超低出生体重児における未熟児の遺伝的変異と感受性 (CLD)

未熟児慢性肺疾患 (CLD) は、極低出生体重 (VLBW) 乳児 (<1500gms) の 30 ～ 40% で診断され、この集団の死亡率と長期罹患率の主要な原因であり続けています。 壊死性腸炎 (NEC)、敗血症、動脈管開存症 (PDA)、脳室内出血 (IVH) などの他の疾患も、この集団の死亡率と罹患率に寄与しています。 NEC、CLD、および敗血症の病因における中心的な信条は、それぞれ腸、肺、および全身の損傷を誘発する危険因子の存在下で、微生物病原体によってもたらされる課題を克服するための宿主ゲノム調節免疫防御の失敗です。 トール様受容体 (TLR) は、自然免疫系の認識およびエフェクター アームとして機能する病原体認識受容体です。 未熟児は主に宿主の防御を先天性免疫系に依存しているため、TLR の低形成遺伝的変異が CLD や敗血症などの未熟児の病気に対する感受性を高めるという仮説を立てています。肺は、血液や気管吸引液などの生体液に分泌されるサイトカイン、マイクロ RNA (miRNA)、ペプチドなどのバイオマーカーのレベルに反映される可能性があります。 炎症のリスクを高めたり、修復や成長を低下させたりする遺伝子変異も、これらのバイオマーカーのレベルの変化に関連している可能性があります。 バイオマーカーと遺伝子バリアントを一緒に測定することで、これらの未熟児合併症の早期予測因子の精度を高めることができます。 生体液中のバイオマーカーの測定は、現時点では遺伝子配列決定よりも短いターンアラウンドタイムで行うことができます。 バイオマーカーは、疾患の重症度と治療への反応の長期的な変化を提供することもできます。 新しいマルチプレックス アッセイは、非常に少量の体液中のバイオ マーカーのレベルを測定することを可能にします。 これらの補完的な強みにより、遺伝子配列決定とバイオマーカー検出は、未熟児の早期発見と疾患進行評価のための理想的な 1-2 アプローチになります。 私たちの仮説は、4 つの特定の目的で VLBW 乳児でテストされます。 CLDのリスク増加; (2) TLR4、TLR2、TLR9、MyD88 およびその他の自然免疫遺伝子の新しい遺伝子変異が未熟児の CLD またはその他の疾患のリスクを高めるかどうかを DNA 配列決定によって検出すること。 (3) 遺伝子配列アプローチにより、他の修復および成長遺伝子のバリアントが、CLD、NEC、敗血症、PDA、IVH などの未熟児に影響を与える疾患に対する感受性を変化させるかどうかを特定する。 （4）同じ血液サンプルからの血清中のサイトカイン、miRNA、およびその他のバイオマーカーレベルの変化が、未熟児疾患のリスクを認識する上で追加の予測値を提供できるかどうか。 CLD (受胎後 36 週齢での酸素要求量)、NEC、敗血症、PDA、または IVH を発症する VLBW 乳児はケースとして機能し、対象の疾患を発症しない VLBW 乳児はコントロールとして機能します。 同意が得られた後、DNA分析のために0.5ccの血液サンプルが登録された乳児から留置カテーテルまたはヒールスティックを介して収集されます。 ＴＬＲ４（Ａｓｐ２９９Ｇｌｙ、Ｔｈｒ３９９Ｉｌｅ）ＴＬＲ２（Ａｒｇ７５３Ｇｌｎ）およびＴＬＲ５（Ａｒｇ３９２ＳＴＯＰ）ＳＮＰは、市販のプライマーを使用する多重単一塩基伸長ベースの技術を使用して評価される。 これらの対象遺伝子の新しい遺伝的変異や、NEC に関連すると提案されているその他のバリアントは、従来のサンガーまたは次世代 DNA シーケンシングを使用して検出されます。 血清は、DNA 分離のために得られた同じ血液サンプルから分離されます。 2 回目の 0.5cc の血液サンプルをバイオマーカー測定用に採取します。 血清中のバイオマーカーレベルは、サイトカインのマルチプレックス EIA、miRNA プロファイルの配列決定、対象のペプチドレベル (VEGF、アンジオポエチン-2、および Nogo-B ペプチド) の ELISA を使用して分析されます。 利点には、この集団における CLD、NEC、敗血症、PDA、または IVH を予防するためのリスクベースの予防および治療戦略の開発の可能性が含まれます。