Helicobacter Pylori 감염이 방글라데시 어린이의 철결핍성 빈혈의 원인 또는 치료 실패입니까?

우리는 보완 연구를 제안합니다.

1. Dhaka 시 근처 도시 근교 지역 사회의 260명의 어린이를 대상으로 하는 전향적, 이중 맹검, 위약 대조 현장 시험이 제안되었습니다.
2. H. Pylori 감염 및 철 결핍성 빈혈이 있는 20명의 소아에서 항감염 치료 전후의 철 흡수 평가

3. 현장 시험

   1.1 연구 인구에 대한 설명 다카 시에서 북동쪽으로 7마일 떨어진 도시 주변 커뮤니티인 Nandipara에서 어린이를 모집합니다. 이 커뮤니티에는 약 2.5제곱마일의 면적에 3,500명의 인구가 있습니다. 거주민 중 남성의 70%는 일용직, 20%는 인력거꾼, 5%는 목수 또는 서비스업 종사자입니다. 여성의 15%는 일용 노동자이고 85%는 주부입니다. 평균 가족 규모는 4.5명입니다. 빈민가에는 식수와 요리를 위한 도시 상수도가 있으며 대부분의 가족은 부실하게 지어진 집에 살고 있습니다. 대부분의 집은 초가지붕과 대나무 또는 양철 지붕으로 된 진흙 벽입니다. 5세 미만 인구는 약 700명이다. 이 지역사회의 5명 미만 아동의 H. pylori 감염 유병률은 50%입니다.44 방글라데시의 국제 설사병 연구 센터(ICDDR,B)는 1986년부터 인구의 경미한 질병에 대해 주간 클리닉을 운영하고 있습니다.

   지역사회의 모든 어린이는 초기에 철결핍성 빈혈과 H. pylori 감염 여부를 검사합니다. 연구 및 테스트에 대한 설명 후 부모 또는 법적 보호자로부터 정보에 입각한 동의를 얻습니다. 이름, 생년월일, 성별, 체중, 키, 부모의 경제적 지위, 수유 유형, 지난 1개월 동안의 이전 투약을 포함한 인구 통계학적 정보가 기록됩니다.

   철결핍성 빈혈에 대한 스크리닝 핑거스틱으로 채취한 50µl 모세혈 샘플은 헤모글로빈(Hgb) 농도에 대해 평가됩니다. 헤모글로빈 농도 측정은 체내에 가장 풍부한 필수 철화합물의 양을 직접적으로 반영하기 때문에 철결핍성 빈혈을 선별하는 데 가장 유용한 검사입니다. 헤모글로빈 농도가 110g/l 미만인 어린이는 빈혈로 간주됩니다. 초기 선별검사를 통해 낮은 Hgb가 확인된 소아에서 철결핍성 빈혈 진단은 정맥혈 Hgb, 혈청 페리틴 농도 및 혈청 트랜스페린 수용체 농도로 확인됩니다. 헤모글로빈 농도는 염증이나 감염으로 인해 일시적으로 저하될 수 있으며 이러한 상황에서 병적 빈혈을 나타내지는 않습니다. 철분 상태를 평가하기 위한 모든 생화학적 검사 중에서 낮은 SF는 철 결핍에 대한 가장 구체적인 검사입니다. SF의 주요 단점은 감염자 염증 상태에 대한 반응으로 쉽게 상승한다는 것입니다. sTfR의 주요 이점 중 하나는 SF와 달리 sTfR이 감염이나 염증 과정에 의해 크게 영향을 받지 않는다는 것입니다. 그러나 sTfR 수치는 용혈성 빈혈, 즉 탈라세미아 등과 같이 적혈구 회전율이 증가한 상황에서 증가합니다. >8.5mg/l의 균일한 컷오프 값은 상승된 sTfR을 나타내며 따라서 철 결핍 또는 용혈성 빈혈을 나타냅니다.

   혈청 트랜스페린 수용체의 측정은 또한 특히 빈혈의 역학적 평가에서 철분 상태 평가를 위한 유망한 새로운 테스트가 되었습니다. 혈청 페리틴 측정과 함께 수행되는 혈청 트랜스페린 수용체는 만성 질환 또는 염증성 질환의 빈혈로부터 진정한 철 결핍을 구별하는 역할을 하므로 인구 연구에서 철 결핍성 빈혈의 진정한 유병률을 확립하는 데 큰 이점을 제공합니다. . 낮은 헤모글로빈, 낮은 혈청 페리틴 및 상승된 혈청 트랜스페린 수용체의 조합은 철 결핍성 빈혈의 진단입니다. 철 결핍 진단은 다음 기준이 충족될 때 이루어집니다: 트랜스페린 수용체 > 8.3 mg/l, 혈청 페리틴 농도

   H. Pylori 감염 아동 선별 빈혈 아동은 H. pylori 감염에 대한 많은 참고 진단 테스트에서 고려되는 UBT(urea breath test)를 사용하여 H. Pylori 감염 여부를 선별합니다. 우리는 최근 ICDDR,B.44에서 테스트를 설정했습니다. 간단히 절차는 다음과 같습니다.

   요소 호흡 테스트 2시간의 금식 기간 후 배큐테이너에서 기준선 13 CO2에 대해 호흡 샘플을 수집합니다. 그런 다음 100ml의 전유를 어린이가 섭취하도록 허용합니다. 10분 후 40mg의 13 C 요소(99% 13C, Tracer Technologies, Boston, Massachusetts)를 물 25ml에 녹인 후 제공합니다. 기질 투여 후, 호흡 샘플은 30분 후에 다시 중복 수집됩니다. 샘플은 비복귀 밸브가 부착된 양방향 소아용 마스크를 통해 진공 테이너로 수집되고 호흡기 CO2 질량 분석기의 13C 농도를 측정하기 위해 앨라배마 대학교로 배송하기 위해 보관됩니다. 기준선 초과분은 1000분의 1(델타 0/00)로 표시됩니다. 30분에 기준선 초과가 5.00/00인 호흡 검사는 H. pylori 감염에 대해 양성으로 간주됩니다.

   1.2 연구 아동의 선택 철결핍성 빈혈 아동의 체중이 국립보건통계센터(National Center for Health Statistics, NCHS)의 60%를 초과하고 결핍 질환이나 전신 감염의 증거가 없고 부모가 사전 동의를 한 경우 본 연구에 등록됩니다.

   제외 기준 다음과 같은 문제가 있는 아동은 제외됩니다.

   • 급성 감염 또는 명백한 염증 과정
   • 비타민 결핍 징후
   • 심한 빈혈(헤모글로빈
   • 심각한 영양실조(marasmus, marasmic kwasiorkar 또는 kwasiorkar)
   • 대변 ​​현미경 검사에서 구충 및/또는 편모충(낭종 또는 식물 형태)의 존재
   • 대변 ​​현미경 검사에서 지방의 존재
   • Guaiac 테스트로 입증된 대변 내 잠혈의 존재
   • 지난달에 어떤 이유로든 항생제 또는 약물을 복용한 이력

   1.3 절차 자세한 병력이 기록됩니다. 체중과 키는 연구에 등록할 때 측정됩니다. 벌거벗은 무게는 균형 저울(Gebrüder Soehnle, Murrhardt, Germany)을 사용하여 가장 근접한 10g까지 구하고 3회 연속 측정의 평균을 기록합니다. 기댄 길이는 슬라이드보드 유아 측정기(Harpenden, St. Albans, England)를 사용하여 2세 미만의 어린이에서 측정됩니다. 더 나이가 많은 소아의 경우, 수평 위치를 보장하기 위해 부착된 유체 레벨이 있는 발판과 머리 막대 사이에 금속 줄자를 확장하는 국부적으로 제작된 기구를 사용하여 기립 높이를 결정해야 합니다. 가장 가까운 0.1cm까지 두 번의 연속 높이 측정의 평균을 관찰값으로 기록합니다. 측정값은 National Center for Health Statistic 데이터에 따른 표준과 Z-점수로 평가된 영양 상태와 비교됩니다. , 표준 편차 단위의 중위 등가 백분율은 Waterlow의 계획에 따라 결정되고 분류됩니다.

   모든 어린이는 조사관 중 한 명에 의해 신체 검사를 받게 됩니다. 아이들은 무작위 배정에 따라 네 그룹 중 하나에 배정됩니다.

   • 안티 Hp 그룹
   • 철 그룹
   • Anti-Hp 그룹 + Fe 그룹
   • 위약 그룹

   철결핍 아동들 사이에서 철 요법에 대한 저항의 전반적인 유병률을 비교하기 위해, 철 결핍성 빈혈이 있지만 H. pylori 감염이 없는 아동으로 구성된 다섯 번째 그룹이 있을 것입니다. 이 그룹은 철분 요법으로 치료할 것입니다.

   항 Hp 요법: Clarithromycin 15 mg/kg/day 2회 분할 용량으로 10일 동안 + omeprazole 20 mg 단일 용량으로 14일 동안. ,

   철분 요법: Dallman41이 주장하는 철분 3mg/kg/일(또는 약 30mg/일) 철분 용량은 아침 식전 30분 전에 단일 용량으로 공급됩니다. 철분 요법은 90일 동안 제공됩니다.

   위약 포도당 시럽

   1.3.1 보충 개입 시럽은 매일 아침 공복 상태(식사 30분 전)에 단일 용량으로 공급됩니다. 위약 그룹의 아이들은 같은 양의 포도당 시럽을 받게 됩니다. 모든 요법은 동일한 짙은 갈색 용기에 보관되며 연구의 특성과 병 내부 내용물에 대해 알지 못하는 의료 종사자가 먹일 것입니다. 24시간 음식 섭취량은 식이 리콜에 의해 프리코딩된 형식으로 기록됩니다.

   아이들은 보충 종료 후 3개월 동안 추적될 것입니다. 요소 호흡 검사는 보충 후 마지막과 1개월 및 3개월에 반복됩니다. 혈청 페리틴, 트랜스페린 수용체 및 헤모글로빈 농도를 결정하기 위해 정맥혈(500μl)을 채취하여 보충 1개월 및 3개월 후에 실시합니다. 위약 그룹의 어린이는 연구 기간이 끝날 때 3개월 동안 감독하에 철분 보충을 받게 됩니다.

   1.4 표본 크기 계산 표본 크기는 (i) H. Pylori 감염의 유병률, (ii) 철분 요법에 대한 비반응의 유병률을 기준으로 계산됩니다.

   H. Pylori 감염 유병률에 따른 샘플 크기 계산

   H. Pylori 감염 50% 및 철결핍성 빈혈 70%의 유병률을 고려할 때,44 우리는 이 지역 사회의 영유아 중 50%에서 H. Pylori 관련 빈혈이 있을 것으로 예상합니다. 우리는 항생제와 철 요법을 병용한 치료 후 H. Pylori 관련 철 결핍성 빈혈의 유병률이 25% 감소할 것으로 예상합니다. 5% 수준과 80% 검정력에서 이 크기의 차이를 감지하기 위해 표본 크기는 다음과 같이 계산됩니다.

   N =[P1(100-P1) +P2(100-P2)]*8/(P1-P2)2

   여기서 P1= H. Pylori 관련 빈혈의 유병률 P2= 치료 후 H. Pylori 관련 빈혈의 유병률

   =[50(50) +25(75)] * 8 / (25)2

   = 각 그룹에서 56

   이 커뮤니티의 이전 연구에 따르면 약 15%의 탈락률이 예상됩니다. (Akramuzzaman SM, 개인 커뮤니케이션)을 사용하면 필요한 표본 크기는 각 그룹의 어린이 65명이며 전체 어린이 표본은 260명이 됩니다.

   철분 요법에 대한 무반응자의 유병률을 기반으로 한 계산

   Dinajpur(방글라데시 북부 지역)에서 진행 중인 빈혈 환자의 경구 철분 보충 프로그램에 대한 진행 중인 연구에서 관찰한 바에 따르면 철분 보충 그룹의 70%가 반응하지 않는 것으로 나타났습니다(S. Rahman, 개인 통신). 제안된 연구 모집단에서 H. Pylori 감염의 유병률은 약 50%이며,35 경구 철분 보충 후 비반응자는 H. pylori 양성 그룹에 비해 H. pylori 음성 그룹에서 40% 더 낮을 것으로 예상됩니다. . 5% 수준과 80% 검정력에서 이 크기의 차이를 감지하기 위해 표본 크기는 다음과 같이 계산됩니다.

   N = [P1(100-P1) +P2(100-P2)]*8/(P1-P2)2

   여기서 P1= H. pylori 감염 소아에서 철분 보충 후 빈혈 유병률 P2= H. pylori 감염되지 않은 소아에서 철분 보충 후 빈혈 유병률

   • [(70)(30) +(42)(58)] * 8 / (35)2 = 각 그룹에서 46

   탈락률이 15%인 경우 각 그룹의 아동 수는 53명, 즉 총 212명의 아동이 됩니다.

   우리는 이 연구를 위해 더 큰 표본 크기, 즉 260명의 어린이를 취할 것입니다.

   1.5 무작위화 마스터 무작위화 차트는 3의 크기를 취하는 무작위 순열 블록 번호를 사용하여 연구와 관련되지 않은 적절한 훈련을 받은 사람이 준비합니다. 항-Hp 요법, 철 요법 또는 위약을 포함하는 병은 모양이 동일하며 무작위 차트에 해당하는 순서로 배열되고 일련 번호가 지정됩니다. 병의 일련 번호는 연구에 등록한 환자의 일련 번호와 일치합니다. 한 그룹의 어린이가 항-Hp 요법과 철분 요법을 동시에 받게 되므로 연구를 이중 맹검으로 만들기 위해 각 어린이 그룹에 대해 두 개의 병(병 A 또는 B)이 있을 것입니다. 항Hp+철 요법에 속하는 어린이의 경우 항Hp 요법이 들어 있는 병 하나와 철 요법이 들어 있는 다른 병이 있습니다. 철 요법 또는 항-Hp 요법 단독에 속한 어린이는 약물이 들어 있는 한 병을 받고 다른 병에는 포도당 시럽이 들어 있습니다. 항-Hp 치료 기간이 14일이므로, 이 그룹에 속하는 아이들에게는 치료 기간을 네 그룹 간에 동일하게 하기 위해 나머지 한 달 동안 포도당 시럽을 제공합니다.

   1.6 실험실 테스트 Hb 농도는 시안메트헤모글로빈 방법으로 결정되며, 혈청 페리틴은 라디오 면역 측정법으로 결정됩니다. 혈청 트랜스페린 수용체는 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)에 의해 측정될 것이다. 대변은 guaiac 반응(Occultotest, Ames Co., Elkhart, Inc.,. 미국). 혈청 펩시노겐 및 가스트린은 방사면역측정법에 의해 측정될 것이다.

   1.7 연구 중단 - 연구 종료 전에 다른 장소로 연구 지역을 떠나거나 또는

   - 아이가 심각한 중간 감염으로 예정되지 않은 치료를 필요로 하기 때문입니다.

   분석 중 철회 치료 모든 무작위 아동의 결과가 연구 분석에 포함될 것입니다. 철회된 환자의 데이터는 철회 시점까지 포함됩니다. 해당 환자를 제외한 추가 분석도 진행할 예정이다.

   1.8 결과 변수

   주요한

   - 치료 후 H. Pylori 감염 발생률.

   - 혈청 헤모글로빈 상승, 혈청 페리틴 농도 또는 혈청 트랜스페린 수용체 수치 감소.

   - 중재 전후에 주로 정의된 IDA가 있는 각 그룹의 아동 수

   미성년자

   - 인체 측정 지표의 변화

2. 철분 흡수 연구 요소 호흡 검사에서 양성이고 철 결핍성 빈혈이 있는 20명의 추가 아동이 철 흡수 연구를 위해 선택됩니다. 연구의 목적 및 철분 흡수 연구와 관련된 모든 절차를 부모에게 설명하고 동의를 얻습니다. 철분 흡수 연구를 시작하기 전에 모든 어린이에게 최소 3주 동안 8mg Fe/l(Nidina 1; Nestle, 프랑스 파리)가 포함된 시판 유청 조정 젖소 분유를 제공합니다. 분유 수유 21일 후 임상 연구 및 서비스 센터의 대사 병동에 입원하게 됩니다.

라벨이 붙은 철(방사선 안정)의 적혈구 혼입은 소화관에서의 흡수를 검사하는 데 성공적으로 사용되었습니다. , 적혈구 혼입 방법은 철의 동위원소를 경구 투여한 후 투여 후 선택된 시간에 적혈구 내 철의 동위원소 비율을 측정하는 것을 포함한다. 우리는 Kastenmayer 등이 최근에 개발한 이중 안정 동위원소 기술로 어린이의 철분 흡수를 측정하는 기술을 따를 것입니다.

2.1 철 흡수 연구 방법

표지된 황산철 용액의 준비 57Fe 및 58Fe-철 산화물(Fe2O3)이 풍부한 것은 Oak Ridge National Laboratory(Oak Ridge, TN, USA)에서 구입합니다. 58Fe 제제(Oak ridge National Laboratories에서 제공)의 철 동위원소 조성은 (mg): (중량%) 54 Fe(0.65), 56 Fe(35.6)57 Fe(3.47) 및 58Fe(60.28). 57Fe(중량%)에서 철의 동위원소 조성은 다음과 같습니다. 54페(0.65), 56페(35.60), 57Fe(3.47) 및 58Fe(60.28).

산화제이철은 약 4시간 동안 가열하면서 용액을 통해 일산화탄소를 버블링하여 농축된 H2SO4에 용해됩니다. 그런 다음 몇 분 동안 정제된 질소를 통과시켜 용액을 감소시킵니다. 그런 다음 감소된 물을 사용하여 볼륨을 조정합니다. 생성된 57 FeSO4 및 58 FeSO4 용액의 2 ml 분취량을 불투명 앰플로 옮길 것입니다. 각 앰플은 질소로 정화되고 밀봉됩니다. 앰플은 총 철(황산제일철) 200µg/ml 및 57Fe 150µg/ml 또는 총 철(황산제일철) 700µg/ml 및 58Fe 420µg/ml를 포함합니다. 개별 앰플의 분취량을 사용하여 57Fe 및 58Fe 스파이크 작업 용액을 준비합니다.

비경구 57 Fe 용액의 안정성 및 안전성 i.v. 유아에게 57FeSO4 용액을 투여하면 발열성, 무균성 및 안정성이 테스트됩니다. Limulus amoebocyte lysate(LAL) 테스트 및 박테리아 및 진균 성장에 대한 반복 배양을 통해 57FeSO4 용액이 연구에 사용되는 농도에서 발열원이 없고 멸균 상태인지 확인합니다. 비경구 용액의 영양소 함량은 이전에 설명되었습니다. 57FeSO4 -영양 용액의 총 철 함량은 여과 전후(0.22µ 필터)와 실온에서 시간 경과에 따라 원자 흡광 분광법으로 결정됩니다.

2.2 철분 흡수 연구의 연구 설계 연구에 등록된 영아는 비경구 및 경장 공급의 조합을 받게 됩니다. 57FeSO4 용액은 비경구적으로 제공되며 58FeSO4는 경장 경로를 통해 제공됩니다. 57Fe 및 58Fe의 적혈구 결합은 초기 주입 후 2주 후에 채취한 혈액 샘플에서 측정됩니다. 순환 적혈구에 존재하는 I.V 투여 용량의 백분율은 순환 적혈구에 존재하는 (경구 투여 용량으로부터) 흡수된 철의 백분율에 대한 기준으로 사용될 것입니다. "보정된" 적혈구 58Fe 및 57Fe 혼입 백분율(58 Fe inc-cor/ 57Fe inc-cor)은 아래에 기술된 바와 같이 수학적으로 계산될 것이다.

소아에게 iv 투여 전, 0.7-0.8 57FeSO4용액(0.2mg/ml) ml을 비경구 영양액 30ml가 들어있는 burytrol에 멸균법을 이용하여 첨가한다. 이전에 안전하게 사용되었던 철-영양 혼합물은 주입 펌프의 도움으로 12-24시간 동안 어린이의 말초 정맥에 천천히 주입됩니다.

57FeSO4 용액의 비경구 주입 시작 직후, 장내 58FeSO4가 소아에게 제공됩니다. 이 기간 동안 57FeSO4의 비경구 주입이 계속됩니다. 비위관 영양관이 위에 제대로 위치했는지 확인한 후 위관을 흡인하여 위 내용물을 확인합니다. 위가 비어 있으면 58 FeSO4 1.5ml가 주사기를 통해 공급 튜브로 직접 전달됩니다. 그런 다음 튜브를 0.5ml의 멸균수로 씻어냅니다. 비경구적 57FeSO4의 투여량은 0.15mg/kg(57Fe-농축 황산제일철 용액)이며, 이는 0.12mg/kg의 57Fe를 제공합니다. 장내 투여량은 1.5mg/kg(58Fe 강화 황산제일철 용액)이며, 이는 0.8mg/kg의 58Fe를 제공합니다. 아이들은 10일 동안 헬리코박터 파일로리 감염(클라리트로마이신 + 오메프라졸) 치료를 받고 퇴원합니다.

한 달간의 치료 후 어머니는 자녀를 CRSC로 데려오도록 요청받을 것입니다. 반복 UBT 및 철 흡수 연구가 수행됩니다.

2.3 채혈 혈액 샘플은 안정 동위원소 투여 전(기준선)과 두 경우 모두 14일 후에 채취합니다. 혈액 샘플 크기는 샘플당 200-300µl입니다.

2.4 적혈구 철 혼입의 계산 표지된 철의 투여량을 투여한 후 특정 시간 't'에 적혈구에 혼입된 58Fe 및 57Fe(mg) 투여량은 Zlotkin et al 1995에서 사용한 것과 유사한 방식으로 계산됩니다.

58FE 주식회사 =Rt58/54 -Ro58/54 xFe 순환 x 0.00322 Ro58/54

57Feinc =R157/54-Ro57/54 x Fe 원형 x 0.0218 Ro57/54

이 방정식에서 58 Feinc 및 57Feinc는 mg으로 표시됩니다. R158/54, R157/54 및 R057/54는 58Fe/54Fe 및 57Fe/54Fe에 대한 중량 기준으로 표현된 동위원소 비율이며, 이는 투여 후 시간 "t" 및 기준선(pre 58Fe 및 사전 57Fe 용량) 각각; Fe circ는 순환하는 철의 양입니다. 시간 "t"에서 Fe circ; 0.0032 및 0.0218은 58 Fe 및 57 Fe의 자연 존재비(중량 분율)입니다. mg으로 표시되는 총 순환 철의 양 Fe circ는 다음과 같이 추정됩니다.

Fe circ. =BV x Hb x 3.47

여기서 BV는 리터 단위의 혈액량이며 체중의 0.085l/kg으로 가정합니다. Hb는 g/l 단위의 헤모글로빈 농도입니다. 3.47은 Hb 단위의 철 농도(mg/g)입니다.

적혈구에 통합된 투여된 58Fe 또는 57Fe의 양(% Fe inc)은 투여된 58Fe 또는 57Fe 용량의 백분율로 표시됩니다. Feinc.

• 58 Fe inc = 58Fe inc x 100 또는 Fe inc
• 57 Fe inc = 57 Fe inc x 100 57 Fe inc

적혈구 내 안정 동위원소 비율의 분석을 위한 수정된 백분율 적혈구는 i.v 주입된 57 Fe의 적혈구 통합 백분율을 사용하여 계산됩니다.

• 58Fe Inc-Cor = % 58Fe Inc X 100.
• 57 페인크

질량 분광 분석 질량 분광 분석을 위한 혈액 시료의 준비 및 농축 표준의 준비는 Kastenmayer et al. 헤파린 처리된 전혈 샘플은 1:3(혈액: 산)(vol/vol)의 비율로 농축된 HNO3로 습식 재처리됩니다. 소화된 용액은 10μg/ml의 철 농도를 생성하도록 탈이온수로 조정됩니다. 기기 교정을 위한 동위원소 스파이크 표준은 미지 시료와 동일한 방식으로 준비됩니다. 동위원소의 동시 경장(58Fe) 및 비경구(57Fe) 투여 전후 혈액 내 58Fe/54Fe 및 57Fe/54Fe에 대한 동위원소 비율은 Elan Model 250 ICP/MS 시스템을 사용하여 컴퓨터 제어 열 이온화 질량 분석기로 결정됩니다. (SCIEX, Inc., Thornhill, Ontario, Canada), Zlotkin et al. 캐나다 트로노토 대학교 소아 영양학과 박사.

삽관 검사 앞에서 설명한 대로14 표준 삽관 검사는 철분 흡수 연구가 완료된 후 이 소아 하위 집합에서 수행됩니다. 간단히 말해서 부드러운 위관(18G)이 위의 가장 의존적인 부분에 위치하게 됩니다. 수동 흡인을 사용하여 왼쪽 누운 자세로 누워 있는 소아로부터 위산 샘플을 수집합니다. 튜브의 위치는 청진, 위액 흡인 및 튜브에 주입된 물의 거의 완전한 회복에 의해 확인됩니다. 위액 샘플은 삽관 후 처음 10분 동안 폐기됩니다. 그 후, 샘플을 수집하고 90분 동안 15분 분량으로 저장합니다. 90분의 수집(기본 샘플) 후, 펜타가스트린(peptavlon, ICI)을 0.6ug/kg의 용량으로 피하 주사합니다. 60분 동안 펜타가스트린 자극 후 샘플을 "자극된 샘플"이라고 합니다. 각각의 15분 수집에서 위 분비물의 양을 기록하고 시간당 밀리리터로 표시합니다. 자동 적정기(Metrohm, Herisau, Switzerland)를 사용하여 pH 7.4까지 0.01N 수산화나트륨으로 1mL 위액을 적정하여 각각의 산 농도를 측정합니다. 총 산 산출량은 위액의 부피와 산 농도를 곱하여 각 시간 파인트에 대해 계산되었습니다. Basal(BAO)과 SAO(stimulated acid output)는 베이스라인 측정을 위해 수집된 2개의 샘플과 펜타가스트린 투여 후 수집된 4개의 샘플을 각각 기준으로 계산되었으며 mMol/h로 표시되었습니다.