Immunomonitoraggio delle infezioni invasive da muffe (IMMUNOFIL)

Le malattie fungine invasive (IFD) causano ancora una sostanziale morbilità e mortalità. Sono quindi urgentemente necessari nuovi approcci terapeutici, in particolare per i pazienti che non rispondono al trattamento antifungino convenzionale. Una strategia per prevenire il fallimento del trattamento è migliorare le funzioni immunitarie degli ospiti immunocompromessi. Infatti, l’efficacia terapeutica degli antifungini è limitata senza l’aiuto della reattività immunitaria dell’ospite (Stevens et al., 2000). Poiché diversi studi hanno suggerito che le IFD sono associate a una risposta immunitaria dell'ospite Th1 compromessa, varie citochine sono state valutate nelle infezioni fungine sperimentali e umane. In particolare, l'aggiunta dell'IFNγ ricombinante è stata proposta come opzione terapeutica nei pazienti con IFD a prognosi sfavorevole con successo parziale. Più recentemente, è stato dimostrato che, quando le cellule T sono esposte ad antigeni persistenti e/o a segnali infiammatori dovuti ad un controllo inefficiente di infezioni persistenti, o nel contesto di tumori, si osserva un deterioramento delle loro funzioni, uno stato chiamato “esaurimento”. ". I percorsi molecolari coinvolti nell'esaurimento sono stati parzialmente decifrati, evidenziando l'importanza di molecole chiamate checkpoint immunitario come PD-1 o CTLA-4. Inoltre, è stato dimostrato che il blocco di queste molecole può invertire questo stato disfunzionale. Gli inibitori dei checkpoint immunitari (come gli anticorpi anti-PD1) sono diventati le armi più importanti in oncologia. Nelle malattie infettive, e più in particolare negli IFD, i dati sono molto più limitati. In modelli animali di diverse IFD, come aspergillosi, criptococcosi e istoplasmosi, la somministrazione ripetitiva di anticorpi monoclonali anti-PD-1 ha migliorato significativamente l'eliminazione dei funghi e la sopravvivenza degli animali infetti letalmente. Negli esseri umani, tre casi clinici, incluso uno pubblicato dal nostro team, hanno riportato l’efficacia della terapia anti-PD-1 combinata con IFN-γ nel trattamento degli IFD refrattari. Pertanto, invertendo l’esaurimento delle cellule T, il blocco del checkpoint immunitario rappresenta una prospettiva terapeutica per il trattamento dell’IFD.

L’uso di inibitori del checkpoint immunitario può, tuttavia, comportare effetti avversi gravi, in particolare autoimmuni fuori bersaglio, e dovrebbe essere attentamente bilanciato e monitorato. Di particolare importanza è lo sviluppo di strumenti che consentano l'identificazione dei pazienti che potrebbero trarre beneficio dall'immunoterapia, nonché la valutazione del timing ottimale di questi trattamenti innovativi. Pertanto, una migliore comprensione della risposta immunitaria dell’ospite è uno dei principali approcci per lo sviluppo di strategie antifungine nuove o migliorate per controllare gli IFD. Mancano dati longitudinali riguardanti l'evoluzione dell'espressione dei marcatori di esaurimento nelle cellule T dei pazienti trattati per una IFD.

L'obiettivo è caratterizzare meglio la risposta immunitaria adattativa diretta contro le muffe, in particolare l'espressione dei checkpoint immunitari, al fine di identificare i pazienti che potrebbero trarre beneficio dall'aggiunta dell'immunoterapia e il timing ottimale di tale strategia.

A questo scopo, i ricercatori includeranno pazienti adulti affetti da muffa IFD alla diagnosi o refrattari alla terapia convenzionale. Misureranno i marcatori di attivazione e di esaurimento sulle cellule T e sui monociti circolanti mediante citometria a flusso in tre punti temporali (arruolamento, giorno 14 e settimana 6). Inoltre, per i pazienti con aspergillosi o mucormicosi invasiva, valuterà la capacità di cellule T specifiche di produrre citochine Th1, Th2 e Th 17 e di proliferare dopo stimolazione antigenica specifica, in assenza e in presenza di un anticorpo anti-PD1 in vitro (4 colori FLUOROSPOT) in due momenti (arruolamento e settimana 6). Questi dati forniranno una valutazione longitudinale della risposta immunitaria antifungina. Saranno correlati alle malattie di base dei pazienti, al tipo di infezione da muffe (aspergillosi, mucormicosi, fusariosi o scedosporiosi), al trattamento ricevuto e all'esito. Questi risultati dovrebbero aiutare a identificare meglio i pazienti che potrebbero trarre beneficio dal trattamento aggiuntivo anti PD-1 e il momento ottimale per tale trattamento.