Az alacsony intenzitású aerob gyakorlatok hatása az 1-es típusú cukorbetegségben szenvedő betegek mikrovaszkuláris endothel funkciójára

Alanyok A jelen vizsgálatot a 2000-ben felülvizsgált 1975-ös Helsinki Nyilatkozatnak megfelelően végeztük, és a brazil Rio de Janeiro Állami Egyetem Egyetemi Kórházának Intézményi Felülvizsgáló Testülete jóváhagyta ezt a tanulmányt. Miután jogosultnak ítélték, minden alany elolvasta és aláírta az IRB által jóváhagyott, tájékozott beleegyező dokumentumot.

A vizsgálati alanyokat olyan betegek között toborozták, akiket egy állami kórházban követtek nyomon. Huszonkét, több mint 6 éve diagnosztizált T1D-vel rendelkező, 25 és 50 év közötti (átlag 34 ± 7 év) egyént vontak be a vizsgálatba.

A kezdeti klinikai értékelés magában foglalta a beteg anamnézisét és a fizikális vizsgálatot, valamint a következő antropometriai adatok rögzítését: súly, magasság, derékkörfogat és testtömeg-index (BMI). A vérnyomásméréseket hanyatt fekvő betegeknél 5 perc elteltével, csendes környezetben végeztük; kétszer megismételték a mérések közötti kétperces intervallumokkal. Minden mérést tizenkét hét fizikai edzés előtt és után végeztünk.

Vérvétel és laboratóriumi vizsgálatok A bőr mikrocirkulációjának felmérésére tervezett délelőtt a betegek 12 órás éhgyomri körülmények között jelentkeztek vérvételre. A dohányosok előző estétől a tesztek befejezéséig nem dohányozhatnak és nem fogyaszthattak koffeint. A következő változókat mérték: éhomi és étkezés utáni plazma glükóz, összkoleszterin, LDL és HDL koleszterin, trigliceridek, transzaminázok, nagy érzékenységű C-reaktív fehérje, gamma-glutamil-transzferáz, kreatin-kináz, karbamid, kreatinin, albumin és húgysav kolorimetriával Cobas Mira-gép (Roche) használatával. A fizikai edzés előtt és után vérmintákat vettünk. Az LDL-koleszterint a Friedewald-képlet alapján számítottuk ki. A szérummintákat -80 °C-on fagyasztva tartottuk az IL-6 szint méréséig kereskedelmi ELISA kittel (Cayman Chemical Company, Ann Arbor, MI, USA), a gyártó utasításai szerint.

Fizikai edzés A vizsgálatban résztvevők alacsony intenzitású aerob edzési protokollt követtek, amely a pulzusszám (HR) tartalék 45%-ának felel meg [(HRmax - HRrest) x 45% + HRrest]. Az edzések heti 4 alkalommal, 12 héten keresztül zajlottak, és a beteg edzettségi szintjének megfelelően váltakozó sétát és futást tartalmaztak, így a pulzustartalék 40-50% között volt. A pulzusszámot pulzusmérőkkel (Polar Electro Oy, Kempele, Finnország) követték. Az edzés első négy hetében minden héten további 10 perces emelések történtek, hogy a hátralévő nyolc hét során a 30-60 perces mennyiség fokozatos fejlődését elősegítse.

Kapillaroszkópia intravitális videomikroszkóppal A kapillárissűrűséget, amelyet a perfundált kapillárisok száma bőrfelület mm2-enként határoztunk meg, nagy felbontású intravitális színmikroszkóppal (Moritex, Cambridge, Egyesült Királyság) határoztuk meg egy epi-videomikroszkópos rendszer segítségével. megvilágított száloptikai mikroszkóp, amely 100 W-os higanygőzlámpa fényforrást és egy M200 objektívet tartalmaz 200-szoros végső nagyítással. A képalkotáshoz a nem domináns középső falanx dorsumát használtuk, amely a páciens állandó hőmérsékletű környezetben (23±1°C) kényelmesen ülve történt. A képeket egy félautomata integrált rendszer (Microvision Instruments, Evry, Franciaország) segítségével gyűjtöttük be és mentettük el a posterior off-line elemzéshez. Az átlagos kapillárissűrűséget a látható (azaz spontán perfundált) kapillárisok számának számtani átlagaként számítottuk ki három összefüggő, egyenként 1 mm2-es mikroszkopikus mezőben. Ezután vérnyomásmérő mandzsettát helyeztek a beteg karjára, és szupraszisztolés nyomásra fújták fel (50 Hgmm-rel a szisztolés artériás nyomás felett), hogy teljesen megszakítsák a véráramlást három percre (post-okkluzív reaktív hiperémia teszt, PORH teszt). A mandzsetta felengedése után ismét képeket vettünk és rögzítettünk a következő 60-90 másodpercben, amely alatt a maximális hiperémiás válasz bekövetkezése várható.

Mikrovaszkuláris reaktivitás farmakológiai stimulációra A mikrovaszkuláris bőrreaktivitást lézeres Doppler perfúziós monitorozással (LDPM) vizsgálták, amely módszer korábban már szabványosított és validált. A bőr mikrocirkulációs áramlásának valós idejű változásait egy farmakológiai mikro-iontoforézis rendszerhez (PeriIont, Perimed AB) csatlakoztatott LDPM rendszeren (hullámhossz 780 nm; Periflux 5001, Perimed AB, Järfälla, Svédország) keresztül értékeltük. Az iontoforézis mikroelektródákat (PF 383, Perimed) beépítettük a lézerszonda (PF 481-1, Perimed) fejébe, és a szonda hőmérsékletét 32 °C-ra standardizáltuk, hogy elkerüljük a bőr hőmérsékletének és ennek következtében a a mikrovaszkuláris áramlás mérése. A gyógyszeradagoló elektródákat 200 µl 1%-os ACh oldattal (Sigma Chemical Co., USA) töltöttük meg, és az alkar ventrális felületére helyeztük, távol a látható szubkután vénáktól és a bőrpigmentációtól. Az árameloszlást szolgáló semleges elektródákat 15 cm-rel az infúziós elektródák fölé helyeztük, és a referenciapontokat megjelöltük és megjegyzésekkel láttuk el, hogy biztosítsuk a reprodukálhatóságot a második vizsgálat során, amelyre a beavatkozási időszak végén került sor. Az alapvonal áramlásának 5 perces mérése után négy egyenlő kumulatív dózisú ACh-t (anódáram) alkalmaztunk állandó 0,1 mA intenzitás mellett 10, 20, 40 és 80 másodpercig, 1, 2, 4 és 8 millicoulomb össztöltéssel. 120 másodperces intervallumot tesz lehetővé az adagok között. Az ACh által kiváltott mikrovaszkuláris áramlás rögzítését 10 percig a következőképpen végeztük: 2 perc minden dózisnál és 2 perc, hogy az áramlás elérje a platót az utolsó adag után. Ugyanazon az alkaron egy másik helyre felhelyezett új adagolóelektródával négy adag 1%-os nátrium-nitropruszid (SNP; Sigma Chemical CO, USA) desztillált vízben oldott oldatát juttattuk be katódos árammal (ugyanolyan töltéssel és időközönként, mint ACh esetén).

A szemikvantitatív lézer Doppler-kimenetet a kimeneti feszültség tetszőleges perfúziós egységeiben (PU) fejezzük ki (1 PU = 10 mV) az általános konszenzusnak megfelelően (European Laser Doppler Users Groups, London, 1992). Az ACh görbére adott áramlási válasz alatti terület meghatározható a PeriSoft for Windows 2.5 szoftverrel (Perimed, Järfälla, Svédország); ezt a területet mennyiségileg mértük és PU/s-ban fejeztük ki.

Mikrovaszkuláris reaktivitás fiziológiás stimulációra A nyugalmi kapilláris áramlás 5 perces mérése után egy másik lézerszondával (PF 457, Perimed), amelyet a felvétel kezdetén helyeztek el, elvégeztük a PORH tesztet. A nyomáscsökkentést követően megmértük a maximális áramlást és a POHR görbe alatti területet. A nyugalmi áramlás középértékét tekintettük alapáramlási értéknek. Amikor a mikrovaszkuláris áramlás a PORH teszt után visszatért az alapértékre (tipikusan 5-10 perc), a maximális bőr mikrovazodilatációt vizsgáltuk a lézerszonda hosszan tartó (20 perces) lokális melegítésével 42°C-ra. A mikrovaszkuláris fluxus alapértékét a fent leírtak szerint számítottuk ki.

Statisztikai analízis Az értékeket a normál eloszlású változók átlag ± standard hibájaként, a nem paraméteres eloszlású változók esetén mediánként (25-75. százalék) fejeztük ki a Shapiro-Wilk normalitásteszt eredményei szerint. . Az adatokat kétirányú páros t-teszttel vagy a kétfarkú Wilcoxon előjeles rangú teszttel elemeztük. A nullhipotézist P<0,05 értéknél elvetettük.