Tintura di Arnica per il Trattamento della Leishmaniosi Cutanea (ARNICA)

La tintura di arnica è un preparato topico a base della pianta legalmente autorizzata nei paesi della comunità europea, ed è inserita nel vademecun delle piante medicinali in Colombia. Il prodotto della ricerca è il fitoterapico commerciale ARNICA TINTURA Gehrlicher 100 mL prodotto da Gehrlicher Pharmazeutische Extrakte GmbH. (www. https://www.wer-zu-wem.de/firma/gehrlicher-extrakte.html). Il prodotto sarà importato dalla Germania attraverso l'Università di Munster (co-ricercatore del progetto).

Secondo la Farmacopea Europea, la soluzione è una tintura idroetanolica al 70% preparata dai fiori di Arnica montana L, e composta almeno allo 0,04% di lattoni sesquiterpenici. I lattoni sesquiterpenici (elenalina e 11-α-13 diidroelenalina) sono i costituenti responsabili della sua attività antinfiammatoria, queste molecole diminuiscono l'infiammazione mediata dal fattore di trascrizione NF-kB. Esistono altre proprietà dimostrate in letteratura come attività antiossidanti, antimicrobiche o insetticide.

Date le proprietà antinfiammatorie, cicatrizzanti, antiechemotiche, analgesiche e antinevralgiche della pianta, in uno studio precedente è stata valutata in vitro l'attività leishmanicida della tintura di arnica per amastigoti intracellulari di L. braziliensis e L. tropica. La tintura di arnica alla concentrazione di 4,8 mg/mL ha prodotto una diminuzione del carico parassitario (quantità di amastigoti intracellulari) rispettivamente del 91,9% e del 99,6% nelle cellule infettate da L. braziliensis e L. tropica. . Le concentrazioni massime efficaci medie (EC50) sono state determinate rispettivamente a 2,9 ± 0,13 e 2,7 ± 0,02 e con indici di selettività > 69 e > 74, rispettivamente per L. braziliensis e L. tropica. Questa attività è stata convalidata in studi in vivo su criceti infettati sperimentalmente con L. braziliensis. L'applicazione della tintura una volta al giorno per 30 giorni ha prodotto una guarigione di 60 e per il restante 40% dei criceti è stata osservata una riduzione di oltre l'80% delle lesioni (Robledo et al., 2018). Quando applicato una volta al giorno per 60 giorni, il 75% dei criceti è guarito e il restante 25% ha mostrato miglioramenti tra il 70 e il 96% per quanto riguarda le dimensioni della lesione prima del trattamento. Secondo le osservazioni effettuate, fa parte della naturale evoluzione del processo di guarigione che, durante le prime settimane di utilizzo del composto e fino alla fine del trattamento, si percepisca un appiattimento dei bordi, con intensificazione dell'eritema, che produce una sensazione Ottica di ingrandimento della lesione, che successivamente (dal giorno 28) dà luogo al processo di riepitelizzazione, leggermente più lento rispetto agli schemi sistemici tradizionali. La percentuale di epitelizzazione della/e lesione/i viene calcolata confrontando la dimensione dell'ulcera al basale con la dimensione osservata alla visita di follow-up.

La tintura di arnica non è citotossica sulle cellule epiteliali (Detroit) a qualsiasi concentrazione testata. Nelle cellule epatiche (HepG2) la tintura ha mostrato una leggera citotossicità quando valutata al 100%, con una percentuale di tossicità del 75%. Peso, aspetto clinico e dati comportamentali, nonché risultati dei test di ALT, fosfatasi alcalina, creatinina e urea; e gli studi istologici ottenuti dai test sui criceti hanno permesso di concludere che il contatto della cute ulcerata con il prodotto fino a 60 giorni non genera effetti tossici a livello locale (sito di applicazione) o a livello sistemico, quindi può essere considerato sicuro per l'uso. I test di corrosione e irritazione per valutare la tintura cutanea di arnica secondo le linee guida dell'OCSE suggeriscono che non è né corrosiva né irritante.

Sebbene sia difficile calcolare con precisione, è stato stimato che verranno utilizzate circa 2 gocce (80 µL) della soluzione per cm2 in ciascuna applicazione. Se consideriamo una dimensione media della lesione di 4 cm2, vengono utilizzati al massimo 320 uL X 3 volte al giorno X 45 o 30 giorni = 43.200 uL o 28.800 uL (equivalenti a 43,2 o 28,8 mL) per lesione.

1. Obiettivi principali

   • Valutare la sicurezza e la tollerabilità della tintura di arnica in soggetti con CL non complicata, misurando l'occorrenza e l'analisi della gravità degli AD locali e sistemici.
   • Valutare la risposta terapeutica della tintura di arnica in individui con CL non complicata, in base alla percentuale di individui con guarigione clinica iniziale al giorno 90.

   Regime 1: Tintura di arnica applicata 3 volte al giorno per 30 giorni (Gruppo 1: 4 settimane) Regime 2: Tintura di arnica applicata 3 volte al giorno per 45 giorni (Gruppo 2: 6 settimane)

2. Obiettivi secondari

   • Valutare la frequenza e la gravità degli eventi avversi associati all'uso della soluzione di tintura di arnica.
   • Valutare lo stato delle lesioni nel tempo, fino al 100% di epitelizzazione delle lesioni ulcerate e la percentuale di individui con il 100% di epitelizzazione delle lesioni non ulcerate nel tempo.
   • Valuta il tasso di ricaduta.