Účinky aerobního cvičení nízké intenzity na mikrovaskulární endoteliální funkci pacientů s diabetem 1.

Subjekty Tato studie byla provedena v souladu s Helsinskou deklarací z roku 1975, revidovanou v roce 2000, a Institucionální revizní rada Univerzitní nemocnice Státní univerzity v Rio de Janeiru v Brazílii tuto studii schválila. Jakmile byly považovány za způsobilé, všechny subjekty si přečetly a podepsaly dokument informovaného souhlasu, který byl schválen IRB.

Subjekty studie byly vybrány mezi pacienty, kteří byli sledováni ve veřejné nemocnici. Do studie bylo zahrnuto 22 jedinců s T1D diagnostikovaným déle než 6 let ve věku od 25 do 50 let (průměr 34 ± 7 let).

Počáteční klinické hodnocení zahrnovalo anamnézu pacienta a fyzikální vyšetření, jakož i záznam následujících antropometrických údajů: hmotnost, výška, obvod pasu a index tělesné hmotnosti (BMI). Měření krevního tlaku bylo prováděno u pacientů v poloze na zádech po 5 minutách v klidném prostředí; byly opakovány dvakrát s dvouminutovými intervaly mezi měřeními. Všechna měření byla provedena před a po dvanácti týdnech fyzické přípravy.

Odběr krve a laboratorní testy Ráno určené k hodnocení kožní mikrocirkulace se pacienti dostavili na 12 hodin nalačno k odběru krve. Kuřáci by od předchozí noci až do ukončení testů neměli kouřit ani požívat kofein. Byly měřeny následující proměnné: plazmatická glukóza nalačno a po jídle, celkový cholesterol, LDL a HDL cholesterol, triglyceridy, transaminázy, vysoce citlivý C-reaktivní protein, gama-glutamyltransferáza, kreatinkináza, močovina, kreatinin, albumin a kyselina močová kolorimetricky reakce s použitím stroje Cobas Mira (Roche). Vzorky krve byly odebrány před a po období fyzického tréninku. LDL cholesterol byl vypočten pomocí Friedewaldova vzorce. Vzorky séra byly udržovány zmrazené při -80 °C až do měření hladin IL-6 pomocí komerční soupravy ELISA (Cayman Chemical Company, Ann Arbor, MI, USA), podle pokynů výrobce.

Fyzický trénink Účastníci studie dodržovali aerobní tréninkový protokol zaměřený na nízkou intenzitu a odpovídající 45 % rezervy srdeční frekvence (HR) [(HRmax - HRrest) x 45% + HRrest]. Cvičení byla prováděna 4krát týdně po dobu 12 týdnů a zahrnovala střídání chůze a běhu v souladu s kondiční úrovní pacienta tak, aby rezerva srdeční frekvence byla mezi 40-50 %. Srdeční frekvence byla monitorována pomocí monitorů srdeční frekvence (Polar Electro Oy, Kempele, Finsko). V prvních čtyřech týdnech tréninku byly další přírůstky o 10 minut na sezení každý týden, aby se podpořila postupná progrese v objemu 30 až 60 minut během zbývajících osmi týdnů.

Kapilaroskopie intravitální videomikroskopií Hustota kapilár, definovaná jako počet prokrvených kapilár na mm2 plochy kůže, byla hodnocena intravitální barevnou mikroskopií s vysokým rozlišením (Moritex, Cambridge, UK) za použití videomikroskopického systému s epi- mikroskop s osvětleným optickým vláknem obsahující světelný zdroj 100W rtuťové výbojky a objektiv M200 s konečným zvětšením 200X. Hřbet nedominantní střední falangy byl použit pro získání obrazu, ke kterému došlo, když pacient pohodlně seděl v prostředí s konstantní teplotou (23±1°C). Snímky byly získány a uloženy pro posteriorní off-line analýzu pomocí poloautomatického integrovaného systému (Microvision Instruments, Evry, Francie). Střední hustota kapilár byla vypočtena jako aritmetický průměr počtu viditelných (tj. spontánně prokrvených) kapilár ve třech souvislých mikroskopických polích, každé o velikosti 1 mm2. Poté byla na paži pacienta aplikována manžeta na měření krevního tlaku a nafouknuta na suprasystolický tlak (50 mm Hg nad systolickým arteriálním tlakem), aby se úplně přerušil průtok krve na tři minuty (test postokluzivní reaktivní hyperémie, PORH test). Po uvolnění manžety byly snímky znovu pořízeny a zaznamenány během následujících 60-90 sekund, během kterých se očekávalo, že dojde k maximální hyperemické odpovědi.

Mikrovaskulární reaktivita na farmakologickou stimulaci Mikrovaskulární kožní reaktivita byla studována pomocí laserového Dopplerova monitorování perfuze (LDPM), což je metoda, která byla dříve standardizována a ověřena. Změny v kožním mikrocirkulačním toku v reálném čase byly hodnoceny pomocí systému LDPM (vlnová délka 780 nm; Periflux 5001, Perimed AB, Järfälla, Švédsko) připojeného k farmakologickému systému mikroiontoforézy (PeriIont, Perimed AB). Iontoforézní mikroelektrody (PF 383, Perimed) byly zabudovány do hlavice laserové sondy (PF 481-1, Perimed) a teplota sondy byla standardizována na 32 °C, aby se zabránilo kolísání teploty kůže a následně i měření mikrovaskulárního průtoku. Elektrody pro podávání léčiva byly naplněny 200 ul 1% roztoku ACh (Sigma Chemical Co., USA) a umístěny na ventrální povrch předloktí, daleko od viditelných subkutánních žil a oblastí pigmentace kůže. Neutrální elektrody pro rozptyl proudu byly umístěny 15 cm nad infuzními elektrodami a referenční body byly označeny a opatřeny poznámkami, aby byla zajištěna reprodukovatelnost během druhého vyšetření, které proběhlo na konci období intervence. Po měření základního průtoku po dobu 5 minut byly aplikovány čtyři stejné kumulativní dávky ACh (anodální proud) s konstantní intenzitou 0,1 mA po dobu 10, 20, 40 a 80 sekund, s celkovými náboji 1, 2, 4 a 8 milicoulombů. v tomto pořadí, což umožňuje 120sekundový interval mezi dávkami. Záznam mikrovaskulárního toku indukovaného ACh byl prováděn po dobu 10 minut následovně: 2 minuty pro každou dávku a 2 minuty, aby se umožnilo toku dosáhnout plató po poslední dávce. Pomocí nové aplikační elektrody aplikované na jiné místo na stejném předloktí byly pomocí katodového proudu (stejné náboje a intervaly jako pro ACh).

Výstup laserového Dopplera, který je semikvantitativní, je vyjádřen v libovolných perfuzních jednotkách (PU) výstupního napětí (1 PU = 10 mV) v souladu s obecným konsensem (European Laser Doppler Users Groups, Londýn, 1992). Oblast pod průtokovou odezvou na křivku ACh by mohla být definována pomocí softwaru PeriSoft pro Windows 2.5 (Perimed, Järfälla, Švédsko); tato plocha byla kvantitativně měřena a vyjádřena v PU/s.

Mikrovaskulární reaktivita na fyziologickou stimulaci Po měření klidového kapilárního průtoku po dobu 5 minut pomocí další laserové sondy (PF 457, Perimed), která byla umístěna na začátku záznamu, byl proveden PORH test. Po uvolnění tlaku byl změřen maximální průtok a plocha pod křivkou PORH. Střední hodnota klidového průtoku byla považována za hodnotu bazálního průtoku. Když se mikrovaskulární průtok po PORH testu vrátil na bazální hodnotu (typicky 5-10 minut), byla vyšetřena maximální kožní mikrovaskulární vazodilatace s prodlouženým (20 minut) lokálním ohřevem laserové sondy na 42°C. Základní hodnota mikrovaskulárního toku byla vypočtena, jak je popsáno výše.

Statistická analýza Hodnoty byly vyjádřeny jako průměr ± směrodatná chyba průměru pro proměnné s normálním rozdělením a jako medián (percentily 25-75) pro proměnné s neparametrickým rozdělením podle výsledků Shapiro-Wilkova testu normality. . Data byla analyzována dvoustranným párovým t testem nebo dvoustranným Wilcoxonovým testem se znaménkem, podle potřeby. Nulová hypotéza byla zamítnuta při P<0,05.