저강도 유산소운동이 제1형 당뇨병 환자의 미세혈관내피기능에 미치는 영향

대상 본 연구는 2000년에 개정된 1975년 헬싱키 선언에 따라 수행되었으며, 브라질 리우데자네이루 주립대학 병원의 임상심사위원회는 본 연구를 승인하였다. 적격한 것으로 간주되면 모든 피험자는 IRB에서 승인한 정보에 입각한 동의 문서를 읽고 서명했습니다.

연구 대상자는 공공병원에서 추적관찰을 받은 환자들 중에서 모집하였다. 6년 이상, 25세에서 50세 사이(평균 34±7세)의 T1D 진단을 받은 22명의 개인이 연구에 포함되었습니다.

초기 임상 평가에는 체중, 키, 허리 둘레 및 체질량 지수(BMI)와 같은 인체 측정 데이터의 기록뿐만 아니라 환자 병력 및 신체 검사가 포함되었습니다. 혈압 측정은 조용한 환경에서 5분 후 누운 자세로 환자를 대상으로 수집되었습니다. 측정 사이에 2분 간격으로 두 번 반복되었습니다. 모든 측정은 12주간의 신체 훈련 전후에 수행되었습니다.

채혈 및 검사실 검사 피부 미세순환 평가를 위해 예정된 아침에 환자들은 채혈을 위해 12시간 금식 상태로 내원했습니다. 흡연자는 검사가 끝날 때까지 전날 밤부터 카페인을 섭취하거나 흡연하지 않아야 합니다. 다음 변수를 측정했습니다: 공복 및 식후 혈장 포도당, 총 콜레스테롤, LDL 및 HDL 콜레스테롤, 트리글리세리드, 트랜스아미나제, 고감도 C 반응성 단백질, 감마-글루타밀 전이 효소, 크레아틴 키나제, 요소, 크레아티닌, 알부민 및 요산 Cobas Mira-machine(Roche)을 사용한 반응. 신체 훈련 기간 전후에 혈액 샘플을 채취했습니다. LDL 콜레스테롤은 Friedewald의 공식을 사용하여 계산되었습니다. 제조사의 지시에 따라 상업용 ELISA 키트(Cayman Chemical Company, Ann Arbor, MI, USA)를 사용하여 IL-6 수준을 측정할 때까지 혈청 샘플을 -80°C에서 냉동 보관했습니다.

신체 훈련 연구 참가자들은 저강도를 목표로 하고 예비 심박수(HR)의 45%에 해당하는 유산소 훈련 프로토콜을 따랐습니다[(HRmax - HRrest) x 45% + HRrest]. 운동은 주 4회, 12주 동안 진행하였으며, 환자의 체력 수준에 따라 걷기와 달리기를 번갈아 가며 심박동수가 40~50%가 되도록 하였다. 심박수 모니터(Polar Electro Oy, Kempele, Finland)를 사용하여 심박수를 모니터링했습니다. 훈련의 첫 4주 동안에는 나머지 8주 동안 30~60분 분량의 점진적인 진행을 촉진하기 위해 매주 세션당 10분씩 추가 증분이 있었습니다.

생체내 비디오 현미경에 의한 모세혈관검사 피부 면적 mm2당 관류된 모세혈관의 수로 정의되는 모세혈관 밀도는 고해상도 비디오 현미경 시스템을 사용하여 고해상도 생체내 컬러 현미경(Moritex, Cambridge, UK)으로 평가되었습니다. 100W 수은 증기 램프 광원과 최종 배율 200X의 M200 대물렌즈를 포함하는 조명 광섬유 현미경. 영상획득은 비우세중간지골의 등쪽을 사용하였으며, 환자는 일정한 온도환경(23±1℃)에서 편안하게 앉아있는 상태에서 촬영하였다. 반자동 통합 시스템(Microvision Instruments, Evry, France)을 사용하여 사후 오프라인 분석을 위해 이미지를 획득하고 저장했습니다. 평균 모세관 밀도는 각각 1mm2의 3개의 연속적인 현미경 시야에서 보이는(즉, 자발적으로 관류되는) 모세관 수의 산술 평균으로 계산되었습니다. 이후 환자의 팔에 혈압 커프를 감고 수축기압(수축기 동맥압보다 50mmHg 이상)까지 부풀려 3분 동안 혈류를 완전히 차단시켰다(폐색 후 반응성 충혈 검사, PORH 검사). 커프 해제 후, 최대 충혈 반응이 발생할 것으로 예상되는 다음 60-90초 동안 이미지를 다시 획득하고 기록했습니다.

약리학적 자극에 대한 미세혈관 반응성 미세혈관 피부 반응성은 이전에 표준화되고 검증된 방법인 레이저 도플러 관류 모니터링(LDPM)에 의해 연구되었습니다. 피부 미세 순환 흐름의 실시간 변화는 약리학적 미세 이온 영동 시스템(PeriIont, Perimed AB)에 부착된 LDPM 시스템(파장 780 nm; Periflux 5001, Perimed AB, Järfälla, Sweden)을 통해 평가되었습니다. 레이저 탐침(PF 481-1, Perimed) 헤드에 이온영동 미세전극(PF 383, Perimed)을 삽입하고 탐침 온도를 32°C로 표준화하여 피부 온도 변화를 방지하고 결과적으로 미세혈관 흐름 측정. 약물 전달 전극은 200μl의 1% ACh 용액(Sigma Chemical Co., USA)으로 채워지고 눈에 보이는 피하 정맥 및 피부 색소 침착 영역에서 떨어진 팔뚝의 복부 표면에 배치되었습니다. 전류 분산을 위한 중성 전극은 주입 전극 위 15 cm에 배치하고 개입 기간이 끝날 때 수행되는 2차 검사 동안 재현성을 보장하기 위해 기준점을 표시하고 주석을 달았습니다. 5분 동안 기준선 흐름을 측정한 후 ACh(양극 전류)의 4개의 동일한 누적 용량을 10, 20, 40 및 80초 동안 0.1mA의 일정한 강도로 적용했으며 총 전하량은 1, 2, 4 및 8밀리쿨롱입니다. , 투여 사이에 각각 120초 간격을 허용합니다. ACh에 의해 유도된 미세혈관 흐름의 기록은 다음과 같이 10분 동안 수행되었습니다: 각 용량에 대해 2분 및 마지막 용량 후 흐름이 고원에 도달하도록 2분. 동일한 팔뚝의 다른 위치에 적용된 새로운 전달 전극을 사용하여 증류수에 용해된 1% sodium nitroprusside(SNP; Sigma Chemical CO, USA) 용액의 4회 용량을 음극 전류를 사용하여 전달했습니다(동일한 전하 및 간격은 ACh의 경우).

반정량적인 레이저 도플러 출력은 일반적인 합의(European Laser Doppler Users Groups, London, 1992)에 따라 출력 전압(1 PU = 10 mV)의 임의 관류 단위(PU)로 표현됩니다. ACh 곡선에 대한 흐름 응답 아래 영역은 Windows 2.5 소프트웨어용 PeriSoft(Perimed, Järfälla, Sweden)를 사용하여 정의할 수 있습니다. 이 면적은 정량적으로 측정되었으며 PU/s로 표시되었습니다.

생리적 자극에 대한 미세혈관 반응성 기록 세션 시작 시 위치했던 다른 레이저 프로브(PF 457, Perimed)를 사용하여 5분간 휴식 모세혈관 흐름을 측정한 후 PORH 테스트를 수행했습니다. 압력을 해제한 후 PORH 곡선 아래의 최대 유량과 면적을 측정했습니다. 휴식 흐름의 평균값을 기저 흐름 값으로 간주했습니다. 미세혈관 흐름이 PORH 검사 후(일반적으로 5-10분) 기저값으로 돌아왔을 때, 레이저 프로브를 42°C로 장기간(20분) 국소 가열하여 최대 피부 미세혈관 확장을 조사했습니다. 기준선 미세혈관 플럭스 값은 위에서 설명한 대로 계산되었습니다.

통계분석 값은 Shapiro-Wilk normality test 결과에 따라 정규분포 변수는 평균±표준오차로, 비모수분포 변수는 중앙값(백분위수 25~75)으로 표현하였다. . 데이터는 필요에 따라 양측 쌍체 t 테스트 또는 양측 Wilcoxon 부호 순위 테스트로 분석되었습니다. 귀무 가설은 P<0.05에서 기각되었습니다.