singolo ciclo di un regime di digiuno a giorni alterni. Pertanto, i risultati di questo studio potrebbero essere generalizzati per pianificare studi futuri sul digiuno a giorni alterni. I soggetti saranno incoraggiati a segnalare qualsiasi sensazione di vertigini, mal di testa, nausea o grave fame che potrebbero provare e, in base alla gravità delle loro condizioni, verrà consigliato se continuare o meno con il processo. Ai soggetti verrà chiesto di prendere piccole punture di sangue iniziando immediatamente dopo il risveglio il giorno 2 e successivamente ogni 3 ore coscienti utilizzando ilPrecision Xtra Blood Ketone Testing Kit per testare i livelli di chetoni nel sangue durante il periodo di digiuno. I livelli di chetoni ottenuti dalle punture di sangue verranno registrati automaticamente dal monitor Precision Xtra.

Visita di studio 3 (dopo 36 ore di digiuno):

A 36 ore di digiuno, all'incirca alle 8:00 del giorno 3, i soggetti torneranno al Ragle Center, eseguiranno una puntura di sangue finale per il monitoraggio dei chetoni da parte del Precision Xtra e i loro campioni di sangue verranno raccolti e nuovamente immediatamente processati e conservati per analisi future che costituiscono il Stato "a digiuno" per ogni partecipante.

Visita di studio 4 (Post 36h postprandiale):

Dopo il prelievo di sangue alla visita di studio 3, i partecipanti allo studio avranno libero accesso al cibo per tutto il resto della giornata e sarà loro chiesto di seguire una dieta identica all'assunzione dietetica che i partecipanti hanno registrato il giorno 1 nel loro diario alimentare di 24 ore. I soggetti mangeranno il loro ultimo pasto intorno alle 18:00. I campioni di sangue post-prandiale saranno raccolti 2 ore dopo l'ingestione di quest'ultimo pasto e processati immediatamente per produrre plasma del paziente e PBMC isolate da conservare per future analisi. Questi campioni post-prandiali costituiranno lo stato "Refed" di ogni partecipante. Dopo questo prelievo di sangue finale, il sistema Precision Xtra verrà raccolto, il GoBe rimosso e i dati sull'attività e sui chetoni raccolti durante il corso dello studio verranno trasferiti a un computer sicuro per l'analisi. La conformità al digiuno sarà determinata come 1) livelli di chetoni in aumento o costanti durante il periodo di digiuno di 36 ore e 2) l'assenza di cali significativi dei livelli di chetoni nel sangue, che indicherebbero l'assunzione di cibo e la non conformità.

Raccolta delle feci (giorni 1-3):

I partecipanti allo studio utilizzeranno i kit di raccolta delle feci forniti per raccogliere campioni di feci da ogni movimento intestinale durante l'intero corso dello studio. I campioni di feci saranno ottenuti dai partecipanti allo studio presso il Ragle Center il prima possibile dopo la raccolta iniziale da parte dei partecipanti allo studio, congelati e conservati a -80°C.